商品屬性:
商品介紹:
測(cè)定意義: 脂質(zhì)過(guò)氧化是動(dòng)植物體內(nèi)活性氧(ROS)氧化生物膜的過(guò)程,脂質(zhì)過(guò)氧化物(LPO)是脂質(zhì)過(guò)氧化過(guò)程的產(chǎn)物,,即ROS與生物膜的磷脂,、酶和膜受體相關(guān)的多不飽和脂肪酸的側(cè)鏈及核酸等大分子物質(zhì)起脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)形成LPO,使細(xì)胞膜的流動(dòng)性和通透性發(fā)生改變,最終導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的改變,。因此,,LPO常被作為機(jī)體氧化應(yīng)激的一種指標(biāo),與某些疾病的病理過(guò)程,,如腫瘤,、化學(xué)中毒、感染,、炎 癥,、自身免疫疾病,、動(dòng)脈粥樣硬化(AS)及心腦血管疾病,以及衰老等生理過(guò)程密切相關(guān),。 測(cè)定原理: LPO在酸性條件下加熱,,產(chǎn)生小分子終產(chǎn)物MDA,MDA與硫代巴bi妥酸(thiobarbituric acid,,TBA)縮合,,生成紅色產(chǎn)物,在535nm有最大吸收峰,。 需自備的儀器和用品: 酶標(biāo)儀,、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī),、可調(diào)式移液器,、96孔板、研缽,、冰和蒸餾水,。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存,;堿性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,,4℃保存,;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存,;試劑三:粉劑×1瓶,,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,,混勻,,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,,4 ℃保存,,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存,;試劑六:液體30mL×1瓶,,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,,4 ℃保存,。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì),、臺(tái)式離心機(jī)、移液器,、1 ml玻璃比色皿,、研缽、冰和蒸餾水,。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測(cè),。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中 和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測(cè)。 | 2,、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,,加入1ml酸性提取液),,冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失),;冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和,, 混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測(cè),。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液),, 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,,超聲3s,,間隔10s,重復(fù)30次),,95℃水浴5min (蓋緊,,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測(cè),。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液),, 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,,超聲3s,,間隔10s,重復(fù)30次),,95℃水浴5min (蓋緊,,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測(cè),。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,,蒸餾水調(diào)零,。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水,、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2,。。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4,?!鰽測(cè)定管=A3-A4。
注意:空白管只需測(cè)定一次,。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子,。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用,。
上皮中性粒細(xì)胞激活肽78(ENA78)英文名:ENA78 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白25抗體包裝500mg
上皮性鈣黏附蛋白(CDHE)英文名:CDHE ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28A抗體包裝1g
上皮型脂肪結(jié)合蛋白(FABP5)英文名:FABP5 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28B抗體包裝5g
殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)英文名:BPI ELISA Kit腫瘤/抗原74抗體包裝1g
色胺羥化2(TPH2)英文名:TPH2 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白38抗體包裝25g
色胺羥化1(TPH1)英文名:TPH1 ELISA Kit7號(hào)染色體開放閱讀框72抗體包裝5g
三葉因子3(TFF3)英文名:TFF3 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體包裝100g
三葉因子2(TFF2)英文名:TFF2 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體包裝25g
三肽基肽Ⅰ(TPP1)英文名:TPP1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白43抗體包裝5g
三磷腺苷(ATP)英文名:ATP ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白46抗體包裝1g
三磷肌(IP3)英文名:IP3 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白63抗體包裝1g
朊病毒蛋白(PRNP)英文名:PRNP ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白54抗體包裝5g
軟骨關(guān)聯(lián)蛋白(CRTAP)英文名:CRTAP ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白61抗體包裝100ml
軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)英文名:COMP ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體包裝25ml
乳脂球表皮生長(zhǎng)因子8(MFGE8)英文名:MFGE8 ELISA Kit神經(jīng)酰激CERK抗體包裝100g
: AS3.2783資源名稱: 泡盛曲霉 質(zhì)量規(guī)格:純度> 98%,BR,,可用于培養(yǎng)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β激蛋白22試劑盒紫檀芪;Pterostilbene
平滑假絲酵母Candida│parapsilosis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3試劑盒竹節(jié)參皂苷IVa;Chikusetsu
普通變形桿菌Proteus│vulgaris 質(zhì)量規(guī)格:純度>98%,BR,可用于培養(yǎng)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2試劑盒梓;Catalponol
脂質(zhì)過(guò)氧化物(LPO)測(cè)試盒100管/96樣枯草芽孢桿 2,3-二羥基萘-6-磺酸鈉血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1Elisa
釀酒酵母 雙芬酸血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2Elisa
枯草芽孢桿 2-氨基-4-溴甲酯血管內(nèi)皮粘附分子1Elisa
熱帶假絲酵母 一頻哪酮血管內(nèi)皮抑Elisa
溜曲霉 2-氨基-3-溴吡啶血管黏附蛋白Elisa
棲藻海桿狀 3-基甲酯血管生成1Elisa
西蕃蓮莖基腐病 (S)-(-)-Alpha-氨基-Gamma-丁內(nèi)酯鹽血管生成2Elisa
芽孢桿 高酸鎳(II)六水合物, Reagent Grade血管生成受體酪激2Elisa
山柑芽孢桿 Fmoc-L-正纈血管生成樣蛋白2Elisa
假單胞屬 2-甲基-4-硝基吡啶血管生成樣蛋白3Elisa
繩狀籃狀 2-苯甲酰噻吩血管生長(zhǎng)Elisa
Bacillus (4-)苯血管性血友病因子Elisa
金針菇—HP3 六水合磷酸鎂血紅蛋白Elisa
黑孢霉 酸鎳六水合物血紅蛋白CElisa
大腸埃希 化釹六水合物血紅蛋白FElisa