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產(chǎn)品分類(lèi):微生物染色
儲(chǔ)存條件:室溫,24個(gè)月
用途:適用于血液和細(xì)胞涂片,、細(xì)菌,、原生動(dòng)物寄生蟲(chóng)等染色
注意事項(xiàng):主要由瑞氏色素、吉姆薩色素混合液,、磷酸鹽緩沖液組成,染色特點(diǎn)是細(xì)胞形態(tài)完整,對(duì)于侵襲性感染標(biāo)本直接涂片染色較佳,。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定,、靈敏度高,、操作簡(jiǎn)單,、易保存等特點(diǎn),咨詢(xún)并訂購(gòu),!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
瑞氏-姬姆薩復(fù)合染色液 | 2×100ml | FS-R7019 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1,、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,,是一種白色晶體粉末,,常用H4Y表示,溶解度很小,,室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,,然后用水洗凈,烘干,。
配制步驟:
1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,,再用自來(lái)水,、純水洗凈,烘干,、冷卻,。
2、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15~0.2g Zn,,蓋好小表面皿,。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,,待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,,用純水稀釋至標(biāo)線(xiàn),,搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,,作為對(duì)照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,;柱溫120℃,;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃,;分流進(jìn)樣,,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,,一份置冷處保存,,一份置室溫中保存,,在第1,、3、7,、10,、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái),,保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,,培養(yǎng)基,,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(kill curve),,即劑量反應(yīng)性曲線(xiàn),來(lái)確定最佳篩選濃度,。
一般而言,,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,;真菌300-1000μg/mL,。
2. 殺滅曲線(xiàn)的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,,可通過(guò)建立殺滅曲線(xiàn)(劑量反應(yīng)曲線(xiàn))來(lái)實(shí)現(xiàn),,至少選擇5個(gè)濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,,37℃,,CO2培養(yǎng)過(guò)夜;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,,可增加接種量,。
2) 根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,,可設(shè)定50,,100,250,,500,,750,1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代),。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,,其效率會(huì)降低,。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,,這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型,,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果,。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。
栗疫菌1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框105抗體Human AMIGO2 ELISA Kit人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化(TACE)免疫試劑盒
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食物鹽單胞菌磷化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接抗體Human AMPK gamma 1 ELISA Kit防御3(DEFA3)免疫試劑盒
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釀酒酵母βA3/A1-crystallin蛋白抗體Human AGS3 ELISA Kit人中心體紡錘體相關(guān)蛋白1(CSPP1)免疫試劑盒
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產(chǎn)二鏈霉菌1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框87抗體Human AK3L1 ELISA Kit人制瘤M受體(OSMR)免疫試劑盒
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: CICC10293←ATCC13048資源名稱(chēng): 產(chǎn)氣腸桿菌 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BRNa+/H+交換體3試劑盒堅(jiān)牢藍(lán)BB鹽
列文虎克菌(加詞待譯)Leeuwenhoekiella│aequorea 質(zhì)量規(guī)格:商品級(jí)N1,N12-二乙?;?8-氧基異歐前胡內(nèi)酯
紅細(xì)菌Rhodobacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,,BRN試劑盒基麥冬黃烷B
瑞氏-姬姆薩復(fù)合染色液HCG(Human Chorionic Gonadotrophin) ELISA Kit 人絨毛膜促性腺激su規(guī)格: 48T
Beta-CG(Human Chorionic Gonadotrophin Beta) ELISA Kit 人絨毛膜促性腺激suβ規(guī)格: 48T
LH(Human luteotropic hormone) ELISA Kit 人促黃體激su規(guī)格: 48T
PS(Human Prednisolone) ELISA Kit 人龍規(guī)格: 48T
LEP(Human Leptin) ELISA kit 人瘦su規(guī)格: 48T