試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存,;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存,;試劑二:液體3 mL×1瓶,,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,,-20 ℃保存,,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,,用時(shí)加入3mL蒸餾水,,混勻,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑五:液體3.6mL×1瓶,,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,,4 ℃保存,;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存,。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì),、臺(tái)式離心機(jī),、移液器、1 ml玻璃比色皿,、研缽,、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測(cè)定意義 植酸酶(phytase)是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類酶的總稱,,屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉(zhuǎn)化為可供有機(jī)體利用的有效磷,,降低糞便中的磷含量,減輕對(duì)環(huán)境的污染,,改善營(yíng)養(yǎng)成分的吸收和利用,,因此具有極其廣泛的研究和應(yīng)用價(jià)值。 測(cè)定原理 植酸酶在一定溫度和pH值條件下,,水解底物植酸鈉生成無(wú)機(jī)磷與肌醇衍生物,,無(wú)機(jī)磷在酸性環(huán)境中與鉬酸銨顯色劑反應(yīng)生成藍(lán)色復(fù)合物,在700nm處有特征吸收峰,,根據(jù)700nm處吸光值變化可計(jì)算得植酸酶活性,。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、低溫離心機(jī),、可見(jiàn)分光光度計(jì),、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋,,超聲溶解器,,回旋式振蕩器。 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 植酸酶測(cè)試盒50管/24樣 |
檢測(cè)方法 | 可見(jiàn)分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/24樣 |
產(chǎn)品貨號(hào) | AS6321355 |
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測(cè),。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測(cè),。 | 2,、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測(cè),。 NADH的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,,加入1ml堿性提取液),,冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),;冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中和, 混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測(cè)。 | 3,、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),,棄上清,,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,,功率20%或200W,,超聲3s,間隔10s,,重復(fù)30次),,95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失),;冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加 入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),,棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液),, 超聲波破碎(冰浴,,功率20%或200W,超聲3s,,間隔10s,重復(fù)30次),,95℃水浴5min (蓋緊,,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測(cè),。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零,。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min,。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2,?!鰽空白管=A1-A2。,。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液,、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4,。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子,。底物B對(duì)光敏感,,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用,。
大腸埃希菌卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體Human DEFB105(Beta-defensin 105) ELISA Kit人抑制βA(INHBA)免疫試劑盒
巨大芽孢桿菌中心體蛋白55kDa抗體Human CORT(Corticosterone) ELISA Kit人抑制B(INH-B)免疫試劑盒
地衣芽胞桿菌富含半胱與表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白2抗體Human PGRN(Progranulin) ELISA Kit人抑制A(INH-A)免疫試劑盒
謝瓦曲霉骨架相關(guān)蛋白2/腫瘤和微管相關(guān)蛋白抗體Human OxHDL(Oxidized high-density lipoprotein) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白R(shí)(hnRNP R)免疫試劑盒
草假單胞菌染色質(zhì)修飾蛋白4B(4C)抗體Human TUBA1B(Tubulin alpha-1B chain) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白P2(hnRNP P2)免疫試劑盒
弗氏鏈霉菌磷化受體酪激c-Abl抗體Human CORT(Corticosterone) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白M(hnRNP M)免疫試劑盒
木菇屬磷化受體酪激c-Abl抗體Human PGRN(Progranulin) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白L(HNRPL)抗體免疫試劑盒
瓜果腐霉磷化受體酪激c-Abl抗體Human CAGE1(Cancer associated gene 1 protein) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白L(hnRNP L)免疫試劑盒
釀酒酵母酪蛋白激1γ2抗體Human CFHR2(Complement factor H-related protein 2) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)免疫試劑盒
優(yōu)氈被菌柯薩奇病蛋白受體B抗體Human DSP(Dentin Sialoprotein) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白I(hnRNP I/PTB)免疫試劑盒
黃色孢鏈霉菌腫瘤抑制因子FBW7抗體Human pro-ET1(Pro-endothelin 1) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白H(hnRNP H)免疫試劑盒
克羅諾桿菌屬粘附分子4抗體Human S100 Protein ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白G(hnRNP G)免疫試劑盒
嗜熱側(cè)孢霉鈣調(diào)蛋白結(jié)合轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體Human KCND3(Potassium voltage-gated channel subfamily D member 3) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白E(hnRNP E)免疫試劑盒
羅倫隱球酵母周期依賴性激5激活結(jié)合蛋白C53抗體Human PCOL-I(Procollagen I) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白D(hnRNP D)免疫試劑盒
開(kāi)菲爾乳桿菌著絲粒蛋白H抗體Human FOXM1(Forkhead box protein M1) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白C(hnRNP C)免疫試劑盒
畢赤酵母半胱蛋白抑制劑6抗體Human TGT(tRNA-Guanine Transglycosylase) ELISA Kit人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A3(hnRNP A3)免疫試劑盒
棒狀桿菌Corynebacterium│ 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRI 型膠原蛋白試劑盒3-O-基沒(méi)食子
鏈霉菌屬菌種Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRH-鈣粘著蛋白/H-鈣粘連蛋白試劑盒5-基-7-氧基異黃
副溶血弧菌Vibrio│parahaemolyticus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRHSP60 IgM抗體5-基糠
植酸酶測(cè)試盒50管/24樣大腸埃希氏 4-硝基鄰苯二甲酸酸性成纖維生長(zhǎng)因子Elisa
球孢白僵 9,10-雙(二乙基膦甲基)蒽酸性磷酸Elisa
枯草芽孢桿 烯基三丁基錫髓過(guò)氧化物Elisa
松鼠葡萄球松鼠亞種 2-羥基髓鞘堿性蛋白Elisa
藤倉(cāng)赤霉 γ-氨基二乙氧基硅烷髓鞘相關(guān)生長(zhǎng)抑制因子Elisa
豬丹絲 4-羥基髓樣分化蛋白-2Elisa
梨形游動(dòng)放線 N-(β-氨乙基-γ-氨基)甲基二甲氧基硅烷髓樣分化因子88Elisa
單色云芝 2'-氨基脫氧鳥(niǎo)苷羧化不全骨鈣Elisa
釀酒酵母 3,4-二溴甲苯羧甲基賴Elisa
彩色豆馬勃 2-硝基噻吩他克莫司Elisa
人參土獨(dú)島桿 1-溴-4-叔丁氧基苯胎盤(pán)生長(zhǎng)因子Elisa
栗疫 三氟甲磺酸鎳(II)碳酸酐9Elisa
芽孢桿屬 2,3-二溴丁二酸羰基化蛋白Elisa
紅曲紅曲 Tergitol TMN 3聚乙二基壬基糖化白蛋白Elisa
枯草芽孢桿枯草亞種 (3-甲氧芐基)膦酸二乙酯糖化蛋白Elisa