試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存;堿性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存,;試劑一:液體10 mL×1瓶,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,,4℃保存,;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,,用時加入3mL蒸餾水,混勻,,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑四:粉劑×1瓶,4 ℃保存,,用時加入3mL蒸餾水,,混勻,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑五:液體3.6mL×1瓶,,4 ℃保存;試劑六:液體30mL×1瓶,,4 ℃保存,;試劑七:液體50mL×1瓶,4 ℃保存,。
自備儀器和用品:
可見分光光度計,、臺式離心機、移液器,、1 ml玻璃比色皿,、研缽、冰和蒸餾水,。
商品介紹:
測定意義: 賴氨酸是人體必需氨基酸之一,,能促進人體發(fā)育、增強免疫功能,,并有提高中樞神經(jīng)組織功能的作用,。賴氨酸為堿性必需氨基酸。由于谷物食品中的賴氨酸含量甚低,,且在加工過程中易被破壞而缺乏,,故稱為第一限制性氨基酸。 測定原理: 蛋白質(zhì)中的賴氨酸具有一個游離的ε-NH2,,它與茚三酮試劑反應(yīng)生成藍紫色物質(zhì),,其顏色的深淺在一定范圍內(nèi)與賴氨酸的含量成線性關(guān)系。亮氨酸與賴氨酸的碳原子數(shù)目相同,,而且僅有—個游離氨基(ε-NH2),,所以通常用亮氨酸配制標(biāo)準液。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計、臺式離心機,、可調(diào)式移液器,、1mL玻璃比色皿、研缽,、冰,、蒸餾水、水浴鍋,。 |
商品屬性:
NAD+和NADH的提?。?/span>
1、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測,。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測,。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和,, 混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測,。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液),, 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,,超聲3s,,間隔10s,重復(fù)30次),,95℃水浴5min (蓋緊,,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加 入500μl堿性提取液使之中和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測,。 NADH的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi),棄上清,,按照細菌或細胞數(shù)量(104個):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液),, 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,,超聲3s,,間隔10s,重復(fù)30次),,95℃水浴5min (蓋緊,,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測,。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,,蒸餾水調(diào)零,。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水,、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時吸光值,,分別記為A1和A2,。△A空白管=A1-A2,。,。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液,、800μL試劑二和100μL試劑四,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時吸光值,,分別記為A3和A4?!鰽測定管=A3-A4,。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間,、加液的量及順序進行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子,。底物B對光敏感,,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用,。
英文名: Citicoline sodiumDHH蛋白抗體包裝100g
SpermineDNA聚合α抗體包裝25g
SpermidineMREG蛋白抗體包裝5g
Spermidine phosphate salt hexahydrate RAS相關(guān)抑生長蛋白1抗體包裝5MG
Myriocin from Mycelia steriliaMAP激激活死亡域蛋白2C抗體包裝1g
去(標(biāo)準品)英文名: Spermidine trihydrochloride狀腺5'脫3抗體包裝25g
去萬古霉(標(biāo)準品)英文名: CastanospermineD型阿片受體抗體包裝5g
去氧膽(標(biāo)準品)英文名: Spermine tetrahydrochloride畸形表皮自調(diào)節(jié)因子1抗體包裝10g
去氧尿苷(標(biāo)準品)英文名: D-Luciferin potassium腦發(fā)育同源蛋白2抗體包裝50g
炔諾孕(標(biāo)準品)英文名: Ranitidine HCl周期D相互作用蛋白1抗體包裝5g
壬(標(biāo)準品)英文名: Ranitidine HCl發(fā)育相關(guān)蛋白DDX3Y抗體包裝100ml
壬二(標(biāo)準品)英文名: Fluorescein disodium salt核仁蛋白NAP57抗體包裝25ml
日蟾蜍他靈;和蟾他靈(標(biāo)準品)英文名: D-Luciferin sodium saltDLST蛋白抗體包裝500ml
日當(dāng)藥黃(標(biāo)準品)英文名: 2',7'-Dichlorofluorescein Sodium Salt 橋粒斑蛋白1+2抗體包裝10g
地芽孢桿菌Geobacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準品胃內(nèi)因子試劑盒四氫黃連堿;Tetrahydrocopt
ATCC25470=CBS703.69=CCRC11919=DSM40461=IFO13資源名稱: 迪鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,,EP6.2胃泌調(diào)節(jié)似梨木雙黃;Ochnaflavone7
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus Frankland and Frankland 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準品胃泌抗體試劑盒似梨木雙黃-7-O-β-D-吡喃葡萄糖
賴氨酸(LYS)測試盒50管/48樣乳酸乳球 3,4-二氟苯磺酰酮還原1C3Elisa
叢梗孢屬 3-甲基-2-人類嗜TⅠ型病抗體Elisa
燼灰吸水鏈霉 鹽酸阿莫洛芬吻Elisa
紫棕炭團 苯Mdm2 p53結(jié)合蛋白同源物Elisa
弗氏鏈霉 2-萘-6-磺酰磺基轉(zhuǎn)移 1A2Elisa
地衣芽孢桿 2-溴-2',4'-二氟苯乙酮狀瘤病抗原Elisa
劣質(zhì)食用油鑒別速測包 N,N-二甲基癸胰島自身抗體Elisa
肉梭 A型* 4,4'-二苯乙烯二羧酸N-甲基-D-天冬受體抗體Elisa
WAL 14507 [DSM 19850] 表沒食子兒茶沒食子酸酯蛋白激活受體2Elisa
假灰鏈霉 鄰苯二甲酸二(2-丁氧基乙基)酯仙臺病Elisa
嗜糖黃桿 2,6-二甲基-4-庚弗林蛋白Elisa
雙重輪絲鏈霉 2-氨基蒽醌載脂蛋白A1抗體Elisa
頂青霉 烯酰氧乙基基化內(nèi)皮型一氧化氮合Elisa
Nesterenkonia flava 4-溴巴豆酸甲酯磷酸化內(nèi)皮型一氧化氮合Elisa
釀酒酵母 月桂酸磷酸化內(nèi)皮型一氧化氮合Elisa