試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存,;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存,;試劑二:液體3 mL×1瓶,,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,,-20 ℃保存,,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑四:粉劑×1瓶,,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,,混勻,,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,,4 ℃保存,;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存,;試劑七:液體50mL×1瓶,,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì),、臺(tái)式離心機(jī),、移液器、1 ml玻璃比色皿,、研缽,、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測(cè)定意義: LPS又稱甘油酯水解酶,,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和單酯),。LPS廣泛的存在于各種生物中。血清中LPS的異常增高常見(jiàn)于胰腺炎和胰腺癌,。 測(cè)定原理: LPS催化油酯水解成脂肪酸,,利用銅皂法測(cè)定脂肪酸生成速率,即可計(jì)算LPS活性,。 自備儀器和用品: 研缽,、臺(tái)式離心機(jī)、震蕩混勻器,、可見(jiàn)分光光度計(jì),、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液槍,、甲苯100mL,、冰和蒸餾水。 |
商品屬性:
NAD+和NADH的提?。?/span>
1,、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml酸性提取液),,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中 和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測(cè),。 | 2,、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測(cè),。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),,冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失),;冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中和,, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測(cè)。 | 3,、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),,棄上清,,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,,功率20%或200W,,超聲3s,間隔10s,,重復(fù)30次),,95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失),;冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加 入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),,棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液),, 超聲波破碎(冰浴,,功率20%或200W,,超聲3s,間隔10s,,重復(fù)30次),,95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失),;冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測(cè),。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零,。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min,。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2,?!鰽空白管=A1-A2。,。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液,、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,,分別記為A3和A4?!鰽測(cè)定管=A3-A4,。
注意:空白管只需測(cè)定一次。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號(hào)的試劑不要混用,。
短裙竹蓀3-3ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體Human HSD17B2 ELISA Kit小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)免疫試劑盒
紡錘形擬酵母精加壓受體2抗體Human HSD17B4 ELISA Kit小鼠骨成型蛋白9(BMP-9)免疫試劑盒
蒂莫內(nèi)馬賽菌凋亡相關(guān)斑點(diǎn)樣蛋白ASC抗體Human HSD17B6 ELISA Kit小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)免疫試劑盒
蘋(píng)果鏈格孢絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體Human HIST2H2AA4 ELISA Kit小鼠骨成型蛋白4(BMP-4)免疫試劑盒
長(zhǎng)雙歧桿菌抗凝血3抗體Human HMCN1 ELISA Kit小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒
發(fā)酵假絲酵母人血清白蛋白單克抗體Human Histone-H3 ELISA Kit小鼠骨成型蛋白15(BMP-15)免疫試劑盒
牡丹葡萄孢載脂蛋白A4抗體Human HIST3H2A ELISA Kit小鼠骨保護(hù)(OPG)免疫試劑盒
黃色桿菌磷化Rho鳥(niǎo)苷交換因子2抗體Human HIGD1A ELISA Kit小鼠過(guò)氧化(GSH-Px)免疫試劑盒
百脈根中間根瘤菌磷化絲狀肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體Human HIGD1B ELISA Kit小鼠谷脫羧自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)免疫試劑盒
天藍(lán)色鏈霉菌肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型1A抗體Human HIVEP1 ELISA Kit小鼠谷脫羧自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)免疫試劑盒
支氣管敗血波氏菌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白32抗體Human Hikeshi ELISA Kit小鼠谷脫氫(GDH/GLDH)免疫試劑盒
糞產(chǎn)堿菌糞亞種共濟(jì)失調(diào)7樣蛋白3B抗體Human HERC4 ELISA Kit小鼠孤腓肽(OFQ/N)免疫試劑盒
平菇(科大雜優(yōu))感染性蛋白蛋白1抗體Human HEPACAM ELISA Kit小鼠鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)免疫試劑盒
釀酒酵母含錨蛋白重復(fù)序列-因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族5抗體Human HIGD1B ELISA Kit小鼠睪(T)免疫試劑盒
污泥根瘤菌植物生長(zhǎng)激ABP1抗體Human HEPACAM ELISA Kit小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)免疫試劑盒
鴨疫里氏桿菌磷化活化復(fù)制因子2抗體Human Hikeshi ELISA Kit小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)免疫試劑盒
黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCκB抑制蛋白激試劑盒山椒子烯
銅綠假單胞菌Pseudomonas│aeruginosa 質(zhì)量規(guī)格:>98%,,BCγ谷酰轉(zhuǎn)移試劑盒1,3,5,8-四羥基山
肉灰色鏈霉菌Streptomyces│griseocarneus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCγ-谷酰環(huán)化轉(zhuǎn)移試劑盒四氫姜黃
土壤脂肪酶(SLPS)測(cè)試盒50管/48樣煙色鏈霉 四(3,5-二叔丁基-4-羥基)苯酸季戊四酯核蛋白Elisa
根瘤 5-甲氧色鹽酸鹽NK3同源框蛋白1Elisa
谷棒桿 5-溴-2,3-二氫苯并雄受體Elisa
硬水黃桿 2-(3-溴苯基)萘環(huán)氧合11Elisa
鐮刀屬 N-乙基-1-庚染色盒同源物3Elisa
沙雷氏 溴二乙酯前列腺特異膜抗原Elisa
嗜一氧化碳假諾氏 1-(4-溴苯基)哌Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激1Elisa
香菇 叔丁基苯5'-磷酸脫氫1Elisa
魯氏淀粉霉 8-溴-7-(2-丁炔-1-基)-3-甲基5'-磷酸脫氫2Elisa
費(fèi)比恩畢赤酵母 2,4-二溴芐二磷酸鳥(niǎo)苷Elisa
1ml吸頭 N-芐氧基羰基-L-氨一磷酸鳥(niǎo)苷Elisa
光神農(nóng)球 2,5-二氨基苯甲硫酸鹽酮酸脫氫βElisa
芽枝狀枝孢 2-氨基-3-吡三磷酸鳥(niǎo)苷Elisa
蠟樣芽胞桿 (蠟狀芽胞桿) 6-甲氧基絲聚蛋白Elisa
佛羅里達(dá)無(wú)孢子側(cè)耳 N-BOC-4-氨基套膜蛋白Elisa