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兔XC趨化因子受

產(chǎn)品分類：細(xì)胞檢測

儲存條件：—20℃,避光,12個(gè)月

用途：用于線粒體膜電位的比例測量。

注意事項(xiàng)：工作濃度為5-10umol/L

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定,、靈敏度高、操作簡單,、易保存等特點(diǎn),，咨詢并訂購！

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末,，常用H4Y表示,，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。

2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,，然后用水洗凈,，烘干。

配制步驟：

1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水,、純水洗凈,，烘干、冷卻,。

2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿,。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻,。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量,，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液,。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃,；檢測器溫度250℃,；分流進(jìn)樣，分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000,。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存,，一份置室溫中保存,，在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對照品溶液,，三種儲備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量,。記錄下來,，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,，推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線,，來確定最佳篩選濃度,。

一般而言，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL,；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度,。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,，37℃，CO2培養(yǎng)過夜,；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型,，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動物細(xì)胞為例，可設(shè)定50,，100,，250，500,，750,，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔,。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）,。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果,，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型,，轉(zhuǎn)染,，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。

胸腺嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium ferulic雙特異性蛋白磷6/絲裂原活化蛋白激磷3抗體包裝500g

熊去氧膽(UDCA)標(biāo)準(zhǔn)品 Sodium ferulic磷脂蛋白受體Dab1抗體包裝25g

溴肽林（標(biāo)準(zhǔn)品） Cefditoren pivoxil磷化磷脂蛋白受體Dab1抗體包裝5g

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溴化新斯的明(標(biāo)準(zhǔn)品) Pyrazinamide橋粒糖蛋白1抗體包裝25g

溴貝那替（標(biāo)準(zhǔn)品） Demeclocycline hydrochloride肌動蛋白解聚因子19抗體包裝5g

亞培南（標(biāo)準(zhǔn)品） Demeclocycline hydrochloride動力蛋白激活蛋白1抗體包裝100g

亞藍(lán)（標(biāo)準(zhǔn)品） N-Methyl Paroxetine橋粒芯糖蛋白1包裝25g

亞磷氫二鈉（標(biāo)準(zhǔn)品） Cefquinome sulfate胞漿動力蛋白輕鏈1抗體包裝500g

亞葉鈣（標(biāo)準(zhǔn)品） Ceftiofur Sodium背根神經(jīng)節(jié)同源蛋白DRGX抗體包裝25g

亞油（標(biāo)準(zhǔn)品） Ceftiofur SodiumDeltaD抗體包裝5g

煙(標(biāo)準(zhǔn)品) Cytidine-5'-triphosphate(CTP) disodium salt dihydrate神經(jīng)特異性轉(zhuǎn)錄因子DAT1抗體包裝100g

胭脂紅（標(biāo)準(zhǔn)品） Voglibose對接蛋白3抗體包裝25g

鹽阿比朵爾（標(biāo)準(zhǔn)品） VogliboseDCN1樣蛋白2抗體包裝5g

地中海馬特爾氏菌Martelella│mediterranea 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR晚期糖基化終末產(chǎn)物受體試劑盒甘草堿;Tabersonine

#鏈格孢蘋果專化型Alternaria│alternata (Fr.) Keissl 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品晚期糖基化終末產(chǎn)物試劑盒桑根 D ;Sanggenon D

含羞草根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,，USP30,BR,可用于培養(yǎng)外顯肽試劑盒桑根 C ;Sanggenon C
JC-1溶液pre-X protein(NT)/FITC  熒光標(biāo)記抗肝病pre-X蛋白（N端）IgG

pre-X protein(CT)/FITC  熒光標(biāo)記抗肝病pre-X蛋白（C端）IgG

PRMT1/FITC  熒光標(biāo)記蛋白質(zhì)精氨轉(zhuǎn)移1IgG

ProADM (Adrenomedullin)-N20 peptide /FITC  熒光標(biāo)記腎上腺髓質(zhì)前提N端20肽IgG

pro-caspase3/FITC  熒光標(biāo)記半胱天冬-3原IgG

Profilin 1/FITC  熒光標(biāo)記前纖維蛋白1IgG

Profilin 2/FITC  熒光標(biāo)記前纖維蛋白2IgG

PROK1/EG-VEGF/FITC  熒光標(biāo)記內(nèi)分泌腺衍生血管內(nèi)皮生長因子IgG