RNA雜交緩沖液公司正在銷售的產(chǎn)品：Anti-RPS12 Antibody大鼠S100蛋白
Anti-RPS13 Antibody大鼠S100B蛋白
Anti-RPS18 Antibody小鼠C肽
Anti-RPS15 Antibody人抗人絨毛膜促性腺抗體
Anti-RPS13 Antibody大鼠白介素1
Anti-RPS19BP1 Antibody小鼠熱休克蛋白糖蛋白96
Anti-RPS2

產(chǎn)品分類：核酸雜交

儲存條件：4℃,避光,6個月

用途：用于RNA的含甲酰胺的雜交緩沖液,，溶解RNA，并保護(hù)RNA

注意事項：由PIPES,、EDTA,、氯化鈉、去離子甲酰胺等組成,。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定、靈敏度高,、操作簡單,、易保存等特點，咨詢并訂購,！

 

 

 

配制與標(biāo)定的實驗原理：

1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末,，常用H4Y表示，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈,，烘干,。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來水、純水洗凈,，烘干,、冷卻。

2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,，待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標(biāo)線,，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量,，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,；柱溫120℃,；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃,；分流進(jìn)樣,，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000,。

4.實驗方法：配制的對照品溶液,，一份置冷處保存，一份置室溫中保存,，在第1,、3、7,、10,、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,，培養(yǎng)基,，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度,。

一般而言,，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn),，至少選擇5個濃度,。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃,，CO2培養(yǎng)過夜,；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量,。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型,，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例,，可設(shè)定50,，100，250,，500,，750，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染,，以及篩選效果,。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。

假單胞菌NK受體2C抗體Human LAPTM4B(Lysosomal-associated transmembrane protein 4B) ELISA Kit人抗卵巢抗體(AOAb)

新月彎孢霉性受體NK-p46抗體Human PTGS1(Prostaglandin G/H synthase 1) ELISA Kit人抗磷脂酰絲抗體(APSA)

橡膠樹假絲酵母性受體NK-p30抗體Human COL28A1(Collagen alpha-1(XXVIII) chain) ELISA Kit人抗磷脂抗體(Apl/APA)

水生黃桿菌磷化谷受體2A抗體Human FBLN1(Fibulin-1) ELISA Kit人抗磷壁抗體(TA)

日本根霉NK受體2D抗體Human FLT4(Vascular endothelial growth factor receptor 3) ELISA Kit人抗淋巴球蛋白(ALG)

嗜熱鏈球菌核呼吸因子-1抗體Human DICER1(Endoribonuclease Dicer) ELISA Kit人抗淋巴抗體(ALA/LCA)

多主葡萄殼菌神經(jīng)肽Y受體2抗體Human KIF5A(Kinesin heavy chain isoform 5A) ELISA Kit人抗鏈球菌溶血O/抗O(ASO)

海泥黃桿菌神經(jīng)絲蛋白抗體Human GAD2(Glutamate decarboxylase 2) ELISA Kit人抗尿激V2受體/精加壓受體2(AVPR2)

粗皮側(cè)耳（平菇）軸索過度生長抑制因子A+B抗體 Nogo-B/AHuman FGF6(Fibroblast growth factor 6) ELISA Kit人抗尿激/血管加壓/精加壓(ADH/VP/AVP)

紫芝神經(jīng)元3抗體Human SERPINB4(Serpin B4) ELISA Kit人抗類固生成抗體(SCA)

孢小殼銀漢霉NFkB誘導(dǎo)激抗體Human UCN3(Urocortin-3) ELISA Kit人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體(RANA)

Aeromicrobium marinum核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human MYH1(Myosin-1) ELISA Kit人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原(RANA)

硬結(jié)節(jié)桿菌神經(jīng)激肽A受體/K物質(zhì)受體抗體Human UBB(Polyubiquitin-B) ELISA Kit人抗可提取核抗原抗體(ENA-Ab)

白環(huán)柄菇神經(jīng)激肽B抗體Human FGFR1(Fibroblast growth factor receptor 1) ELISA Kit人抗可溶性肝抗原抗體(SLA)

產(chǎn)黃青霉神經(jīng)粘蛋白抗體Human BCAM(Basal cell adhesion molecule) ELISA Kit人抗菌肽(CAMP)

產(chǎn)氣莢膜梭菌 C型神經(jīng)束蛋白抗體Human GLUL(Glutamine synthetase) ELISA Kit人抗菌肽(Attacin)

綠色木霉Trichoderma│viride 質(zhì)量規(guī)格：>500U/MG,BR硫基葡萄糖

葡萄球菌Staphylococcus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR硫辛

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：0.97硫軟骨
RNA雜交緩沖液MPO(Mouse myeloperoxidase) ELISA Kit  小鼠髓過氧化物mei規(guī)格： 48T

Gzms-B(Mouse granzymes B) ELISA Kit  小鼠顆粒meiB規(guī)格： 48T

VEGFR-1/Flt1(Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 1) ELISA Kit  小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體1規(guī)格： 48T

Gzms-A(Mouse granzymes A) ELISA Kit  小鼠顆粒meiA規(guī)格： 48T

Lptn/LTN/XCL1(Mouse lymphotactin) ELISA Kit  小鼠淋巴細(xì)胞趨化因子規(guī)格： 48T