紅細(xì)胞稀釋液公司正在銷售的產(chǎn)品：豚鼠微粒體谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶1(MGST1)試劑盒Anti-MMP14 AntibodyWolfram綜合征蛋白1抗體
豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)試劑盒Anti-MMP16 Antibody磷酸化賴缺陷型蛋白激酶1抗體
豚鼠蛋白S(PROS)試劑盒Anti-MMP16 AntibodyWNK4抗體
豚鼠心鈉肽(ANP)試劑盒Anti-MMP2 Antibody

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定,、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單,、易保存等特點(diǎn),，咨詢并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類：細(xì)胞染色

儲(chǔ)存條件：室溫,12個(gè)月

用途：用于紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

注意事項(xiàng)：由檸檬酸鈉,，甲醛等組成。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末,，常用H4Y表示,，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈,，烘干,。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來(lái)水、純水洗凈,，烘干,、冷卻。

2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻,。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量,，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液,。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃,；檢測(cè)器溫度250℃,；分流進(jìn)樣，分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000,。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存,，一份置室溫中保存,，在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái),，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

駱駝蓬堿;駱駝蓬靈;哈梅靈(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulfaquinoxaline接頭蛋白Gab 1抗體包裝5g

駱駝篷子（標(biāo)準(zhǔn)品） Sulfalozine sodium磷化糖原合激3α抗體包裝25g

落花生枝葉（標(biāo)準(zhǔn)品） Tiamulin磷化神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43抗體包裝5g

落新婦苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Cesium iodide糖原合激-3β抗體包裝100g

麻楓樹(shù)B（標(biāo)準(zhǔn)品） 1,3-Dimethyl-2-imidazolidinone抗粘附多肽抗體包裝25g

（草）（標(biāo)準(zhǔn)品） Dimethyl sulfoxide腦膠質(zhì)瘤發(fā)病機(jī)制相關(guān)蛋白1抗體包裝500g

（中）（標(biāo)準(zhǔn)品） Dodecyltrimethylammonium chloride神經(jīng)膜糖蛋白M6a包裝5g

根（標(biāo)準(zhǔn)品） Methyl ArachidateG蛋白偶聯(lián)受體101抗體包裝250mg

麻醉椒苦 Polyamide胰高血糖樣肽-1受體/GLP-1受體抗體包裝1g

麻醉椒 Polyamide糖磷脂酰肌抗體包裝5g

馬鞭草（標(biāo)準(zhǔn)品） Polyamide磷化gp130抗體包裝25g

馬勃（標(biāo)準(zhǔn)品） Sodium phosphate dibasic dihydrateS轉(zhuǎn)移ζ1抗體包裝5g

馬齒莧（標(biāo)準(zhǔn)品） Sodium sulfate anhydrous甘-N-?；D(zhuǎn)移抗體包裝25g

馬兜鈴(北馬兜鈴)（標(biāo)準(zhǔn)品） Sodium sulfate anhydrous甘-N-?；D(zhuǎn)移樣1抗體包裝5g

馬兜鈴A(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium bicarbonate 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G3PP抗體包裝1g

青霉菌Penicillium│sp． 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于培養(yǎng) 前動(dòng)力蛋白1試劑盒白綿馬AA;Albaspidin AA

宇佐曲霉Aspergillus usamii 質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品前病整合位點(diǎn)1試劑盒綿馬ABA;Filixic acid

奇跡束絲放線菌Actinosynnema│mirum 質(zhì)量規(guī)格：>900 mcg/mg,BR,可用于培養(yǎng)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4試劑盒麻醉椒苫;methysticin
紅細(xì)胞稀釋液Neurocan  神經(jīng)粘蛋白抗原規(guī)格： 0.5mg

NF2/merlin(neurofibromatosis type 2)  2型神經(jīng)纖維瘤抗原規(guī)格： 0.5mg

NFATc1  活化T細(xì)胞核因子1蛋白規(guī)格： 0.5mg

phospho-NFKB p65 (pSer536) peptide  磷suan化細(xì)胞核因子/磷suan化k基因結(jié)合核因子抗原規(guī)格： 0.5mg

NF-κBp50(p50 NF-kappa B;p50NFKB)  細(xì)胞核因子50/κ基因結(jié)合核因子50抗原規(guī)格： 0.5mg

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基,，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應(yīng)性曲線,，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言,，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL,；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn),，至少選擇5個(gè)濃度,。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃,，CO2培養(yǎng)過(guò)夜,；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量,。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型,，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,，可設(shè)定50,，100，250,，500,，750，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）,。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,，其效率會(huì)降低,。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,，這取決于宿主細(xì)胞類型,，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果,。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。