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丙酮酸脫氫酶(PDH)測試盒100管/96樣

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更新時(shí)間:2022-06-16 16:58:20瀏覽次數(shù):309

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/96樣
貨號 AS6321143 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 檢測方法 微量法
丙酮酸脫氫酶(PDH)測試盒100管/96樣公司正在出售的產(chǎn)品:胰島受體相關(guān)受體抗體Goat Anti-chi IgM/FITC 熒光標(biāo)記羊抗雞IgM
INCA1蛋白抗體Rb Anti-FITC/FITC 熒光標(biāo)記兔抗FITC
IQCE蛋白抗體Goat Anti-human IgA/FITC 熒光標(biāo)記羊抗人IgA
雞傳染性法氏囊病病抗體Goat Anti-human IgG/FITC 熒光

詳細(xì)介紹

試劑的組成和配制:

酸性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存,;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存,;試劑二:液體3 mL×1瓶,,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,,-20 ℃保存,,用時(shí)加入3mL蒸餾水,,混勻,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,,用時(shí)加入3mL蒸餾水,,混勻,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑五:液體3.6mL×1瓶,,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,,4 ℃保存,;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存,。

自備儀器和用品:

可見分光光度計(jì),、臺式離心機(jī)、移液器,、1 ml玻璃比色皿,、研缽、冰和蒸餾水,。

商品介紹:

測定意義

PDH(EC 4.1.1.1)廣泛存在于動物,、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,,是丙酮酸脫氫酶復(fù)合體(PDHC)催化丙酮酸氧化脫羧的限速酶,,催化丙酮酸脫梭生成羥乙ji-TPP,把糖酵解和三羧酸循環(huán)連接起來,。

測定原理PDH催化丙酮酸脫氫,,同時(shí)還原WST-8產(chǎn)生黃色物質(zhì),從而導(dǎo)致450nm光吸收的增加,??梢姺止夤舛扔?jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋,、臺式離心機(jī),、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板,、研缽,、冰和蒸餾水。

商品屬性:

產(chǎn)品名稱

丙酮酸脫氫酶(PDH)測試盒100管/96樣

檢測方法

微量法

產(chǎn)品規(guī)格

100管/96樣

產(chǎn)品貨號

AS6321143

NAD+和NADH的提?。?/span>

1,、血清(漿)中NAD+和NADH的提取

NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建

議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失);

冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中

和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測,。

NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建

議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml堿性提取液),,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失),;

冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中

和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測。

2,、組織中NAD+和NADH的提?。?/span>

NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g

組織,,加入1ml酸性提取液),,冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),;冰浴

中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測。

NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g

組織,,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失);冰浴

中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中和,,

混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測。

3,、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span>

NAD+的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),,棄上清,,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性

提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液),

超聲波破碎(冰浴,,功率20%或200W,,超聲3s,間隔10s,,重復(fù)30次),,95℃水浴5min

(蓋緊,以防止水分散失),;冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加

入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測。

NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),,棄上清,,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿

性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液),

超聲波破碎(冰浴,,功率20%或200W,,超聲3s,間隔10s,,重復(fù)30次),,95℃水浴5min

(蓋緊,以防止水分散失),;冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加

入500μl酸性提取液使之中和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測。

ADH測定操作:

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,,調(diào)節(jié)波長到340 nm,,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min,。

3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水,、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2,。。

4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液,、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,,分別記為A3和A4,。△A測定管=A3-A4,。

注意:空白管只需測定一次,。

注意事項(xiàng):

①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。

③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長時(shí)間打開蓋子,。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。

⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。

⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用,。

5-羥色鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Potassium bicarbonate轉(zhuǎn)錄因子E2F-2抗體包裝500g

6'''-阿魏酰斯皮諾英文名: Sodium dodecanesulfonate內(nèi)皮受體蛋白酪激抗體包裝250mg

6''-O-二酰基染料木苷英文名: Theophylline酪蛋白激受體B2抗體包裝1g

6''-二沙苑子苷單酯英文名: Cellulase磷化雌激受體ER alpha 抗體包裝5g

6'-O-β-D-葡萄糖基龍膽苦苷英文名: Chondroitin sulfate重組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白抗體包裝25ml

6'-O-β-D-芹糖獐芽菜苷英文名: Isonicotinic acid雌激受體α抗體(用于western blot)包裝5ml

6,7,4'-三羥基異黃英文名: L-Malic acid雌激受體α/β抗體包裝25g

6-氧基二氫血根堿英文名: Proteinase K Solution, 20 mg/ml自分泌運(yùn)動因子抗體包裝5g

6-氧基山柰-3-O-蕓香糖苷英文名: Poly-L-lysine solution ( 0.1%)酪蛋白激A3受體抗體包裝100ml

6-姜(姜辣)英文名: Tetracycline hydrochloride solution, 50 mg/ml, sterileEHM2蛋白抗體包裝1g

6-姜烯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: D-Glucose-6-phosphate, disodium, dihydrate磷化真核翻譯起始因子4E抗體包裝1g

6-羥基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Sodium succinate翻譯延伸因子EF-1a抗體包裝5g

6-基異麥冬黃烷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Hemoglobin磷化雌激受體α抗體包裝1g

7,4'-二羥基黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: PEG 10000磷化表皮生長因子受體抗體包裝1g

7,8-二氫生物蝶呤英文名: DL-Malic acid磷化絲裂原活化蛋白激1抗體包裝5g

JCM3170=ATCC27875=CBS420.74=CECT3304=DSM4資源名稱: 披發(fā)糖多孢菌披發(fā)亞種 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品髓性核分化抗原試劑盒肉豆蔻;Myristicin

瓦克青霉Penicillium│waksmanii 質(zhì)量規(guī)格:純度大于99%,R構(gòu)型髓系觸發(fā)受體-1試劑盒忍冬苷;Lonicerin

ATCCBAA-482=CCM7143=CIP106688=DSM15638=NC資源名稱: 低溫乳桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>99%髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體試劑盒日蟾蜍他靈;Gamabufotalin
丙酮酸脫氫酶(PDH)測試盒100管/96樣枯草芽孢桿 2--5-吡啶酪蛋白激受體ErbB4Elisa

奇異鏈霉 (S)-N-芐氧羰基-3-氨基-3-苯基-1-磷酸化酪蛋白激受體ErbB2Elisa

芽孢桿屬 1-辛烯-3-乙酸酯磷酸化酪蛋白激受體ErbB4Elisa

釀酒酵母 吡咯并[2,3-D]嘧啶-4(氫)-酮SMO同系物Elisa

球孢白僵 2,3,5-三氟芐γ分泌Elisa

灰黃淺黃酵母 2,4-二甲基吡咯-3,5-二羧酸乙酯鈣粘連蛋白Elisa

瘡痂病鏈霉 2,3,5-三氟苯乙鎂離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1Elisa

Corynebacterium sp. 4-溴-alpha-苯乙趨化Elisa

薄層屬 1H-吡咯并[2,3-C]吡啶-2-羧酸乙酯膽固-25-羥化Elisa

總狀毛霉 1,1,2-氧基乙烷載脂蛋白MElisa

土壤短芽胞桿 Belleau's試劑法尼酯X受體Elisa

米根霉 -1-乙酸肝三酰甘油脂肪Elisa

頭孢霉 索那新果糖激Elisa

黑曲霉 2-(苯磺?;?吡啶抗凝血原抗體Elisa

迂回殼囊孢 環(huán)己基肼鹽酸鹽蛋白酪磷酸Elisa


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