商品屬性:
商品介紹:
測(cè)定意義 硅元素是一種十分重要的植物營(yíng)養(yǎng)元素,土壤中有效硅含量影響著植物的光合作用,、呼吸作用以及對(duì)逆境的抗性。 測(cè)定原理 硅酸根與鉬酸銨在弱酸條件下生成硅鉬酸,,可被還原劑還原成硅鉬藍(lán),,在700nm有特征吸收峰。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平,、常溫離心機(jī),、恒溫水浴鍋、可見分光光度計(jì),、1 mL玻璃比色皿,、震蕩儀。 |
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存,;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存,;試劑一:液體10 mL×1瓶,,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,,4℃保存,;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,,用時(shí)加入3mL蒸餾水,,混勻,,用不完的試劑4℃保存一周;試劑四:粉劑×1瓶,,4 ℃保存,,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑五:液體3.6mL×1瓶,4 ℃保存,;試劑六:液體30mL×1瓶,,4 ℃保存;試劑七:液體50mL×1瓶,,4 ℃保存,。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī),、移液器,、1 ml玻璃比色皿、研缽,、冰和蒸餾水,。
NAD+和NADH的提取:
1,、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml酸性提取液),,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中 和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測(cè),。 NADH的提取:按照血清(漿)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml堿性提取液),,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測(cè),。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),,冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失),;冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測(cè)。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml堿性提取液),,冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失),;冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中和,, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測(cè)。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液),, 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,,超聲3s,,間隔10s,重復(fù)30次),,95℃水浴5min (蓋緊,,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測(cè),。 NADH的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),,棄上清,,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液), 超聲波破碎(冰浴,,功率20%或200W,,超聲3s,間隔10s,,重復(fù)30次),,95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失),;冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加 入500μl酸性提取液使之中和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測(cè),。 |
ADH測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,,蒸餾水調(diào)零,。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水,、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,,分別記為A1和A2,。△A空白管=A1-A2,。,。
4. 測(cè)定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4,?!鰽測(cè)定管=A3-A4。
注意:空白管只需測(cè)定一次,。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),,避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子,。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下,。避免用手接觸,,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用,。
枯草芽孢桿菌鋅指蛋白851抗體Human FGFBP2 ELISA Kit豚鼠膽囊收縮/腸促胰肽(CCK)免疫試劑盒
草分枝桿菌嗜乳脂蛋白2亞型A1抗體Human FKBP10 ELISA Kit豚鼠脂(CHE)免疫試劑盒
線殼囊孢(座線孢)磷化c-fos抗體Human FKBP1A ELISA Kit豚鼠單核趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)免疫試劑盒
百脈根中間根瘤菌磷化c-fos抗體Human FKBP14 ELISA Kit豚鼠單核趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒
煙色齒耳磷化原癌基因c-Jun抗體Human FGFR1OP ELISA Kit豚鼠單氧化(MAO)免疫試劑盒
櫟金錢菌磷化原癌基因c-kit抗體Human FGFBP3 ELISA Kit豚鼠催產(chǎn)(OT)免疫試劑盒
反硝化鹽單胞菌1號(hào)染色體開放閱讀框148抗體Human FNDC3A ELISA Kit豚鼠促腎上腺皮質(zhì)激(ACTH)免疫試劑盒
薄層菌屬性T抗原-4抗體Human FKBP1B ELISA Kit豚鼠促卵泡(FSH)免疫試劑盒
細(xì)鏈格孢鈣調(diào)調(diào)節(jié)蛋白相關(guān)蛋白抗體Human FN3KRP ELISA Kit豚鼠雌激(estrogen)免疫試劑盒
暗擬莖點(diǎn)霉(可訂購(gòu))緊密連接蛋白1抗體Human FNTA ELISA Kit豚鼠腸脂肪結(jié)合蛋白(iFABP)免疫試劑盒
產(chǎn)卟啉桿菌1號(hào)染色體開放閱讀框149抗體Human FNIP1(Folliculin-interacting protein 1) ELISA Kit豚鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)免疫試劑盒
產(chǎn)黑鏈霉菌磷化原癌基因c-kit抗體Human FLCN ELISA Kit豚鼠白三烯D4(LTD4)免疫試劑盒
針葉樹散斑殼磷化原癌基因c-kit抗體Human FLJ25006 ELISA Kit豚鼠白三烯B4(LTB4)免疫試劑盒
球孢白僵菌磷化淋巴衍生C-型凝集抗體Human FLJ10357 ELISA Kit豚鼠白介8(IL-8)免疫試劑盒
葡萄座腔菌2號(hào)染色體開放閱讀框39抗體Human FLI1 ELISA Kit豚鼠白介6(IL-6)免疫試劑盒
稻生黃單胞菌2號(hào)染色體開放閱讀框49抗體Human FMN1 ELISA Kit豚鼠白介5(IL-5)免疫試劑盒
根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRα1微球蛋白/bikunin前體試劑盒5-羥基馬鞭草苷
沙漠奇異球菌Deinococcus│deserti 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRα1性糖蛋白試劑盒去氧基醉椒
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRα1抗胰糜蛋白試劑盒去氫駱駝蓬堿
土壤有效硅測(cè)試盒50管/48樣多主葡萄殼 4-叔丁基苯-1,2-二白介22Elisa
鞘氨單胞 4-(溴甲基)苯酸白介23Elisa
康寧木霉 腐植酸鈉白介27Elisa
構(gòu)巢曲霉 3,,5-二茴香硫白介3Elisa
米根霉 (S)-(-)-4-羥基-2-吡咯烷酮白介32Elisa
沉積物鹽坑微 BOC-L-4-苯白介33Elisa
紫麥角 反-4-[4-(4-n-戊基環(huán)己基)苯基]苯白介35Elisa
大豆慢生根瘤 聚(4-苯乙烯磺酸-共聚-馬來(lái)酸)鈉鹽白介38Elisa
食物芽孢桿 六甲磷酰三(HMPA)白介4Elisa
大腸埃希 4-芐氧基溴苯白介5Elisa
嗜麥芽寡養(yǎng)單胞 (R)-(+)-1,1'-(二苯基膦基)烷白介6Elisa
蘇云金芽孢桿 (S)-(+)-環(huán)氧烷白介7Elisa
黑曲霉 1H,1H,2H,2H-全氟-1-癸白介8Elisa
大腸埃希氏 4-溴-2-甲白介9Elisa
產(chǎn)氣莢膜梭 C型 2-間二甲苯白抗原GElisa