商品介紹:
測(cè)定意義: γ-GT是γ-谷氨酰循環(huán)中的關(guān)鍵酶,,催化GSH降解。γ-GT催化GSH或者其他γ-谷氨?;衔锷系摩?谷氨?;D(zhuǎn)移到受體。也可以催化GSH和其他γ-谷氨?;衔锏乃?,產(chǎn)生谷氨酸鹽,在細(xì)胞外新陳代謝中起了重要的作用,。 測(cè)定原理: γ-GT催化谷氨酰對(duì)硝基苯胺中γ-谷氨?;D(zhuǎn)移給N-甘氨酰甘氨酸,生成對(duì)硝基苯胺,,在405nm有特征光吸收,;通過(guò)測(cè)定405nm光吸收增加速率,來(lái)計(jì)算γ-GT酶活性,。 自備儀器和用品: 低溫離心機(jī),、水浴鍋、可調(diào)節(jié)移液器,、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、微量玻璃比色皿/96孔板、和蒸餾水 |
商品屬性:
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存,;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,,4℃保存,;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存,;試劑三:粉劑×1瓶,,-20 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,,混勻,,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,,4 ℃保存,,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存,;試劑六:液體30mL×1瓶,,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,,4 ℃保存,。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī),、移液器,、1 ml玻璃比色皿、研缽,、冰和蒸餾水,。
NAD+和NADH的提取:
1,、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中 和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測(cè),。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml堿性提取液),,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中 和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測(cè)。 | 2,、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:按照組織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,,加入1ml酸性提取液),,冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),;冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測(cè),。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),,冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失),;冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和,, 混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測(cè),。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液),, 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,,超聲3s,,間隔10s,重復(fù)30次),,95℃水浴5min (蓋緊,,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測(cè),。 NADH的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),,棄上清,,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,,功率20%或200W,,超聲3s,間隔10s,,重復(fù)30次),,95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失),;冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加 入500μl酸性提取液使之中和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測(cè)。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min,。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水,、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,,分別記為A1和A2?!鰽空白管=A1-A2,。。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液,、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,,分別記為A3和A4,。△A測(cè)定管=A3-A4,。
注意:空白管只需測(cè)定一次,。
半乳凝1(GAL1)英文名:GAL1 ELISA Kit癌相關(guān)基因2抗體(鋅指蛋白364)包裝5g
白細(xì)胞介7(IL-7)英文名:IL-7 ELISA KitB淋巴酪激抗體包裝1g
白細(xì)胞介6(IL-6)英文名:IL-6 ELISA Kit腦特異性血管生成抑制蛋白2抗體包裝250mg
白細(xì)胞介5(IL-5)英文名:IL-5 ELISA Kit促凋亡BNIP3L蛋白抗體包裝500mg
白細(xì)胞介4(IL-4)英文名:IL-4 ELISA KitBcl2抑凋亡蛋白Bag3抗體包裝5g
白細(xì)胞介3(IL-3)英文名:IL-3 ELISA KitBCL2樣10促凋亡蛋白抗體包裝1g
白細(xì)胞介27(IL-27)英文名:IL-27 ELISA KitBCL2樣12含脯蛋白抗體包裝200g
白細(xì)胞介21(IL-21)英文名:IL-21 ELISA KitBCL2分子伴侶調(diào)節(jié)蛋白5抗體包裝5g
白細(xì)胞介2(IL-2)英文名:IL-2 ELISA Kit轉(zhuǎn)錄因子BTF3抗體包裝100g
白細(xì)胞介1受體拮抗劑(IL-1RA)英文名:IL-1RA ELISA KitBcl2相互作用蛋白2抗體包裝25g
白細(xì)胞介1β(IL-1β)英文名:IL-1β ELISA Kit癌擴(kuò)增序列蛋白4抗體包裝500g
白細(xì)胞介1β(IL-1B)英文名:IL-1B ELISA Kit磷化T淋巴受體抗體包裝100g
白細(xì)胞介1α(IL-1α/IL-1F1)英文名:IL-1α/IL-1F1 ELISA Kit堿性核蛋白1/鋅指蛋白basonuclin抗體包裝25g
白細(xì)胞介1α(IL-1α)英文名:IL-1α ELISA Kit癌膜蛋白11抗體(前梯度同源蛋白2)包裝500g
白細(xì)胞介17(IL-17)英文名:IL-17 ELISA Kit人腦鈉單克抗體包裝1g
酰基合成家族4抗體干擾α17(IFNα17)LDC1267 是TAM (Tyro3,Axl 和 Mer) 激高效選擇性抑制劑,,對(duì) Tyro3/Axl/Mer IC50值分別為<5 nM/8 nM/
γ谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γGT)測(cè)定測(cè)試盒100管/96樣生金色鏈霉 5-羥基-2-吡啶羧酸凝血原前體蛋白Elisa
紅色鹽場(chǎng)粒狀古 6-溴-2-甲酸凝血原前體片段F2Elisa
釀酒酵母 2--3-甲酸12Elisa
巴氏醋桿 5-硝基-2-羧酸乙酯ⅡElisa
木克酵母屬 吐納麝香ⅦElisa
生香毛霉 2-十一烷基咪唑ⅧElisa
枯草芽孢桿 3-氟-5-(三氟甲基)芐Ⅷ相關(guān)抗原Elisa
耐輻射奇球 2-氟-6-甲氧基芐ⅨElisa
路德類(lèi)酵母 1-(4-甲氧基)-1-環(huán)烷羧酸ⅩElisa
鯊魚(yú)盧金星 對(duì)新戊酰氧基苯磺酰Ⅺ抗原Elisa
節(jié)桿 異基肼鹽酸鹽牛血清白蛋白Elisa
細(xì)長(zhǎng)賴(lài)芽胞桿 1-環(huán)基-2-(2-氟苯基)乙酮膀胱癌抗原Elisa
葡萄座腔 1,11-二溴十一烷膀胱癌特異性核基質(zhì)蛋白-4Elisa
白僵 2-氨基異丁酸甲酯鹽酸鹽胚胎干關(guān)鍵蛋白Elisa
淡紫擬青霉 4-溴-2-噻吩羧酸皮動(dòng)蛋白Elisa
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子,。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用。