淡水藻保存液Ⅲ公司正在銷售的產(chǎn)品：綿羊甲基化酶(Methylase)試劑盒Anti-FANCC Antibody人癌胚抗原
綿羊β-促脂素(β-LPH)試劑盒 Anti-FAP Antibody蕈堿型乙酰膽堿受體M2（抗原）
綿羊骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒 Anti-FANCG Antibody間隙連接蛋白43(多肽片斷抗原)
綿羊內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(NOS3/eNOS)試劑盒 Anti-

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定、靈敏度高,、操作簡單,、易保存等特點，咨詢并訂購,！

產(chǎn)品分類：植物染色

儲存條件：室溫,避光,12個月

用途：含有福爾馬林,、乙醇,、甘油等。

注意事項：推薦用于淡水藻類的保存,。此類保存液不能保色,，如需保色，需用此保存液作用1-2天后轉(zhuǎn)入保色液中長期保存,。

 

 

配制與標(biāo)定的實驗原理：

1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末,，常用H4Y表示，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,，然后用水洗凈，烘干,。

配制步驟：

1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來水,、純水洗凈，烘干,、冷卻,。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿,。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,，待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標(biāo)線,，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量,，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃,；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃,；分流進樣,，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000,。

4.實驗方法：配制的對照品溶液,，一份置冷處保存，一份置室溫中保存,，在第1,、3、7,、10,、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

釀酒酵母血栓合成抗體Human AQP9(Aquaporin-9) ELISA Kit人甲狀腺激免疫球蛋白(TSI)免疫試劑盒

粘狀曲霉多癌基因下調(diào)蛋白抗體Human AKR1B1(Aldose reductase) ELISA Kit人甲狀旁腺激相關(guān)蛋白(PTHrP)免疫試劑盒

白僵菌色C氧化蛋白5B抗體Human ADIPOR1(Adiponectin receptor protein 1) ELISA Kit人甲狀旁腺激1受體(PTH1R)免疫試劑盒

玫瑰考克氏菌色C氧化亞基3抗體Human GP6(Plaet glycoprotein VI) ELISA Kit人甲狀旁腺激1-34(PTH 1-34)抗體免疫試劑盒

棲熱菌屬色C氧化亞基6B抗體Human SOD3(Extracellular superoxide dismutase [Cu-Zn]) ELISA Kit人甲狀旁腺激1-34(PTH 1-34)免疫試劑盒

紫紅曲霉磷化致癌基因C-Myc抗體Human PRDX1(Peroxiredoxin-1) ELISA Kit人甲狀旁腺激(PTH)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌磷化致癌基因C-Myc抗體Human LPCAT3(Lysophospholipid acyltransferase 5) ELISA Kit人甲酰甲硫(fMet)免疫試劑盒

短裙竹蓀1-2色P450 11B1抗體Human OXM(Oxyntomodulin) ELISA Kit人甲肟前列腺D2(PGD2-MOX)免疫試劑盒

麗齒菌屬環(huán)磷鳥苷抗體Human SMAD2(Mothers against decapentaplegic homolog 2) ELISA Kit人甲基化DNA[蛋白]半胱S甲基轉(zhuǎn)移免疫試劑盒

多主葡萄殼菌內(nèi)皮因子維生B12受體抗體Human WNT3A(Protein Wnt-3a) ELISA Kit人甲基化CpG結(jié)合蛋白2(MECP2)免疫試劑盒

喜鹽裸囊菌原癌基因cMAF抗體Human Smad3/MADH3(Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3) ELISA Kit人脊髓灰質(zhì)炎病抗原(PV)免疫試劑盒

沙鏈霉菌18號染色體開放閱讀框56抗體Human RPESP(RPE-spondin) ELISA Kit人脊髓灰質(zhì)炎病(PV)抗體(IgG)免疫試劑盒

葡萄座腔菌3號染色體開放閱讀框22抗體Human SEMA3G(Semaphorin-3G) ELISA Kit人己糖激3(HK3)免疫試劑盒

出芽短梗霉19號染色體開放閱讀框46抗體Human OXM(Oxyntomodulin) ELISA Kit人己糖激(HK)免疫試劑盒

微型離心機 (便攜式)原癌基因cMAF抗體Human WNT3A(Protein Wnt-3a) ELISA Kit人幾丁質(zhì)3樣蛋白1(YKL-40/CHI3L1)免疫試劑盒

產(chǎn)短桿菌電壓依賴性鈣通道Cav2.1抗體Human Smad3/MADH3(Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3) ELISA Kit人幾丁質(zhì)1(殼三糖)(CHIT1)免疫試劑盒

20481=ATCC19435=CCM1877=NCDO604=NCIB6681=NCTC6681資源名稱: 乳鏈球菌 質(zhì)量規(guī)格：IND益母草苷

: HBUM171193資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格：ACS乙龍腦酯

: Ye845資源名稱: 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 質(zhì)量規(guī)格：BSα-亞麻
淡水藻保存液ⅢANG-4(Human Angiopoietin 4) ELISA Kit  人血管生成su4規(guī)格： 48T

sMHC-1(Human soluble myosin heavy chain 1) ELISA Kit  人可溶性肌球蛋白重鏈1規(guī)格： 48T

HSF-1(Human Heat Shock Factor 1) ELISA Kit  人熱休克因子1規(guī)格： 48T

VPI(Human vasopeptidase inhibitors) ELISA Kit  人血管活性肽mei抑制劑規(guī)格： 48T

CMLC-1(Human Cardiac myosin-light chains 1) ELISA Kit  人心肌肌凝蛋白輕鏈1規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,，培養(yǎng)基,，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度,。

一般而言,，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL,；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn),，至少選擇5個濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,，37℃,，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量,。

2）  根據(jù)細胞類型,，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,，可設(shè)定50,，100，250,，500,，750，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）,。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細胞過于稠密,，其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,，這取決于宿主細胞類型,，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果,。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。