XWLC-05+GFP云南宣威人肺腺癌細(xì)胞系+GFP的相關(guān)產(chǎn)品：人胃癌細(xì)胞；MGC-803視黃飽和(RETSAT)ELISA試劑盒綠色熒光蛋白標(biāo)記人宮頸癌細(xì)胞,；HeLa-GFP視蛋白5(OPN5)ELISA試劑盒人胃癌細(xì)胞,；MKN-45視蛋白4(OPN4)ELISA試劑盒人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞；MuM-2B視蛋白3(OPN3)ELISA試劑盒小鼠腎足細(xì)胞,；Mousepodocyte矢車菊苷δ3

公司銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動(dòng)物之臨床診斷或治療,，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。

二,、細(xì)胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書為主,。

將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000 rpm條件下離心3 min,，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中,，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

a,、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02% EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞,，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細(xì)胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化,。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中,，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻,。

c,、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。

3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例,；

a,、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中,，1000 rpm條件下離心4 min,，棄去上清液，用PBS清洗一遍,，棄盡PBS,，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b,、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液,，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻,，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。

c,、將凍存管放入-80℃冰箱,，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細(xì)胞與細(xì)胞系有什么區(qū)別,？

原代細(xì)胞是指從人體或動(dòng)物組織中直接分離出來(lái)的細(xì)胞，具有非常高的活性,。這些細(xì)胞通常需要在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行培養(yǎng)和擴(kuò)增,，以獲得足夠的數(shù)量用于實(shí)驗(yàn)和研究。由于原代細(xì)胞是直接從組織中分離出來(lái)的,，因此它們保留了原始細(xì)胞的特性和功能,，可以更好地模擬體內(nèi)環(huán)境。但是,，原代細(xì)胞通常只能在有限的時(shí)間內(nèi)保持活性,，并且容易受到環(huán)境因素的影響，因此需要進(jìn)行及時(shí)的保存和更新,。

細(xì)胞系(cell line)是原代細(xì)胞經(jīng)shou次傳代成功后即為細(xì)胞系,。泛指一般可能傳代的細(xì)胞。其中能夠連續(xù)傳代的細(xì)胞叫做連續(xù)細(xì)胞系或無(wú)限細(xì)胞系，不能連續(xù)培養(yǎng)的稱為有限細(xì)胞系,。大多數(shù)二倍體細(xì)胞為有限細(xì)胞系,。由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,，或傳代次數(shù)有限,， 可稱為有限細(xì)胞系(finite cell line),， 如可以連續(xù)培養(yǎng),， 則稱為連續(xù)細(xì)胞系(continuous cell line)， 培養(yǎng)50代以上并無(wú)限培養(yǎng)下去,。人類腫瘤細(xì)胞,，在體外培養(yǎng)半年以上,，生長(zhǎng)穩(wěn)定，并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系,。

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