Tris-甘油加樣緩沖液公司正在銷售的產(chǎn)品：Anti-TP53INP1 Antibody人重去甲腎上腺素
Anti-TP53I3 Antibody大鼠窖蛋白Caveolin1
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公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定,、靈敏度高,、操作簡單、易保存等特點,，咨詢并訂購,！

產(chǎn)品分類：蛋白電泳

儲存條件：4℃,12個月

用途：配制Tris非變性連續(xù)PAGE凝膠

注意事項：主要由Tris-HCl、甘油,、溴酚藍(lán)組成,。

 

 

配制與標(biāo)定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,；

EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示,，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈,，烘干,。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來水、純水洗凈,，烘干,、冷卻。

2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線,，搖勻,。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量,，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液,。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃,；檢測器溫度250℃,；分流進(jìn)樣，分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000,。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存,，一份置室溫中保存,，在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對照品溶液,，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量,。記錄下來,，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

巨大芽孢桿菌原鈣粘蛋白γA11抗體Anti-CCN3 AntibodyC反應(yīng)蛋白(CRP)

堅強(qiáng)芽孢桿菌原鈣粘蛋白γA12抗體Anti-CCNA1 AntibodyC多肽(CP)

黑色附球霉原鈣粘蛋白β12抗體Anti-CCNA2 Antibody(PB0402)CXC趨化因子受體7(CXCR7)

塔賓曲霉原鈣粘蛋白β3抗體Anti-CCNB1 AntibodyCXC趨化因子受體4(CXCR4)

朱黃籃狀菌原鈣粘蛋白γB1抗體Anti-CCNA1 AntibodyCXC趨化因子受體3(CXCR3)

大腸埃希菌原鈣粘蛋白γB2抗體Anti-CCNB1 AntibodyCXC趨化因子受體1(CXCR1)

腸桿菌屬原鈣粘蛋白γB4抗體Anti-CCNB1 Antibody(PB0130)CXC趨化因子配體16(CXCL16)

香菇原鈣粘蛋白γB6抗體Anti-CCNB2 AntibodyCX3C趨化因子受體1(CX3CR1)

膠孢鐮孢原鈣粘蛋白γC3抗體Anti-CCNB2 AntibodyCOP9結(jié)構(gòu)光形態(tài)發(fā)生同源物亞基2(擬南芥)(COPS2)

芥黃蜜環(huán)菌原鈣粘蛋白γC4抗體Anti-CCNB1 Antibodyc-myc癌基因產(chǎn)物(c-myc)

山茶磷蛋白聚糖PTPRZ抗體Anti-CCND2 Antibodyc-Jun基末端激/應(yīng)急激活的蛋白(JNK/SAPK)

桿狀毛霉神經(jīng)特異蛋白酪磷N5抗體Anti-CCND1 AntibodyCDCP1(CDCP1)

豬瘟病間接免疫熒光足表達(dá)蛋白/轉(zhuǎn)錄因子21抗體Anti-CCND3 Antibody(PB0131)CD8分子(CD8)

Bacillus tequilensis孕激受體抗體Anti-CCND1 AntibodyCD82分子(CD82)

枯草芽孢桿菌神經(jīng)突觸蛋白PCLO抗體Anti-CCND1 AntibodyCD73分子(CD73)

諾爾氏菌早老γ分泌2抗體Anti-CCP110 AntibodyCD6分子(CD6)

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：0.98

: AS1.166M010資源名稱: 苜蓿根瘤菌 質(zhì)量規(guī)格：0.99

小刺青霉Penicillium│spinulosum 質(zhì)量規(guī)格：0.98
Tris-甘油加樣緩沖液ACD/PTOP/FITC  熒光su標(biāo)記腎上腺皮質(zhì)發(fā)育異常蛋白IgG規(guī)格： 0.2ml

ACE1/FITC  熒光su標(biāo)記血管緊張su轉(zhuǎn)換meiIgG規(guī)格： 0.2ml

ACE2/FITC  熒光su標(biāo)記血管緊張su轉(zhuǎn)換mei2IgG規(guī)格： 0.2ml

ACEI/FITC  熒光su標(biāo)記血管緊張su1轉(zhuǎn)換mei抑制劑IgG規(guī)格： 0.2ml

Acetyl CoA Carboxylase/FITC  熒光su標(biāo)記兔抗人,、大、小鼠,、猴,、牛乙酰輔meiA羧化meiIgG規(guī)格： 0.2ml

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基,，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應(yīng)性曲線,，來確定最佳篩選濃度。

一般而言,，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL,；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度,。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,，37℃，CO2培養(yǎng)過夜,；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型,，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動物細(xì)胞為例，可設(shè)定50,，100,，250，500,，750,，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個濃度做三個平行孔,。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）,。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果,，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細(xì)胞類型,，轉(zhuǎn)染,，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。