產(chǎn)品分類(lèi):骨組織染色
儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月
用途:又稱(chēng)戈德納三色染色液,主要用于骨組織染色,。
注意事項(xiàng):可不脫鈣染色,可用MMA塑料包埋,脫塑后直接染色。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定,、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單,、易保存等特點(diǎn),,咨詢(xún)并訂購(gòu)!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
Goldner三色染色液 | 6×50ml | FS-R6699 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,,常用H4Y表示,,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。
2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,,然后用水洗凈,,烘干。
配制步驟:
1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來(lái)水,、純水洗凈,,烘干、冷卻,。
2,、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿,。
3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,,用純水稀釋至標(biāo)線(xiàn),搖勻,。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液,。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃,;檢測(cè)器溫度250℃,;分流進(jìn)樣,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000,。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,,一份置室溫中保存,,在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量,。記錄下來(lái),保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,培養(yǎng)基,,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(kill curve),,即劑量反應(yīng)性曲線(xiàn),,來(lái)確定最佳篩選濃度。
一般而言,,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL,;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線(xiàn)的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,,可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(劑量反應(yīng)曲線(xiàn))來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度,。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜,;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,,100,,250,500,,750,,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔,。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代),。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,其效率會(huì)降低,。為了得到較好的篩選效果,,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀(guān)察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型,,轉(zhuǎn)染,,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。
桑辛;桑根皮(標(biāo)準(zhǔn)品) Glycine-N,N-bis(methylenephosphonic Acid)胰高血糖樣肽2受體抗體包裝1g
桑葉(標(biāo)準(zhǔn)品) N-Methyliminodiacetic Acid生長(zhǎng)休止特定蛋白1抗體包裝5g
桑枝(標(biāo)準(zhǔn)品) Nitrilotriacetic Acid Disodium Saltγ-谷酰轉(zhuǎn)移輕鏈1抗體包裝25g
沙蟾精-3-辛二半酯 N-(2-Carboxyethyl)iminodiacetic Acidγ1基丁受體α5/GABRα5抗體包裝5g
沙棘(標(biāo)準(zhǔn)品) Triethylenetetramine-N,N,N',N'',N''',N'''-hexaacetic AcidG蛋白激活內(nèi)向通道1抗體包裝200mg
沙棘膏(標(biāo)準(zhǔn)品) TAN [=1-(2-Thiazolylazo)-2-naphthol]G蛋白激活內(nèi)向通道3抗體包裝100g
沙苑子(標(biāo)準(zhǔn)品) Dimethylsulfonazo IIIG蛋白偶聯(lián)受體48抗體包裝25g
沙苑子苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulfonazo III 糖基轉(zhuǎn)移GLT8D2抗體包裝500g
沙苑子苷A(標(biāo)準(zhǔn)品) 3sodium 2-(4-Sulfophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonate Hydrate高爾基體外周膜蛋白p65抗體包裝100g
砂仁(陽(yáng)春砂)(標(biāo)準(zhǔn)品) 2,2'-Dihydroxyazobenzene核因子GCNF/維受體相關(guān)受體抗體包裝500g
山茶甙A StilbazoG蛋白轉(zhuǎn)錄因子α2/Gα t2抗體包裝5g
山茶甙B Lumogallion 脊髓性肌癥蛋白SMA抗體包裝100mg
山茶苷A Disodium Bathocuproinedisulfonate脊髓性肌癥蛋白SMA抗體包裝500mg
山豆根(標(biāo)準(zhǔn)品) Bathophenanthrolinedisulfonic Acid Disodium Salt Hydrate脊髓性肌癥蛋白SMA抗體包裝1g
山風(fēng)(標(biāo)準(zhǔn)品) Bathocuproine (purified by sublimation)轉(zhuǎn)錄因子Gli2抗體包裝1g
鐮孢Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%腦腸肽試劑盒3-O-咖啡酰奎寧;3-O-caffe
黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品囊蟲(chóng)病抗體試劑盒輪環(huán)藤寧;Cyclen
靈芝(赤芝,,紅靈芝)Ganoderma│lucidium 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP31難辨梭狀芽孢桿菌B試劑盒龍膽山;Bellidifolin
Goldner三色染色液ROCK2 (Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 2) Rho相關(guān)蛋白激mei2抗原規(guī)格: 0.5mg
RXR Alpha(retinoid-X receptor alpha) 核受體RXRα抗原規(guī)格: 0.5mg
S6PDH(NADP sorbitol-6-phosphate dehydrogenase) 6-磷suan山脫氫mei抗原規(guī)格: 0.5mg
S0B S0B蛋白抗原規(guī)格: 0.5ml
S0B(S0 calcium binding protein B)(human, mouse, rat, bovine, Rabbit, chicken) S0B蛋白多肽規(guī)格: 0.5mg