Earle's平衡鹽粉劑公司正在銷售的產(chǎn)品：兔孕酮和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)試劑盒Anti-ATG14 Antibody(0503)庚型肝炎病多聚蛋白抗體
兔外基質(zhì)蛋白1(ECM1)試劑盒Anti-ATG7 Antibody內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素/前B克隆增強因子1抗體
兔原纖維蛋白1(FBN1)試劑盒Anti-ATG7 Antibody胰島素原抗體
兔堿性唾液脯氨酸豐富蛋白1(PRB

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定、靈敏度高,、操作簡單,、易保存等特點，咨詢并訂購,！

產(chǎn)品分類：細(xì)胞培養(yǎng)

儲存條件  4℃,12個月

用途  又稱Earle's BSS,厄爾平衡鹽溶液,簡稱為EBSS,本試劑含鈣離子,、鎂離子、葡萄糖,常用于培養(yǎng)細(xì)胞的清洗,尤其是神經(jīng)細(xì)胞,。

注意事項  主要由氯hua鉀,、磷酸二氫鉀、氯化鈉,、碳酸氫鈉,、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀等組成,含鈣鎂糖,。該粉劑溶解于水,如需無菌溶液,應(yīng)過濾除菌,不可高壓滅菌,并密閉保存,。

 

 

配制與標(biāo)定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,；

EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示,，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,，然后用水洗凈,，烘干。

配制步驟：

1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來水、純水洗凈,，烘干,、冷卻。

2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻,。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量,，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液,。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃,；檢測器溫度250℃,；分流進(jìn)樣，分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000,。

4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存,，一份置室溫中保存,，在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對照品溶液,，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量,。記錄下來,，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)PCNA ELISA Kit肌動蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體包裝5ml

抗(AT)AT ELISA Kit蛋白激A2抗體包裝1g

抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)PA-IgG/M/A ELISA Kit血管緊張Ⅱ受體2抗體包裝5g

抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ACA-IgM ELISA KitASH1蛋白抗體包裝100g

抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)ACA-IgG ELISA Kit芳香乙酰脫乙?；鶚拥鞍?抗體包裝25g

抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ACA-IgA ELISA Kit血管內(nèi)皮遷移蛋白抗體包裝5g

抗心肌抗體(AMA)AMA ELISA Kit糖還原相關(guān)蛋白質(zhì)抗體包裝100g

抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)snRNP/Sm ELISA Kit膽汁結(jié)合蛋白DDH2抗體包裝25g

抗線粒體抗體(AMA)AMA ELISA Kit血管生成樣蛋白3抗體包裝500g

抗透明帶抗體IgG(aZP-IgG)aZP-IgG ELISA Kit甘油酯激線粒體抗體包裝50MG

抗透明帶抗體(aZP)aZP ELISA Kit磷化內(nèi)收蛋白a1抗體包裝25ml

抗雙鏈DNA抗體(dsDNA)dsDNA ELISA Kit自噬體ATG16L2蛋白抗體包裝1g

抗平滑肌抗體(ASMA)ASMA ELISA Kit性磷抗體包裝100g

抗凝血受體(ATR)ATR ELISA Kit性磷抗體包裝25g

抗凝血Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)AT-Ⅲ ELISA Kit光激A相互作用蛋白1抗體包裝25g

粘附相關(guān)激抗體B-淋巴激活抗原B7-2(LAB7-2)Palbociclib hydrochloride是高選擇性的 CDK4/6 抑制劑,，IC50 分別為11 nM 和 16 nM。
Earle's平衡鹽粉劑CMKLR1/CHEMR23/FITC  熒光標(biāo)記趨化樣因子受體1IgG氟硅唑標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.00mg/ml

C-Myc/MYC/MTLC /FITC  熒光標(biāo)記C-Myc致癌因IgG銳勁特 ,≥98%(HPLC)

c-Myc tag/FITC  熒光標(biāo)記c-Myc tag標(biāo)簽IgG銳勁特

c-Myc tag/HRP  辣根過氧化物標(biāo)記c-Myc tag標(biāo)簽IgG精噁唑禾草靈

CNGA2/FITC  熒光標(biāo)記抗環(huán)核陽離子通道蛋白α2IgG草膦

CNP/CNPase /FITC  熒光標(biāo)記C型鈉尿肽IgG己唑 ,，98%

CNR-1/FITC  熒光標(biāo)記鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1IgG吡蟲啉 ,，98.5%

CNR-2/FITC  熒光標(biāo)記鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體2IgG吡蟲啉標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.00mg/ml

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基,，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應(yīng)性曲線,，來確定最佳篩選濃度。

一般而言,，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL,；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn),，至少選擇5個濃度,。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃,，CO2培養(yǎng)過夜,；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量,。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型,，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例,，可設(shè)定50,，100，250,，500,，750，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）,。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,，其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,，這取決于宿主細(xì)胞類型,，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果,。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。