詳細介紹
商品介紹:
測定意義動物肝臟、腎臟是氨基酸代謝的主要器官,,故尿中氨基酸的變化最能反應肝,、腎的生理狀態(tài)。植物體內(nèi)氨基酸含量對研究植物在不同條件下及不同生長發(fā)育時期氮代謝變化,、植物對氮素的吸收,、運輸、同化及營養(yǎng)狀況等有重要意義,。另外,,氨基酸還能反應灼傷、傷寒等方面情況,。測定原理氨基酸的α-氨基可與水合茚三酮反應,,產(chǎn)生藍紫色化合物,其顏色的深淺與氨基酸的含量成正比,。需自備儀器及用品95%乙醇,,研缽、冰,、臺式離心機,、可見分光光度計、1ml玻璃比色皿,、可調(diào)式移液槍,、雙蒸水,水浴鍋,,10ml帶蓋試管或EP管,。 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321117 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存,;堿性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存;試劑一:液體10 mL×1瓶,,4℃保存,;試劑二:液體3 mL×1瓶,4℃保存,;試劑三:粉劑×1瓶,,-20 ℃保存,用時加入3mL蒸餾水,混勻,,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,,用時加入3mL蒸餾水,,混勻,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑五:液體3.6mL×1瓶,,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,,4 ℃保存,;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存,。
自備儀器和用品:
可見分光光度計,、臺式離心機、移液器,、1 ml玻璃比色皿,、研缽、冰和蒸餾水,。
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測,。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml堿性提取液),,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測,。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),,冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失),;冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和,, 混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測,。 | 3,、細胞或細菌中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),,棄上清,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液),, 超聲波破碎(冰浴,,功率20%或200W,超聲3s,,間隔10s,,重復30次),95℃水浴5min (蓋緊,,以防止水分散失),;冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測,。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液),, 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,,超聲3s,,間隔10s,重復30次),,95℃水浴5min (蓋緊,,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測,。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零,。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水,、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,,分別記為A1和A2,。△A空白管=A1-A2,。,。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時吸光值,分別記為A3和A4,?!鰽測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次,。
他環(huán),烯土霉(標準品)英文名: Amlodipine角蛋白13抗體包裝25g
托宗(標準品)英文名: Amlodipine白免疫球蛋白樣受體-B抗體包裝500g
雄諾龍(標準品)英文名: NizatidineCD33L抗體包裝100g
門冬胰島(標準品)英文名: Carboxymethyl cellulose 角蛋白10抗體包裝25g
蒙脫石(標準品)英文名: Fludarabine軸突生長因子CD108抗體包裝5g
孟魯司特鈉(標準品)英文名: Fludarabine唾液結(jié)合性免疫球蛋白樣凝集5抗體包裝1g
咪喹莫特(標準品)英文名: G-418 disulfate,GeneticinCD329抗體包裝1g
咪唑(標準品)英文名: Erlotinib嗜粒趨化蛋白14抗體包裝1g
咪唑煙(標準品)英文名: N-Acetyl-cysteine1號染色體開放閱讀框57抗體包裝250mg
米(標準品)英文名: Zopiclone2號染色體開放閱讀框18抗體包裝100ml
米奈鈣(標準品)英文名: Zopiclone色c氧化6抗體包裝100g
米力農(nóng)(標準品)英文名: Aniracetam嗜粒趨化蛋白24抗體包裝25g
米諾地爾(硫鹽)敏樂啶(標準品)英文名: Aniracetam巨噬炎性蛋白15包裝100ml
米屈肼(標準品)英文名: L-Glutamine巨噬炎性蛋白抗體包裝500ml
米替福新(標準品)英文名: RoflumilastCD72蛋白抗體包裝1g
擬青霉屬Paecilomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>720IU/MG,BR膜DNA抗體試劑盒1-脫氧野尻霉;1-Deoxynoji
醋化醋桿菌Acetobacter│aceti 質(zhì)量規(guī)格:效價測定角蛋白21-1片段試劑盒他克莫司;Tacrolimus
肺炎克雷伯氏菌Klebsiella│pneumoniae 質(zhì)量規(guī)格:EP/USP角蛋白18-M65試劑盒10-脫乙?;投II;10-Dea
氨基酸(AA)含量測試盒50管/48樣飼料 鉛 硬脂酸鈷風疹病IgM抗體Elisa
南方散斑殼 啉鹽酸鹽抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰IgG抗體Elisa
枯草芽孢桿 1,3,4,6-四-O-乙酰基-2-脫氧-2-苯二甲酰亞氨基-β-D-吡喃葡萄糖抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰IgM抗體Elisa
異常漢遜酵母異常變種 氮雜環(huán)丁烷-3-甲酸甲酯鹽酸鹽糖原磷酸化aElisa
冠突散囊 1,4-二異基苯硫氧還蛋白氧化還原Elisa
大腸埃希氏 三氟乙酰賴骨硬化蛋白Elisa
赤曲霉 乙烯基雙茚基二化鋯, 外消旋混合物肌特異性增強因子2D抗體Elisa
橢圓孫秀芹氏 3-氨基-5-苯基噻吩-2-甲酸甲酯活化轉(zhuǎn)錄因子3Elisa
雙胞雙鐮孢 氧化白藜蘆半胱蛋白1Elisa
桃色枝頂孢 扁豆堿格氏病Elisa
松針散斑殼 L-谷 1-甲酯麥角蛋白IgG抗體Elisa
同絲毛殼 白皮杉水痘-帶狀皰疹病IgA抗體Elisa
釀酒酵母 白藜蘆抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰IgA抗體Elisa
貴州青霉 曲勃龍(R-1881)糖原磷酸化Elisa
考克氏屬 尼泊金異酯α半乳糖苷Elisa
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作,。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A,、B液時,,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫,。稀稀過后的標準品應丟棄,,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用,。