詳細介紹
產(chǎn)品優(yōu)點如下:
1、快速簡便:雙試劑,,直接操作,,快速、簡便,。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10,。
3,、靈敏度高:檢測線0.5U/ml,是羥胺法5倍,,鄰苯三酚法的200倍
4,、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,試劑盒2~8℃存放3個月有效,。
5,、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%。6,、回收試驗: X =102.3%,。7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,,重復(fù)性強。且特異性強,,不受類SOD物質(zhì)的干擾8,、測試面廣:可測動物血液、組織,、各種體液,、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞,、細菌,、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品,、保健品等,,效果均佳。
商品介紹:
商品介紹 測定意義:果膠裂解酶(EC4.2.2.10)是果膠酶的重要組成部分,,是一種能降解植物細胞壁,,導(dǎo)致植物組織軟化甚至死亡的解聚酶,來源比較廣泛,主要來源于微生物,,可用于果汁,、果酒的澄清,提高水果出汁率,,植物病毒的純化,,紙漿的漂白和紡織品的生物精煉,在減少環(huán)境污染和降低能源消耗方面具有潛在的應(yīng)用價值,。測定原理:果膠裂解酶作用于果膠中的α-1,4糖苷鍵,,生成在還原端C4和C5之間位置具有不飽和鍵的不飽和寡聚半乳糖醛酸,在235nm處有特征吸收峰,。自備實驗用品及儀器:天平,、低溫離心機、紫外分光光度計/酶標儀,、微量石英比色皿/96孔板,、恒溫水浴鍋。 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用:
產(chǎn)品名稱 | 檢測方法 | 規(guī)格 | 貨號 |
微量法 | 100管/48樣 | AS6321401 |
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結(jié)合物后,,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起,。
3.為避免蒸發(fā),,板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中,。
4.加入底物后,,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,,ELISA板可避光放在實驗臺上,,以便 不時觀察,,待對照管顯色適當時,,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵,。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,,在定性測定中一般 可采用目視比色,。
2.如用酶標儀測定結(jié)果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度,、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法,。
實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,,每瓶140,,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,,加生理鹽水5ml,,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,,可抗凝人血3~5ml,,血液不會凝固。老鼠血易凝固,,所以最好更濃一些,。可以取0.1克肝素凍干粉,,加3ml生理鹽水溶解后,,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,,加2.5ml生理鹽水,。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),,橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,,直至干燥后放入4℃保存,,可使2~5ml血液不凝固。
二,、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清,;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1,、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2,、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存,。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA
選擇抗凝的注意點:
①,、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,,充分抗凝,,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④,、抗凝收集的血漿冷凍保存后,,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定,。
常見樣本處理方法:
1,、血清(漿)樣品:直接檢測。
2,、細菌,、細胞或組織樣品的制備: 細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清,;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液) ,,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,,超聲3s,,間隔10s,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,,取上清,,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,,加入1mL提取液),,進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,,取上清,,置冰上待測。
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