詳細介紹
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存,;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存,;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存,;試劑二:液體3 mL×1瓶,,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,,混勻,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,,用時加入3mL蒸餾水,,混勻,,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存,;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存,;試劑七:液體50mL×1瓶,,4 ℃保存,。
自備儀器和用品:
可見分光光度計,、臺式離心機、移液器,、1 ml玻璃比色皿、研缽,、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測定意義: 生物體內(nèi)巰基主要包括非蛋白質(zhì)巰基和蛋白質(zhì)巰基,。巰基化合物在體內(nèi)具有重要的解毒功能,對生物體的自我調(diào)節(jié)具有非常重要的生理意義,。 測定原理: 巰基基團與5,5’- 二硫代-雙-硝基苯甲酸(DTNB)反應,生成黃色化合物,,在412nm處有最大吸收峰。 自備實驗用品: 天平,、研缽,、可見分光光度計,、恒溫水浴鍋、1mL玻璃比色皿和蒸餾水,,甲醇。 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/24樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS632180 |
NAD+和NADH的提?。?/span>
1,、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml酸性提取液),,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml堿性提取液),,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測,。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),,冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測,。 NADH的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失),;冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和,, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測,。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),,棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液),, 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,,超聲3s,間隔10s,,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加 入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,,功率20%或200W,,超聲3s,,間隔10s,重復30次),,95℃水浴5min (蓋緊,,以防止水分散失),;冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測,。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,,調(diào)節(jié)波長到340 nm,,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min,。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水,、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2,?!鰽空白管=A1-A2。,。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時吸光值,,分別記為A3和A4?!鰽測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次,。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作,。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實驗完成后應立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用。
AV-951英文名: Adenosine磷化鈣調(diào)磷B亞基B1抗體包裝5g
BGJ398(NVP-BGJ398)英文名: Adiphenine HCl羊毛甾14α-去基化蛋白抗體包裝5g
Carmustine(進分)英文名: Adiphenine HCl補體C5抗體包裝1g
CEP-18770英文名: Alarelin Acetate5號染色體開放閱讀框24抗體包裝250mg
HSP990英文名: Alendronate Sodium5號染色體開放閱讀框42抗體包裝250mg
MK4827 (Niraparib)英文名: Alendronate Sodium5號染色體開放閱讀框49抗體包裝250mg
O-6-芐基鳥英文名: Allopurinol5號染色體開放閱讀框35抗體包裝1g
Ruxolitinib(INCB018424) pho...英文名: Allopurinol中心體蛋白192抗體包裝25g
SB431542,SB-431542英文名: Allylestrenol中心體蛋白27抗體包裝5g
TAE684英文名: Allylestrenol中心體蛋白290抗體包裝100g
Tamoxifen Citrate英文名: Alprostadil,PGE1,中心體蛋白63抗體包裝25g
Tariquidar,XR-9576英文名: Altrenogest中心體蛋白70/p10結合蛋白抗體包裝5g
阿法替尼英文名: Altrenogest中心體蛋白72抗體包裝1ml
阿法替尼雙馬來鹽英文名: Amantadine HCl中心體蛋白95抗體包裝25g
阿西替尼英文名: Amantadine HCl中心體蛋白89抗體包裝1g
: AS2.606資源名稱: 橢圓釀酒酵母 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,三合物胰高血糖樣肽1試劑盒異綠原C;Isochlorogenic
豌豆根瘤菌Rhizobium│leguminosarum 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品,三合物胰高血糖試劑盒異綠原B;Isochlorogenic
曼小毛霉原變種Micromucor│ramarnianus 質(zhì)量規(guī)格:效價≥750IU/MG,BP,BR胰多肽試劑盒異綠原A;Isochlorogenic
非蛋白質(zhì)巰基測試盒50管/24樣楊奇青霉 1-苯基正癸烷血管生成樣蛋白8Elisa
沙諾氏芽孢桿 3-溴甲酯谷脫羧65抗體Elisa
幼角鐮孢 4-鄰苯二甲酰亞氨基環(huán)己酮谷脫羧65IgG抗體Elisa
黑色附球霉 3,5-二溴-4-硝基吡唑新型隱球抗原Elisa
大腸埃希 薄荷酮, mixture of isomers血管內(nèi)皮生長因子DElisa
雅致枝霉 2-溴-3-氟三氟甲苯沙眼衣原體IgA抗體Elisa
谷棒桿 (S)-3-氨基四對甲苯磺酸鹽枸櫞酸Elisa
季也蒙邁耶氏酵母 2-氨基-2,4-二甲酯磷酸二酯9AElisa
大孔 (R)-(+)-alpha-氨基-gamma-丁內(nèi)酯鹽酸鹽耐膽鹽Elisa
嗜麥芽寡養(yǎng)單胞 普羅帕脒整合αMβ2Elisa
黃色糖多孢 N-芐基-雙鄰乙基氨基鹽酸鹽整合αVβ5Elisa
居真細屬 微管相關蛋白輕鏈3IIElisa
少根根霉 3,5-二氟-4-甲氧基苯甲甲型肝炎抗原Elisa
纖維單胞 帕米韋三水合物腫瘤蛋白p53Elisa
金黃桿 阿替唑鹽酸鹽氧化低密度脂蛋白IgG抗體Elisa