KRPH緩沖液公司正在銷售的產品：豚鼠視黃結合蛋白4(RBP4)試劑盒Anti-IL3 AntibodyTTC33蛋白抗體
豚鼠補體因子B(CFB)試劑盒 Anti-IL3 Antibody四分子交聯(lián)體3抗體（四旋蛋白）
豚鼠乳酸脫氫酶C(LDHC)試劑盒 Anti-IL3 AntibodyT白血病同源蛋白2抗體
豚鼠破骨相關受體(OSCAR)試劑盒Anti-IL3 Antibody跨膜蛋白13

產品分類：細胞其他

儲存條件：4℃,3個月

用途：Krebs-Ringer-Phosphate-HEPES (KRPH) Buffer,，含有HEPES,、磷酸二氫鉀,、硫suan鎂、氯化鈣,、氯化鈉,、氯hua鉀等，ph值為7.4,。作用類似于Ringer液,，用于動物離體實驗,肌體灌流、清洗組織,，并維持離體組織的正常生理功能,。

注意事項：無菌溶液。

公司產品僅用于科研具有質量可靠,、效果穩(wěn)定、靈敏度高,、操作簡單,、易保存等特點，咨詢并訂購,！

 

配制與標定的實驗原理：

1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；

EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末,，常用H4Y表示，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,，然后用水洗凈，烘干,。

配制步驟：

1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來水,、純水洗凈，烘干,、冷卻,。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿,。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線,，搖勻,。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,，作為對照品溶液,。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃,；進樣口溫度250℃,；檢測器溫度250℃；分流進樣,，分流比10:1,。理論塔板數按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法：配制的對照品溶液,，一份置冷處保存,，一份置室溫中保存，在第1,、3,、7、10,、15天重新配制一份對照品溶液,，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量,。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,，驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠,。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養(yǎng)基,，生長條件和細胞代謝率而變化,，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應性曲線,，來確定最佳篩選濃度。

一般而言,，哺乳動物細胞50-500μg/mL,；細菌/植物細胞20-200μg/mL,；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現(xiàn)，至少選擇5個濃度,。

1）  第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,，37℃，CO2培養(yǎng)過夜,；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞,，可增加接種量。

2）  根據細胞類型,，設定合適范圍內的濃度梯度,。以哺乳動物細胞為例，可設定50,，100,，250，500,，750，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5）  按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度,。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1）  轉染48h后,，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）,。

注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,，其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,，這取決于宿主細胞類型,，轉染,，以及篩選效果。

4）   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

Bullatine G（標準品） Ammomium ferric citrate肝配蛋白A1受體抗體包裝100g

Cimiracemoside Choline chloride真核翻譯起始因子2C2抗體包裝25g

Clemaphenol A D-Gluconolactone眼睛發(fā)育缺失蛋白EYA2抗體包裝500g

Clematichinenoside C Forchlorfenuron,4-CPPU,CPPU,KT-30EYA4蛋白抗體包裝100g

Clematiunicinoside E Magnesium acetate, tetrahydrate血清反應因子輔助蛋白1抗體包裝25g

Clematomandshurica saponin ... Sodium phosphate, monobasic, monohydrate吞噬運動蛋白2抗體包裝5g

Corylifol A(標準品) Calcium gluconate, hydrate紅膜條帶4.1蛋白抗體包裝1g

Crassicauline A（標準品） N-Dodecyl-b-maltoside磷化紅生成受體抗體包裝25g

Crovatin Aminourea hydrochloride轉錄調節(jié)因子E2F7抗體包裝5g

Croverin Streptomycin sulfate solution, 30 mg/ml膠質谷運載蛋白4抗體包裝1g

D(十)-無葡萄糖(標準品) AcetamideerbB3結合蛋白1抗體包裝5g

D-(-)-奎寧（標準品） 1-Naphthylacetamide烯酰合1抗體包裝25g

D-阿伯糖(標準品) Iron granules烯酰合含結構域蛋白2抗體包裝5g

D-果糖（標準品） Iron(III) citrate腫瘤壞死因子受體超家族成員EDAR抗體包裝1g

D-四氫藥根堿（標準品） DL-Lactic acid自身抗原EDC4抗體包裝5g

ATCC33842資源名稱: 哈氏弧菌 質量規(guī)格：>98.5%髓磷脂堿性蛋白試劑盒20(R) ;20(R)G

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品髓磷脂P2蛋白試劑盒(S型)人參皂苷Rh2 ;20(S)-G

黑曲霉Aspergillus│niger 質量規(guī)格：>99%髓過氧化物特異性抗中性粒胞質抗體IgG試劑盒人參皂苷Rh4;Ginsenoside
KRPH緩沖液SSB/La /FITC  熒光標記抗干燥癥SSB/LaIgG

Fut4/CD15/SSEA-1 /FITC  熒光標記階段特異性胚胎表面抗原-1IgG

SSEA3/FITC  熒光標記階段特異性胚胎表面抗原-3IgG

SSEA4/FITC  熒光標記階段特異性胚胎表面抗原-4IgG

AKAP12/FITC  熒光標記絲氨抑制蛋白激C底物IgG

SSTR1/FITC  熒光標記生長抑受體1(SSTR1)IgG

SSTR2 /FITC  熒光標記生長抑受體2(SSTR2)IgG

SSTR3/FITC  熒光標記生長抑受體3(SSTR3)IgG