SOB培養(yǎng)基粉劑公司正在銷售的產(chǎn)品：兔α半乳糖基抗原(Gal)試劑盒 Anti-CD22 Antibody(0731)磷酸化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激酶抗體
兔S100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)試劑盒Anti-CD209 Antibody磷酸化血小板源性生長因子受體α
兔S100鈣結(jié)合蛋白A6(S100A6)試劑盒 Anti-CD22 Antibody磷酸化血小板源性生長因子受體α
兔胸腺基質(zhì)生成素(T

產(chǎn)品分類：培養(yǎng)基

儲存條件  室溫,24個月

用途  復(fù)蘇電轉(zhuǎn)化或化學(xué)轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞,提高轉(zhuǎn)化效率

注意事項  主要由高濃度胰蛋白胨,、酵母提取物、低濃度氯化鈉,、氯hua鉀等組成,。如要求無菌,可高壓滅菌15～20min。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定,、靈敏度高、操作簡單,、易保存等特點,，咨詢并訂購！

 

配制與標(biāo)定的實驗原理：

1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末,，常用H4Y表示,，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。

2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,，然后用水洗凈,，烘干。

配制步驟：

1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水,、純水洗凈,，烘干,、冷卻。

2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻,。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量,，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液,。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃,；檢測器溫度250℃,；分流進(jìn)樣，分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000,。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存,，一份置室溫中保存,，在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對照品溶液,，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量,。記錄下來,，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度,。

一般而言,，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度,。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,，37℃，CO2培養(yǎng)過夜,；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型,，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動物細(xì)胞為例，可設(shè)定50,，100,，250，500,，750,，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個濃度做三個平行孔,。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）,。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染,，以及篩選效果,。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。

胰島樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)IGFBP6 ELISA Kit磷化EGF應(yīng)答因子1抗體包裝25g

胰島樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)IGFBP4 ELISA Kitβ抗體包裝5g

胰島樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP3)IGFBP3 ELISA Kit磷化BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體包裝25g

胰島樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)IGFBP2 ELISA KitARF鳥苷交換因子BIG1抗體包裝5g

胰島樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)IGFBP1 ELISA Kit腦特異性同源蛋白BSX抗體包裝1g

胰島樣生長因子2(IGF2)IGF2 ELISA Kit鋅指蛋白47抗體包裝25g

胰島樣生長因子1(IGF1)IGF1 ELISA Kit?BTBD14A蛋白抗體包裝5g

胰島樣蛋白6(INSL6)INSL6 ELISA Kit鋅指蛋白851抗體包裝25g

胰島樣蛋白5(INSL5)INSL5 ELISA Kit嗜乳脂蛋白2亞型A1抗體包裝5g

胰島樣蛋白3(INSL3)INSL3 ELISA Kit磷化c-fos抗體包裝100g

胰島受體底物2(IRS2)IRS2 ELISA Kit磷化c-fos抗體包裝25g

胰島受體底物1(IRS1)IRS1 ELISA Kit磷化原癌基因c-Jun抗體包裝500g

胰島受體(ISR)ISR ELISA Kit磷化原癌基因c-kit抗體包裝5ml

一氧化氮合運輸因子(NOSTRIN)NOSTRIN ELISA Kit1號染色體開放閱讀框148抗體包裝1g

葉受體1(FOLR1)FOLR1 ELISA Kit性T抗原-4抗體包裝5g

去整合樣金屬蛋白23抗體白介21(IL21)MK-801 (Dizocilpine) is a potent N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor antagonist
SOB培養(yǎng)基粉劑Phospho-FoxO1 (Ser256) /FITC  熒光標(biāo)記兔抗人,、大,、小鼠叉頭蛋白家族1IgG2,5-二-2,5-己二 99%

FOXO3A/FITC  熒光標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子FOXO3AIgG2,5-二-3-己炔-2,5-二 99%

Phospho-FoxO3a (Ser318/321) /FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠叉頭蛋白3AIgG烯 CP(劇品)

Phospho-FoxO3a (Ser294) /FITC  熒光標(biāo)記兔抗人,、大,、小鼠叉頭蛋白3AIgG1,2-環(huán)己烷二二縮水甘油酯 90%

Phospho-FoxO3a (Ser253) /FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠叉頭蛋白3AIgG戊二(50%) AR,50% in H2O

FOXO4/FITC  熒光標(biāo)記兔抗人,、大、小鼠叉頭蛋白4IgG異丁烯 99.5%

Phospho-FoxO4 (Ser193) /FITC  熒光標(biāo)記兔抗人,、大,、小鼠叉頭蛋白4IgG異丁烯 99%

phospho-FOXO4 (phospho S197) /FITC  熒光標(biāo)記兔抗人、大,、小鼠叉頭蛋白4IgG嘧啶 98%