精子形態(tài)學(xué)快速染色液公司正在銷售的產(chǎn)品：豚鼠前列腺素E受體2(EP2)試劑盒Anti-MTUS1 Antibody鋅指/環(huán)指蛋白2抗體
豚鼠粘蛋白5AC(MUC5AC)試劑盒Anti-MUC1 Antibody鋅指蛋白3/環(huán)指蛋白3抗體
豚鼠酮酸脫氫酶β(PDHβ)試劑盒Anti-MUC1 Antibody鋅指蛋白230抗體
豚鼠白介素13(IL-13)試劑盒Anti-MUC1 Antibody鋅

產(chǎn)品分類：細胞染色

儲存條件：室溫,避光,12個月

用途：用于精子形態(tài)分析,評估畸形率

注意事項：本染色方法系WHO推薦Diff-Quik染色法,因精子及細胞內(nèi)不同等電點的蛋白質(zhì)在相同的酸度下帶不同的電荷,能選擇性地結(jié)合相應(yīng)的染料而著色,。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定、靈敏度高,、操作簡單、易保存等特點,，咨詢并訂購,！

 

 

 

配制與標定的實驗原理：

1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末,，常用H4Y表示，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2,、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,，然后用水洗凈，烘干,。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來水,、純水洗凈，烘干,、冷卻。

2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿,。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標線,，搖勻,。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱,；柱溫120℃,；進樣口溫度250℃,；檢測器溫度250℃；分流進樣,，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000,。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存,，一份置室溫中保存,，在第1,、3、7,、10、15天重新配制一份對照品溶液,，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量,。記錄下來,，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型，培養(yǎng)基,，生長條件和細胞代謝率而變化,，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度,。

一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL,；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度,。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃,，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞,，可增加接種量,。

2）  根據(jù)細胞類型,，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動物細胞為例，可設(shè)定50,，100,，250，500,，750,，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔,。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當濃度,。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷,。則當細胞過于稠密，其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果,，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克隆（集落）的形成情況,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型,，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果,。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

糯稻根（標準品） Chlortoluron solutionG蛋白偶聯(lián)受體115抗體包裝1g

歐當歸內(nèi)酯A（標準品） DiuronG蛋白偶聯(lián)受體10抗體包裝5g

歐夾竹桃苷（標準品） Clofentezineβ-葡萄糖腦苷脂抗體包裝1g

歐前胡（標準品） Fenuron半乳糖凝集相關(guān)蛋白A抗體包裝250mg

藕節(jié)（標準品） Daminozide半乳糖凝集12抗體包裝5g

盤龍參（標準品） DEETγ基丁運載蛋白3抗體包裝100g

螃蟹（標準品） TerbumetonGTPIMAP家族成員1抗體包裝25g

胖大海（標準品） ThifluzamideGTPIMAP家族成員2抗體包裝5g

佩蘭（標準品） TsumacideGTPIMAP家族成員3抗體包裝1g

蟛蜞菊內(nèi)脂;蟛蜞菊內(nèi)酯(標準品) TerbuthylazineGTPIMAP家族成員4抗體包裝5g

披麻草（標準品） Tri-tert-butylphosphineGTPIMAP家族成員5抗體包裝25g

枇杷葉（標準品） TebufenpyradG蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白2抗體包裝5g

片姜黃（標準品） 1-NaphthaleneacetamideGTPIMAP家族成員7抗體包裝1g

平貝母（標準品） ThiaclopridGTPIMAP家族成員8抗體包裝25g

坡模-28-O-β-D-吡喃葡萄糖酯 Tricyclazol solutionG蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白1抗體包裝5g

細腳擬青霉Paecilomyces tenuipes 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標準品牛小腸堿性磷試劑盒沒食子酯;Propyl gallat

白靈菇Pleurotus│nebrodensis 質(zhì)量規(guī)格：>98%牛奶過敏原特異性IgE抗體芒果苷;Mangiferin

鏈霉菌屬Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP34,BR,可用于培養(yǎng)牛兒基焦磷合試劑盒沒食子;Gallic acid
精子形態(tài)學(xué)快速染色液Mtp53(Mutant type p53)  突變型P53抗原規(guī)格： 0.5mg

WIG-1(wtp53-induced gene 1)  野生型p53誘導(dǎo)基因1抗原規(guī)格： 0.5mg

P73 protein  P73腫瘤抑制基因抗原規(guī)格： 0.5mg

p70 S6 Kinase/P70 Beta1  p70S6Kb抗原規(guī)格： 0.5mg

PALB2(partner and locaizer of BRCA2)  癌易感基因相關(guān)蛋白2規(guī)格： 0.5mg