詳細介紹
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/24樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321403 |
商品介紹:
測定意義:多聚半乳糖醛酸酶(EC3.2.1.15)是一種細胞壁結(jié)合蛋白,,可以催化果膠分子中α-(1,4)-聚半乳糖醛酸的裂解,參與果膠的降解,,使細胞壁結(jié)構(gòu)解體,,導(dǎo)致果實軟化,與果實成熟,、葉和花的脫落,、病原物防御,細胞伸展發(fā)育以及木質(zhì)化有關(guān),,在植物抗病性和食品貯藏保鮮領(lǐng)域具有較高的研究價值,。測定原理:多聚半乳糖醛酸酶水解果膠酸生成半乳糖醛酸,具有還原性醛基,,與DNS試劑反應(yīng)生成紅棕色物質(zhì),,在540nm有特征吸收峰,測定540nm處吸光值變化可計算得多聚半乳糖醛酸酶活性,。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存,;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存,;試劑二:液體3 mL×1瓶,,4℃保存,;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,,用時加入3mL蒸餾水,,混勻,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑四:粉劑×1瓶,,4 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,,混勻,,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑五:液體3.6mL×1瓶,,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,,4 ℃保存,;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存,。
自備儀器和用品:
可見分光光度計,、臺式離心機、移液器,、1 ml玻璃比色皿,、研缽、冰和蒸餾水,。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測,。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測,。 | 2,、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測,。 NADH的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,,加入1ml堿性提取液),,冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),;冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測。 | 3,、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:先收集細胞或細菌到離心管內(nèi),,棄上清,,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,,功率20%或200W,,超聲3s,間隔10s,,重復(fù)30次),,95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失),;冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測,。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液),, 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,,超聲3s,,間隔10s,重復(fù)30次),,95℃水浴5min (蓋緊,,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測,。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預(yù)熱30 min,,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零,。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min,。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A1和A2,?!鰽空白管=A1-A2。,。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液,、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時吸光值,,分別記為A3和A4?!鰽測定管=A3-A4,。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A,、B液時,,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用,。
白靈菇c-mer原癌基因酪激抗體Human GDF2(Growth/differentiation factor 2) ELISA Kit人甘露糖(Mannose)免疫試劑盒
假單胞菌Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣抗體Human OSMR(Oncostatin-M-specific receptor subunit beta) ELISA Kit人甘露聚糖結(jié)合凝集絲肽1(C4/C2 RA反應(yīng)因子的激活因子)(MASP1)免疫試劑盒
殼囊孢屬Ⅲ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體Human OIT3(Oncoprotein-induced transcript 3 protein) ELISA Kit人甘膽(CG)免疫試劑盒
大腸埃希菌IV型膠原蛋白/4型膠原蛋白/膠原蛋白4抗體Human DEFA5(Defensin Alpha 5, Paneth Cell Specific) ELISA Kit人甘免疫試劑盒
大腸埃希氏菌前列腺氧化環(huán)化1抗體Human CTSG(Cathepsin G) ELISA Kit人干因子受體(SCFR)免疫試劑盒
匍枝根霉(黑根霉)Ⅰ型膠原抗體Human PRKAB1(5′-AMP-activated protein kinase subunit beta-1) ELISA Kit人干因子/肥大生長因子(SCF/MGF)免疫試劑盒
解烴棒桿菌Ⅴ型膠原抗體Human GNRHR(Gonadotropin-releasing hormone receptor) ELISA Kit人干擾誘導(dǎo)跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)免疫試劑盒
草假單胞菌Ⅹ型膠原抗體Human MCAM(Cell surface glycoprotein MUC18) ELISA Kit人干擾誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫試劑盒
釀酒酵母周期F抗體Human DEFA1(Defensin Alpha 1, Neutrophil) ELISA Kit人干擾誘導(dǎo)T趨化因子(ITAC/CXCL11)免疫試劑盒
橙色土地桿菌泛連接CUL7蛋白抗體Human CCR7(C-C chemokine receptor type 7) ELISA Kit人干擾活化基因205(Ifi205)免疫試劑盒
球毛殼甲狀腺受體相互作用蛋白15抗體Human CSNK2B(Casein kinase II subunit beta) ELISA Kit人干擾調(diào)節(jié)因子8(IRF8)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基6抗體Human MSTN(Growth/differentiation factor 8) ELISA Kit人干擾調(diào)節(jié)因子3(IRF3)免疫試劑盒
香菇信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基4抗體Human SFRP4(Secreted frizzled-related protein 4) ELISA Kit人干擾a-抗體(Anti-IFN-ab)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌心肌肌鈣蛋白抗體Human SLC25A20(Mitochondrial carnitine/acylcarnitine carrier protein) ELISA Kit人鈣轉(zhuǎn)運ATP2C型成員1(ATP2C1)免疫試劑盒
淺金鏈霉菌CAP1抗體Human ETFβ(Electron transfer flavoprotein subunit beta) ELISA Kit人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(CNR-1)免疫試劑盒
米曲霉粒-巨噬集落激因子3抗體Human NEBL(Nebulette) ELISA Kit人鈣依賴性胞漿型磷脂A2(iPLA2)免疫試劑盒
柱狀田頭菇(茶樹菇、楊樹菇)Agrocybe│cylindracae 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%羥基茜草
: IFFI2335資源名稱: 黑曲霉 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%細辛脂
豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌Actinobacillus│Pleuropneumoniae 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品古倫賓
多聚半乳糖醛酸酶(PG)測試盒50管/24樣Pseudomonas extremaustralis 3,6-二溴-9-乙基咔唑色P450亞型3AElisa
淺白隱球酵母 2-羥基-5-三氟組蛋白乙?;疎lisa
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彩色豆馬勃 2-硝基-4-吡啶甲酸甲硫腦啡肽Elisa
乙型溶血性鏈球 甘氨酰-L-苯Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2Elisa
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溶桿 (3-氟苯甲酰)乙酸乙酯纖維蛋白3-3Elisa
赭綠青霉 3-氟-4-甲氧基芐基溴α7煙堿型乙酰受體抗體Elisa
花臉蘑 10-羥基苯并[ h] 喹啉環(huán)指蛋白5抗體Elisa
釀酒酵母 DL-叔亮2,5寡腺苷酸合成Elisa
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Melanconis 雙甲脒血小板衍生生長因子Elisa
鹽地喜鹽芽孢桿 阿伐那成纖維生長因子Elisa
異常畢赤酵母 多肽試劑TCTUElisa
釀酒酵母 N'-Cbz-L-鳥UDP葡萄糖酸轉(zhuǎn)移2家族多肽B1Elisa