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公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定、靈敏度高,、操作簡單,、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購,！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
NTE緩沖液 | 100ml | FS-R7332 |
產(chǎn)品分類：DNA溶液
儲存條件：室溫,12個月
用途：常規(guī)緩沖液,濃縮分離病毒
注意事項(xiàng)：無菌溶液,。主要由Tris、EDTA,、NaCl組成,。
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,；
EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示,，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈,，烘干,。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來水、純水洗凈,，烘干,、冷卻。
2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿。
3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標(biāo)線,，搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定：
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量,，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,；柱溫120℃,；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃,；分流進(jìn)樣,，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000,。
4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液,，一份置冷處保存，一份置室溫中保存,，在第1,、3、7,、10,、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
慢生根瘤菌胰島樣生長因子結(jié)合蛋白樣1抗體Human PTBP2 ELISA Kit抑瘤M(OSM)
嗜松青霉免疫球蛋白D重鏈保守區(qū)抗體Human PSTPIP1 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白R(hnRNP R)
膠孢IV型己糖激抗體Human PTBP1 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白P2(hnRNP P2)
大腸埃希氏菌宿主免疫球蛋白lambda樣肽1抗體Human PTCD3 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白M(hnRNP M)
澳型核果褐腐病菌NF-kappa-B抑制子beta抗體Human PTCH1 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白L(hnRNP L)
灰略紅鏈霉菌NF-kappa-B抑制子epsilon抗體Human PTCH2 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)
棱柱散尾菌中華變型絲/蘇蛋白激ICK抗體Human PTAFR ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白I(hnRNP I/PTB)
日內(nèi)瓦毛霉纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白172抗體Human PTBP1 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白H(hnRNP H)
朱紅栓菌絲/蘇蛋白激ICK抗體Human PTBP2 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白G(hnRNP G)
慢生根瘤菌肽酰tRNA水解ICT1抗體Human PTCD3 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白E(hnRNP E)
解脂亞羅酵母alpha干擾誘導(dǎo)蛋白27抗體Human PTCH1 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白D(hnRNP D)
弗氏檸檬桿菌纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白81抗體Human PTCH2 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白C(hnRNP C)
鴨疫里氏桿菌Gamma干擾誘導(dǎo)蛋白16抗體Human PSME4 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A3(hnRNP A3)
焦曲霉異檸檬脫氫3 beta亞基抗體Human PSME3 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A2/B1(hnRNP A2/B1)
貽貝弧菌干擾誘導(dǎo)的三角形四肽重復(fù)蛋白1抗體Human PSMF1 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A1(hnRNP A1)
蘇云金芽孢桿菌異檸檬脫氫gamma亞基抗體Human PSMG2 ELISA Kit異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A0(hnRNP A0)
: B687資源名稱: 熒光假單胞菌 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)白花前胡
: T.6757F3資源名稱: 傷菌 質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC)(R型)人參皂苷Rh2
酵母菌Saccharomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：用于高效液相色譜標(biāo)記仙茅苷
NTE緩沖液Cav-1 ELISA Kit 大鼠窖蛋白Caveolin1規(guī)格： 48T
VEGF ELISA KIT 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子規(guī)格： 48T
TNF- Alpha ELISA KIT 大鼠腫瘤壞死因子α規(guī)格： 48T
TGF- Beta1 ELISA kit 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1規(guī)格： 48T
SCF/MGF ELISA Kit 大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子規(guī)格： 48T
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,，培養(yǎng)基,，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度,。
一般而言,，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,；真菌300-1000μg/mL,。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn),，至少選擇5個濃度,。
1） 第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,，37℃,，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,，可增加接種量,。
2） 根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動物細(xì)胞為例,，可設(shè)定50，100,，250,，500，750,，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔,。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。
5） 按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1） 轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。
3） 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染,，以及篩選效果,。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。
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