商品介紹:
測(cè)定意義 尿素是生物體內(nèi)含氮化合物分解的終產(chǎn)物,在尿酶催化下分解轉(zhuǎn)化成氨,。血液尿素氮是腎功能的主要指標(biāo)之一,。 測(cè)定原理 在堿性條件下,尿酶水解尿素產(chǎn)生氨,,氨與次氯酸反應(yīng)生成氯胺,,再與酚衍生物作用生成綠色吲哚酚,在630nm處有特征吸收峰,。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平,、研缽、常溫離心機(jī),、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋,。 |
商品屬性:
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存,;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存,;試劑二:液體3 mL×1瓶,,4℃保存,;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,,用時(shí)加入3mL蒸餾水,,混勻,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑四:粉劑×1瓶,,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,,混勻,,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,,4 ℃保存,;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存,;試劑七:液體50mL×1瓶,,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì),、臺(tái)式離心機(jī),、移液器,、1 ml玻璃比色皿,、研缽、冰和蒸餾水,。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測(cè),。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測(cè),。 | 2,、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測(cè),。 NADH的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,,加入1ml堿性提取液),,冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),;冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測(cè)。 | 3,、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),,棄上清,,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,,功率20%或200W,,超聲3s,間隔10s,,重復(fù)30次),,95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失),;冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加 入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),,棄上清,,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液),, 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,,超聲3s,,間隔10s,重復(fù)30次),,95℃水浴5min (蓋緊,,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測(cè),。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零,。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min,。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2,?!鰽空白管=A1-A2。,。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液,、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4,。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Cetirizine 2HCl磷化表面趨化因子受體4抗體包裝25g
(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Cetrorelix Acetate磷化表面趨化因子受體2抗體包裝5g
地紅霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Chelerythrine中心體蛋白104抗體包裝100mg
地喹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Chlorhexidine Acatate/乙磷轉(zhuǎn)移1抗體包裝1g
地羅司(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Fluvastatin sodium salt6號(hào)染色體開放閱讀框163抗體包裝500mg
地雷他定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Fluvastatin sodium salt6號(hào)染色體開放閱讀框165抗體包裝1g
磷酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Clinafloxacin6號(hào)染色體開放閱讀框168抗體包裝250mg
/ 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Levamisole HCl6號(hào)染色體開放閱讀框173抗體包裝5g
海(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Levamisole HCl6號(hào)染色體開放閱讀框182抗體包裝1g
海雜質(zhì)Ⅰ(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Clomipramine HCL 6號(hào)染色體開放閱讀框186抗體包裝5g
海雜質(zhì)Ⅱ(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Clomipramine HCL 6號(hào)染色體開放閱讀框191抗體包裝10g
海雜質(zhì)Ⅲ(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Clopidogrel Bisulfate6號(hào)染色體開放閱讀框195抗體包裝1g
化(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Clopidogrel Bisulfate6號(hào)染色體開放閱讀框199抗體包裝5g
帕(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Clopidogrel Bisulfate7號(hào)染色體開放閱讀框34抗體包裝1g
普羅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Nabumetone6號(hào)染色體開放閱讀框201抗體包裝100g
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%雄烯二新;Mesaconitine
雅致小克銀漢霉(斜面)Cunninghamella elegans 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0%雄激受體試劑盒新;Neohesperidin
墻壁圣格奧爾根菌Georgenia│muralis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP31,BR胸腺依賴性抗原試劑盒細(xì)葉遠(yuǎn)志皂苷;Tenuifolin
尿素氮測(cè)試盒100管/48樣*灰葡萄孢 2,3,5,6-四溴對(duì)二甲苯BK病IgMkan抗體Elisa
假單胞 異丁酸香葉酯磷酯Cε鏈1Elisa
釀酒酵母 異丁酸橙花酯CD2關(guān)聯(lián)蛋白Elisa
龜裂鏈霉 2-氟烯酸甲酯轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族C成員6Elisa
金黃桿屬 5--2-三氟甲苯褐黑Elisa
產(chǎn)氨棒桿 5--2-甲苯γ谷氨酰轉(zhuǎn)移2Elisa
堀越氏芽孢桿 4-三氟乙優(yōu)黑Elisa
產(chǎn)朊假絲酵母 檸檬酸鐵 水合物雌酮1Elisa
薄層桿 3-溴-5-吡啶Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激1Elisa
產(chǎn)氨棒桿 反式-4-乙酰氨基環(huán)己Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激2Elisa
狂犬病病 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphocholine總巰基Elisa
少根根霉 (R)-1,2,3,4-四氫-1-萘酸色Elisa
粉狀畢翅酵母 3-吡啶甲脒蛋白聚糖Elisa
葡枝根霉 6-羥基吲唑雌受體βElisa
豌豆根瘤 2,5-二溴吡總表皮生長(zhǎng)因子受體Elisa
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子,。底物B對(duì)光敏感,,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用,。