公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定,、靈敏度高,、操作簡單、易保存等特點,,咨詢并訂購,!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
丙酮酸鈉溶液 | 100ml | FS-R6366 |
產(chǎn)品分類:細(xì)胞培養(yǎng)
儲存條件 4℃,6個月
用途 細(xì)胞培養(yǎng)的添加劑,尤其適用于干細(xì)胞培養(yǎng)
注意事項 經(jīng)無菌處理,。
配制與標(biāo)定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,;
EDTA是四元酸,,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,,溶解度很小,,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,,烘干,。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,,再用自來水、純水洗凈,,烘干,、冷卻。
2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,,蓋好小表面皿。
3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻,。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液,。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,;柱溫120℃;進樣口溫度250℃,;檢測器溫度250℃,;分流進樣,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000,。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,,在第1,、3、7,、10,、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
骨粘連蛋白(ON)ON ELISA Kitβ淀粉樣肽(1-28)抗體包裝5g
骨形成蛋白6(BMP-6)BMP-6 ELISA Kit有絲分裂激B抗體包裝5g
骨形成蛋白(BMPs)BMPs ELISA Kit軟骨蛋白聚糖抗體包裝25g
骨涎蛋白(BSP)BSP ELISA Kit去整合樣金屬蛋白10抗體包裝5g
骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)CTX-2 ELISA Kit含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號抑制物盒蛋白家族9抗體包裝100mg
骨特異性堿性磷B(ALP-B)ALP-B ELISA Kit含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號抑制物盒蛋白家族8抗體包裝1ml
骨特性堿性磷(BALP)BALP ELISA Kit植物生長激ABP1抗體包裝25ml
骨橋(OPN)OPN ELISA Kit肌動蛋白相關(guān)蛋白1抗體包裝5ml
骨膠原交聯(lián)(Cr)Cr ELISA Kitα紅分化相關(guān)因子抗體包裝1g
骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)OT/BGP ELISA Kit血管緊張激活蛋白1抗體包裝5g
骨鈣(OT)OT ELISA KitAlpha清蛋白抗體包裝1g
骨鈣(BGP)BGP ELISA KitAFAP1L2抗體包裝1g
骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)BMPR-Ⅱ ELISA Kit神經(jīng)分化相關(guān)蛋白AHNAK抗體包裝5MG
骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)BMPR-1A ELISA Kit粘合連接相關(guān)蛋白1抗體包裝1g
骨成型蛋白9(BMP-9)BMP-9 ELISA Kit去整合樣金屬蛋白13抗體包裝5g
脊髓小腦共濟失調(diào)2型蛋白抗體轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)Fluticasone Propionate is a synthetic glucocorticoid, used to treat non-allergic
丙酮酸鈉溶液CXCL4/PF-4/FITC 熒光標(biāo)記血小板因子4IgG環(huán)戊烷 ,,>99.0% (GC)
CXCL5/ENA-78/FITC 熒光標(biāo)記上皮中性?;罨?8IgG環(huán)戊烷 98%(GC)
GCP-2/CXCL6 /FITC 熒光標(biāo)記抗粒趨化蛋白2IgG環(huán)戊烷 for HPLC,農(nóng)殘級,,≥75% (GC)
CXCL7/NAP-2/PPBP/FITC 熒光標(biāo)記中性粒趨化蛋白2IgG木質(zhì)磺鈣 96%
CXCL9/MIG/CMK/FITC 熒光標(biāo)記γ干擾誘導(dǎo)單核因子IgG環(huán)己硫 98%
CXCL/IP- /FITC 熒光標(biāo)記CXCL趨化因子/干擾誘導(dǎo)蛋白IgG鄰苯二 AR,99.0%
CXCL11/ITAC/FITC 熒光標(biāo)記干擾誘導(dǎo)T趨化因子IgG正癸烷 standard for GC, ≥99.5% (GC)
SDF-1/CXCL12 /FITC 熒光標(biāo)記質(zhì)衍生因子-1IgG正癸烷 99%
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,,推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,,來確定最佳篩選濃度,。
一般而言,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL,;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細(xì)胞株,,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),,至少選擇5個濃度,。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,,CO2培養(yǎng)過夜,;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,可增加接種量,。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,,100,,250,500,,750,,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個濃度做三個平行孔,。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代),。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果,,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細(xì)胞類型,,轉(zhuǎn)染,,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。