MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒
公司正在銷售的產(chǎn)品：兔半胱天冬酶1(CASP1)試劑盒Anti-HRG Antibody(0217)末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶抗體
兔硫酸軟骨素(CS)試劑盒 Anti-HRAS Antibody跨膜蛋白TMED4抗體
兔肌球蛋白重鏈10(MYH10)試劑盒 Anti-HPSE Antibody甲狀腺受體相關(guān)蛋白3抗體
兔重組激活基因2(RAG-2)試劑盒 Anti

產(chǎn)品分類：細(xì)胞檢測

儲存條件：—20℃,避光,12個月

用途：用于細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測

注意事項：主要由MTT、PBS,、DMSO等組成。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定,、靈敏度高、操作簡單,、易保存等特點(diǎn),，咨詢并訂購！

 

配制與標(biāo)定的實驗原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末,，常用H4Y表示,，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。

2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,，然后用水洗凈，烘干,。

配制步驟：

1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來水,、純水洗凈，烘干,、冷卻,。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿,。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,，待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標(biāo)線,，搖勻。

 

 

實驗方法與判定：

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量,，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,，作為對照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,；柱溫120℃,；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃,；分流進(jìn)樣,，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000,。

4.實驗方法：配制的對照品溶液,，一份置冷處保存，一份置室溫中保存,，在第1,、3、7、10,、15天重新配制一份對照品溶液,，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,，并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量,。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,，驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基,，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應(yīng)性曲線,，來確定最佳篩選濃度。

一般而言,，哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL,；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實現(xiàn),，至少選擇5個濃度,。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃,，CO2培養(yǎng)過夜,；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞，可增加接種量,。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型,，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例,，可設(shè)定50,，100，250,，500，750,，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個濃度做三個平行孔。

4）  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）,。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,，其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,，這取決于宿主細(xì)胞類型,，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果,。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。

維A;(標(biāo)準(zhǔn)品) Catharanthine sulfate多巴受體D2抗體包裝5g

維E煙酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Catharanthine sulfate多巴受體D1抗體包裝100ml

（標(biāo)準(zhǔn)品） Combretastatin A4 多巴受體相互作用蛋白1抗體包裝25ml

維生A醋酯（標(biāo)準(zhǔn)品） Oxytetracycline凋亡相關(guān)蛋白激1抗體包裝5ml

維生B1(標(biāo)準(zhǔn)品) Oxytetracycline凋亡相關(guān)蛋白激2抗體包裝1g

維生B12(標(biāo)準(zhǔn)品) Chrysin多巴,、cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體包裝500mg

維生B3(標(biāo)準(zhǔn)品) Chrysin磷化多巴/cAMP調(diào)節(jié)神經(jīng)磷蛋白抗體包裝100g

維生B6（標(biāo)準(zhǔn)品） Formononetin磷化多巴/cAMP調(diào)節(jié)磷蛋白抗體包裝25g

維生C(標(biāo)準(zhǔn)品) Formononetin磷化雙皮質(zhì)抗體包裝25g

維生C鈉（標(biāo)準(zhǔn)品） Daidzein磷化Disabled 1抗體包裝5g

維生K3,萘醌(標(biāo)準(zhǔn)品) Daidzein磷化Disabled 1抗體包裝1g

萎銹靈(標(biāo)準(zhǔn)品) D(-)-allo-Threonine磷化Disabled 1抗體包裝5g

肟菌酯(標(biāo)準(zhǔn)品) Deoxycorticosterone acetate 雙皮質(zhì)抗體包裝25g

烏地爾(標(biāo)準(zhǔn)品) Deoxycorticosterone acetate D酪激衰減蛋白2抗體包裝5g

烏地爾雜質(zhì)A（標(biāo)準(zhǔn)品） Tetrahydro-L-Biopterin (dihydrochloride)磷化D酪激衰減蛋白2抗體包裝25g

: F298資源名稱: 生香毛霉 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR維生B1試劑盒L-色 ; L-Tryptophan

芽胞桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品維生A試劑盒石斛堿;Dendrobine

曲霉Aspergillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于培養(yǎng) 微管相關(guān)蛋白tau試劑盒麝香草; Thymol
MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒

PLGF/FITC  熒光標(biāo)記胎盤生長因子IgG

PLGF /FITC  熒光標(biāo)記人胎盤生長因子（）IgG

PLGF/FITC  熒光標(biāo)記小鼠胎盤生長因子IgG

PMP2 /FITC  熒光標(biāo)記周圍神經(jīng)髓鞘蛋白2IgG

PMP-22/FITC  熒光標(biāo)記外周髓鞘蛋白-22IgG

PMSA/FOLH1/FITC  熒光標(biāo)記前列腺特異膜抗原IgG

PMS2/FITC  熒光標(biāo)記腫瘤錯配修復(fù)因PMS2IgG

PLK1/STPK13/FITC  熒光標(biāo)記絲/蘇氨蛋白激Plk1IgG