公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義:LOX廣泛存在于動(dòng)植物組織中,,催化不飽和脂肪酸氧化反應(yīng),導(dǎo)致膜脂過(guò)氧化,。在生物體的生長(zhǎng)發(fā)育,、成熟衰老及逆境脅迫過(guò)程中具有重要作用。測(cè)定原理:LOX催化亞油酸氧化,,氧化產(chǎn)物在280nm處有特征吸收峰,;測(cè)定280nm吸光度增加速率,來(lái)計(jì)算LOX活性,。自備儀器和用品:研缽,、冰、臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、微量石英比色皿/96孔板(UV板),、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。 |
常見樣本處理方法:
1,、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2,、細(xì)菌,、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清,;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,,超聲3s,,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,,取上清,,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,,加入1mL提取液),,進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,,取上清,,置冰上待測(cè)。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1,、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,,直接操作,快速,、簡(jiǎn)便,。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10,。
3,、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,,鄰苯三酚法的200倍
4,、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效,。
5,、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6、回收試驗(yàn): X =102.3%,。7,、受外界影響因素小:干擾因素少,,重復(fù)性強(qiáng),。且特異性強(qiáng),不受類SOD物質(zhì)的干擾8,、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液,、組織、各種體液,、灌流液等,、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌,、植物組織,、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,,效果均佳,。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱,。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),,板上應(yīng)加蓋,,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求,。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,,以便 不時(shí)觀察,,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng),。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì),。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色,。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法,。
人參皂苷Rh1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: (R)-(-)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol磷化糖皮質(zhì)激受體抗體包裝25g
人參皂苷Rh3(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: (S)-(+)-2,2,2-Trifluoro-1-(9-anthryl)ethanol 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體包裝5g
人參皂苷Rh7(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: N-(2-Carboxybenzoyl)-(-)-10,2-camphorsultam糖皮質(zhì)激受體β抗體包裝100g
人參皂苷Rh8(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: p-Anisic Acid胰島葡萄糖6磷2抗體包裝25g
人參皂苷Rk1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 9-Anthracenecarboxylic Acid葡萄糖氧化抗體包裝5g
人參皂苷Rk2(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 5-(4-Methoxycarbonylphenyl)-10,15,20-triphenylporphyrin葡萄糖苷2β/Glucosidase IIβ抗體包裝5MG
人參皂苷RK3(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 2-Naphthoyl Chloride谷脫氫2抗體包裝10MG
人參皂苷Ro(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 4-Dimethylaminocinnamaldehyde磷化谷受體1抗體包裝1g
人工虎骨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 2,3-Naphthalenedicarboxylic Anhydrideγ-谷酰解抗體包裝250mg
人工牛黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 2,4,6-3(pentadecafluoroheptyl)-1,3,5-triazine谷酰-脯酰-tRNA合成抗體包裝100g
忍冬藤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 2,4,6-3(pentafluoroethyl)-1,3,5-triazine谷氧還蛋白2抗體包裝25g
絨毛龍芽草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 2,4,6-3(heptafluoropropyl)-1,3,5-triazine谷氧還蛋白5抗體包裝5g
鞣花(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: α-Thioglycerol 過(guò)氧化2抗體包裝100g
肉蓯蓉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 3,5-Dimethoxy-4-hydroxycinnamic Acid 過(guò)氧化7抗體包裝25g
肉蓯蓉(管花肉蓯蓉)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 4'-Hydroxyazobenzene-2-carboxylic AcidS轉(zhuǎn)移α1抗體包裝5g
: CGMCC1.458資源名稱: 蠟狀芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>98%,可用于培養(yǎng)尿激試劑盒雷內(nèi)酯;Triptophenolide
稻麥角菌Claviceps│oryzae-sativae 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%尿苷二磷葡萄糖神經(jīng)酰葡萄糖基轉(zhuǎn)移試劑盒藍(lán)萼;Glaucocalyxin A
節(jié)桿菌Arthrobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品尿苷二磷葡萄糖轉(zhuǎn)移2試劑盒蘆竹堿;Gramine
脂氧合酶 (LOX)測(cè)試盒100管/48樣米根霉 4-溴丁酰周期依賴性激1Elisa
白地霉 3-羥基-5-甲酸鹽酸多巴Elisa
黃發(fā)鏈霉 乙基溴化鎂膜聯(lián)蛋白A6Elisa
細(xì)枝孢 O-叔丁基-L-蘇叔丁酯人分泌型卷曲相關(guān)蛋白5Elisa
耐輻射奇球 5-羧基熒光琥珀酰亞酯凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白8Elisa
交替紅色桿屬 3-溴-2-(溴甲基)酸乙酯乙酰化高遷移族蛋白Elisa
柱孢屬 3,3-二甲基烯酸甲酯尾肢同源蛋白2Elisa
小棱盤 丁二酸胃生長(zhǎng)Elisa
多主葡萄殼 Boc-statineCD69分子Elisa
溶淀粉類芽孢桿 2-庚基苯并咪唑血管加壓Elisa
油菜核病 七甲基二硅氮烷簇集蛋白Elisa
乳白耙 3-甲酰基-4-羥基組織因子途徑抑制物1Elisa
大腸埃希 甲酸-d2細(xì)小病B29-IgG抗體Elisa
東方伊薩酵母 異丁基鋰細(xì)小病B29-IgM抗體Elisa
貝酵母 4,4'-二異酸基-3,3'-二甲基聯(lián)苯轉(zhuǎn)錄中介因子1βElisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,,1克瓶裝,每瓶140,,000單位,,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,,配成2800單位/ml,。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,,所以最好更濃一些,。可以取0.1克肝素凍干粉,,加3ml生理鹽水溶解后,,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,,加2.5ml生理鹽水,。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),,橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,,直至干燥后放入4℃保存,,可使2~5ml血液不凝固。
二,、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清,;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1,、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2,、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,,輕輕顛倒充分抗凝后,,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,,選擇合適的抗凝劑,。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①,、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,,充分抗凝,,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④,、抗凝收集的血漿冷凍保存后,,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定,。