詳細(xì)介紹
產(chǎn)品分類:細(xì)胞培養(yǎng)
儲存條件 4℃,2個月
用途 培養(yǎng)基或其他用途 緩沖液,可以較長時間控制恒定的pH值
注意事項 未無菌處理,。pH值根據(jù)客戶需要定制,可選范圍在pH6.8~8.0之間,。-20℃可保存4~6個月。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定,、靈敏度高、操作簡單,、易保存等特點,,咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
HEPES溶液 | 100ml | FS-R6358 |
配制與標(biāo)定的實驗原理:
1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,,常用H4Y表示,,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。
2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,,然后用水洗凈,,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,,再用自來水、純水洗凈,,烘干、冷卻,。
2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿,。
3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,,搖勻,。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,,作為對照品溶液,。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃,;進(jìn)樣口溫度250℃,;檢測器溫度250℃;分流進(jìn)樣,,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,,一份置冷處保存,,一份置室溫中保存,在第1,、3,、7、10,、15天重新配制一份對照品溶液,,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量,。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,,推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,,來確定最佳篩選濃度,。
一般而言,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL,;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度,。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,,37℃,CO2培養(yǎng)過夜,;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,,100,,250,500,,750,,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個濃度做三個平行孔,。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。
3) 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆(集落)的形成情況,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,,以及篩選效果,。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
抗促狀腺受體抗體(TRAb)TRAb ELISA Kit腺相關(guān)病5 VP1抗體包裝5MG
抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)α-Fodrin IgG/IgA ELISA Kit脂肪脫氫抗體包裝100g
抗Smith抗體(Sm)Sm ELISA Kit抗尿激1A抗體包裝25g
卷曲螺旋域結(jié)合蛋白80(CCDC80)CCDC80 ELISA Kit抗尿激受體1B抗體包裝5g
巨噬細(xì)胞移動因子(MIF)MIF ELISA Kit二磷腺苷核糖基化因子鳥核苷交換因子2抗體包裝1g
巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)MIF ELISA Kitα增強(qiáng)子結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)MIP-5 ELISA Kit脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)10抗體包裝250mg
巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)MIP-3β/ELC/CCL19 ELISA Kit蛋白激A錨定蛋白7抗體包裝1g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)MIP-3α/CCL20 ELISA Kit腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體12抗體包裝5g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)MIP-2 ELISA Kit腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體9抗體包裝25g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白1δ(MIP-1δ/CCL15)MIP-1δ/CCL15 ELISA Kit三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4抗體包裝5g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)MIP-1β/CCL4 ELISA Kit肌動蛋白結(jié)合蛋白LIM3抗體包裝100g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP1α)MIP1α ELISA Kit高爾基復(fù)合體相關(guān)蛋白1抗體包裝25g
巨噬細(xì)胞來源的趨化因子(MDC/CCL22)MDC/CCL22 ELISA Kit乙酰羧化1ACCα抗體包裝100mg
巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)M-CSF ELISA Kit腺核苷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1,、2,、3、4抗體包裝1g
磷化蛋白激B抗體促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)L-685458是一種有效的淀粉樣β蛋白前體γ分泌抑制劑, IC50為17 nM,比作用于其他天冬酰蛋白選擇性高50-100倍,。
HEPES溶液Collagen VI /FITC 熒光標(biāo)記抗Ⅵ型膠原IgG磺草酮
Collagen VII /FITC 熒光標(biāo)記抗Ⅶ膠原(Ⅶ型膠原)IgG煙嘧磺隆
Collagen X /FITC 熒光標(biāo)記抗Ⅹ型膠原IgG煙嘧磺隆 95%
COX/FITC 熒光標(biāo)記色c氧化IgG草甘膦 ,,99.5%
COX-1/FITC 熒光標(biāo)記前列腺氧化環(huán)化1IgG草甘膦
COX-2/FITC 熒光標(biāo)記前列腺氧化環(huán)化2IgG草甘膦標(biāo)準(zhǔn)溶液0μg/ml,u=2%,溶劑:水
COX4I1/FITC 熒光標(biāo)記色c氧化IV亞型1IgG草甘膦標(biāo)準(zhǔn)溶液μg/ml,u=2%,溶劑:水
COX7A2/FITC 熒光標(biāo)記色c氧化COX7A2IgG草甘膦 ,99.9%