植物酸性磷酸酶提取試劑公司正在銷售的產(chǎn)品：兔絲裂原激活蛋白激酶(MAPK)試劑盒 Anti-Glycine decarboxylase/GLDC Antibody沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6抗體
兔生長分化因子9(GDF9)試劑盒Anti-GLRX3 Antibody磷酸化沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白6抗體
兔血管生成素4(ANGPT4)試劑盒 Anti-GNAQ Antibody磷酸化鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體
兔錨

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定,、靈敏度高、操作簡單,、易保存等特點(diǎn),，咨詢并訂購！

產(chǎn)品分類：細(xì)胞組分分離

儲存條件：室溫,12個月

用途：用于裂解植物組織,，提取植物中的酸性磷酸酶

注意事項：酸性磷酸酶(acid phosphatase,，ACP)分布極廣泛，遍布各種組織,，主要存在于細(xì)胞的溶酶體內(nèi),，所以常作為溶酶體標(biāo)志酶。溶酶體外的酸性磷酸酶存在于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和胞質(zhì)內(nèi),，各種動物中的酸性磷酸酶各有不同,，酸性磷酸酶的適宜pH為4.5～5.5。

 

 

配制與標(biāo)定的實驗原理：

1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末,，常用H4Y表示,，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。

2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,，然后用水洗凈,，烘干,。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來水、純水洗凈,，烘干,、冷卻。

2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻,。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量,，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液,。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃,；檢測器溫度250℃,；分流進(jìn)樣，分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000,。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存,，一份置室溫中保存,，在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對照品溶液,，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

賴匹林（標(biāo)準(zhǔn)品） Pitavastatin Calcium /NK-104環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲)抗體包裝250mg

賴脯胰島（標(biāo)準(zhǔn)品） Pitavastatin Calcium /NK-1043號染色體開放閱讀框30抗體包裝100g

（標(biāo)準(zhǔn)品） Potassium iodideCX3CL1抗體包裝1g

蘭索唑（標(biāo)準(zhǔn)品） Praziquan脫羧蛋白體36抗體包裝25g

樂鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品) Praziquan3號染色體開放閱讀框78抗體包裝5g

雷貝唑鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Prazosin HCl過敏C5a/補(bǔ)體C5a抗體包裝1g

(標(biāo)準(zhǔn)品) Prednisolone acetate卵巢癌抗原抗體包裝5g

雷諾(標(biāo)準(zhǔn)品) Prednisone Acetate粘附分子相關(guān)蛋白a1抗體包裝1g

雷帕霉/（標(biāo)準(zhǔn)品） Prednisone Acetate21號染色體開放閱讀框69抗體包裝100g

藜蘆(3,4-二氧基)(標(biāo)準(zhǔn)品) Pregabalin周期相關(guān)激抗體包裝500g

巴韋林（標(biāo)準(zhǔn)品） Procarbazine HCl癌相關(guān)抗原抗體包裝1g

(標(biāo)準(zhǔn)品) Procarbazine HCl半胱蛋白蛋白-6抗體(N端)包裝5g

(標(biāo)準(zhǔn)品) Procaterol HCl周期依賴性激3抗體包裝1g

福布?。?biāo)準(zhǔn)品） Propofol鈣調(diào)磷抗體包裝5g

福霉SV（標(biāo)準(zhǔn)品） Raloxifene HCl鈣蛋白1抗體包裝1g

微桿菌Microbacterium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：含>99.0%纖維膠凝蛋白3試劑盒突厥烯;Damascenone

YIM61420資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP32,BR,可用于培養(yǎng)纖維蛋白原降解產(chǎn)物試劑盒脫氧熊果苷;Deoxyarbutin

展青霉Penicillium│patulum 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品纖維蛋白原α鏈試劑盒11-羰基-Β-乙酰乳香;Acetyl
植物酸性磷酸酶提取試劑P53/FITC  熒光標(biāo)記腫瘤抑制因（野生型P53）IgG羥萘藍(lán) IND,94%(HPLC)

Mtp53/FITC  熒光標(biāo)記突變型P53IgG對羥苯鈉 CP,98%

P53(wt-p53)/FITC  熒光標(biāo)記腫瘤抑制因（野生型P53）IgG鉻鉛 AR,98.0%

wtp53/FITC  熒光標(biāo)記野生型p53單克隆IgG二酰 97%

p53BP1/53BP1/FITC  熒光標(biāo)記兔抗人,、大、小鼠p53結(jié)合蛋白1IgG鎂試劑Ⅰ 高純級,90%

p53BP1(Ser25/29) /FITC  熒光標(biāo)記兔抗人,、大,、小鼠化p53結(jié)合蛋白1IgG吐爾 AR,99.0%

phospho-P53 (Ser15) /FITC  熒光標(biāo)記化腫瘤抑制因P53IgG四氧化三錳 SP

phospho-P53 (Ser37) /FITC  熒光標(biāo)記化腫瘤抑制因P53IgG硫代硫鎂 超純級

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基,，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應(yīng)性曲線,，來確定最佳篩選濃度。

一般而言,，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL,；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn),，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,，37℃,，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,，可增加接種量,。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動物細(xì)胞為例,，可設(shè)定50，100,，250,，500，750,，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）,。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,，其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,，這取決于宿主細(xì)胞類型,，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果,。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。