PDA瓊脂培養(yǎng)基公司正在銷售的產(chǎn)品：兔活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)試劑盒 Anti-DAXX Antibody磷酸化A-Raf抗體
兔血小板衍生生長因子亞基A(PDGFA)試劑盒Anti-DAXX Antibody環(huán)指蛋白10抗體
兔α-骨膠原交聯(lián)(α-CTx)試劑盒Anti-DARS2 AntibodyRAN結(jié)合蛋白2/核孔蛋白抗體
兔多巴(DA)試劑盒 Anti-DAZAP1 Antibody環(huán)指

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定,、靈敏度高,、操作簡單、易保存等特點(diǎn),，咨詢并訂購,！

產(chǎn)品分類：培養(yǎng)基

儲(chǔ)存條件：4℃,6個(gè)月

用途：多用于食用菌菌種的分離培養(yǎng)

注意事項(xiàng)：無菌溶液。主要由20%馬鈴薯,、葡萄糖,、2%瓊脂等組成，經(jīng)15psi高壓滅菌30min,，室溫下成膠胨狀,。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,；

EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示,，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干,。

配制步驟：

1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來水,、純水洗凈，烘干,、冷卻,。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿,。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,，待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標(biāo)線,，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量,，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,；柱溫120℃,；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃,；分流進(jìn)樣,，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000,。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液,，一份置冷處保存，一份置室溫中保存,，在第1,、3、7,、10,、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量,。記錄下來，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過2.0%,，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

Sestrin3蛋白(SESN3)SESN3 ELISA Kit6號(hào)染色體開放閱讀框15抗體包裝1g

Sestrin2蛋白(SESN2)SESN2 ELISA Kit載脂蛋白A1抗體包裝250mg

Sestrin1蛋白(SESN1)SESN1 ELISA Kit抑癌基因p14抗體包裝100g

S100鈣結(jié)合蛋白B(S100B)S100B ELISA Kit抑癌基因p16抗體包裝25g

S100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)S100A9 ELISA KitP27抗體/周期依賴激抑制劑包裝500g

S100鈣結(jié)合蛋白A8(S100A8)S100A8 ELISA Kit9號(hào)染色體開放閱讀框171抗體包裝10MG

S100鈣結(jié)合蛋白A7(S100A7)S100A7 ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框177抗體包裝1g

S100鈣結(jié)合蛋白A6(S100A6)S100A6 ELISA KitCD244抗體包裝100g

S100鈣結(jié)合蛋白A4(S100A4)S100A4 ELISA Kit巨噬炎性蛋白1α抗體包裝25g

S100鈣結(jié)合蛋白A11(S100A11)S100A11 ELISA Kit巨噬炎性蛋白19抗體包裝5g

S100鈣結(jié)合蛋白A10(S100A10)S100A10 ELISA Kit色P450 3A4抗體包裝100g

S100鈣結(jié)合蛋白(S100)S100 ELISA Kit角蛋白6抗體包裝25g

R-型電壓依賴鈣離子通道α1E亞基(CACNα1E)CACNα1E ELISA Kit角蛋白7抗體包裝5g

R-脊椎蛋白1(RSPO1)RSPO1 ELISA Kit磷化角蛋白17抗體包裝100g

Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2(RUNX2)RUNX2 ELISA Kit卷曲螺旋域蛋白質(zhì)85C抗體包裝25g

鐮孢屬Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品異鎖鏈試劑盒3-乙南楝屬二酯;Cabralea

多粘類芽胞桿菌Paenibacillus│polymyxa 質(zhì)量規(guī)格：>98%異檸檬脫氫試劑盒乙酰基二氫味草 A;Acetyldi

發(fā)酵放線纖絲菌Actinotalea│fermentans 質(zhì)量規(guī)格：>96%異常凝血原試劑盒羽扇烯;Lupenone
PDA瓊脂培養(yǎng)基phospho-IRS1(Ser11)/FITC   熒光標(biāo)記化胰島受體底物-1IgG3-氧烯酯 95%

phospho-IRS1(Ser302) /FITC   熒光標(biāo)記化胰島受體底物-1IgG酰酯 GR,，99.5%

phospho-IRS1(Ser332/336)/FITC   熒光標(biāo)記化胰島受體底物-1IgG壬 GR

phospho-IRS1(Ser612)/FITC  熒光標(biāo)記化胰島受體底物-1IgG對(duì)特辛(POP)  97%

phospho-IRS1(Ser636/639) /FITC  熒光標(biāo)記化胰島受體底物-1IgG4-吡啶 98%

phospho-IRS1(Ser789)/FITC  熒光標(biāo)記化胰島受體底物-1IgG1,5-戊二 97%

IRS-2/FITC   熒光標(biāo)記胰島受體底物-2IgG酐 98%

IRS-3/FITC   熒光標(biāo)記胰島受體底物-3IgG化  ACS, ≥99.0%

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,，培養(yǎng)基，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,，推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線,，來確定最佳篩選濃度,。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL,；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度,。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,，37℃，CO2培養(yǎng)過夜,；注：對(duì)于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量,。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型,，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,，可設(shè)定50,，100，250,，500,，750，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔,。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）,。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密，其效率會(huì)降低,。為了得到較好的篩選效果,，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型,，轉(zhuǎn)染,，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。