試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存,;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存,;試劑一:液體10 mL×1瓶,,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,,4℃保存,;試劑三:粉劑×1瓶,-20 ℃保存,,用時(shí)加入3mL蒸餾水,,混勻,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑四:粉劑×1瓶,,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,,混勻,,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,,4 ℃保存,;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存,;試劑七:液體50mL×1瓶,,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì),、臺(tái)式離心機(jī),、移液器,、1 ml玻璃比色皿、研缽,、冰和蒸餾水,。
商品介紹:
測定意義: 賴氨酸是人體必需氨基酸之一,能促進(jìn)人體發(fā)育,、增強(qiáng)免疫功能,,并有提高中樞神經(jīng)組織功能的作用。賴氨酸為堿性必需氨基酸,。由于谷物食品中的賴氨酸含量甚低,,且在加工過程中易被破壞而缺乏,故稱為第一限制性氨基酸,。 測定原理: 蛋白質(zhì)中的賴氨酸具有一個(gè)游離的ε-NH2,,它與茚三酮試劑反應(yīng)生成藍(lán)紫色物質(zhì),其顏色的深淺在一定范圍內(nèi)與賴氨酸的含量成線性關(guān)系,。亮氨酸與賴氨酸的碳原子數(shù)目相同,,而且僅有—個(gè)游離氨基(ε-NH2),所以通常用亮氨酸配制標(biāo)準(zhǔn)液,。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計(jì),、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器,、1mL玻璃比色皿,、研缽、冰,、蒸餾水,、水浴鍋。 |
商品屬性:
NAD+和NADH的提?。?/span>
1,、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取:按照血清(漿)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml酸性提取液),,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml堿性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中 和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測,。 | 2,、組織中NAD+和NADH的提取: NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,,加入1ml酸性提取液),冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測,。 NADH的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,,加入1ml堿性提取液),,冰浴研磨,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),;冰浴 中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl酸性提取液使之中和,, 混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測。 | 3,、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),,棄上清,,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液), 超聲波破碎(冰浴,,功率20%或200W,,超聲3s,間隔10s,,重復(fù)30次),,95℃水浴5min (蓋緊,以防止水分散失),;冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加 入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),,棄上清,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液),, 超聲波破碎(冰浴,,功率20%或200W,超聲3s,,間隔10s,,重復(fù)30次),95℃水浴5min (蓋緊,,以防止水分散失),;冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加 入500μl酸性提取液使之中和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測,。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,,調(diào)節(jié)波長到340 nm,蒸餾水調(diào)零,。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min,。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A1和A2,?!鰽空白管=A1-A2。,。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液,、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4,?!鰽測定管=A3-A4,。
注意:空白管只需測定一次。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子,。底物B對光敏感,,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A、B液時(shí),,避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用,。
英文名: Citicoline sodiumDHH蛋白抗體包裝100g
SpermineDNA聚合α抗體包裝25g
SpermidineMREG蛋白抗體包裝5g
Spermidine phosphate salt hexahydrate RAS相關(guān)抑生長蛋白1抗體包裝5MG
Myriocin from Mycelia steriliaMAP激激活死亡域蛋白2C抗體包裝1g
去(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Spermidine trihydrochloride狀腺5'脫3抗體包裝25g
去萬古霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: CastanospermineD型阿片受體抗體包裝5g
去氧膽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Spermine tetrahydrochloride畸形表皮自調(diào)節(jié)因子1抗體包裝10g
去氧尿苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: D-Luciferin potassium腦發(fā)育同源蛋白2抗體包裝50g
炔諾孕(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Ranitidine HCl周期D相互作用蛋白1抗體包裝5g
壬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Ranitidine HCl發(fā)育相關(guān)蛋白DDX3Y抗體包裝100ml
壬二(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Fluorescein disodium salt核仁蛋白NAP57抗體包裝25ml
日蟾蜍他靈;和蟾他靈(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: D-Luciferin sodium saltDLST蛋白抗體包裝500ml
日當(dāng)藥黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 2',7'-Dichlorofluorescein Sodium Salt 橋粒斑蛋白1+2抗體包裝10g
地芽孢桿菌Geobacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胃內(nèi)因子試劑盒四氫黃連堿;Tetrahydrocopt
ATCC25470=CBS703.69=CCRC11919=DSM40461=IFO13資源名稱: 迪鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%,EP6.2胃泌調(diào)節(jié)似梨木雙黃;Ochnaflavone7
蠟狀芽孢桿菌Bacillus│cereus Frankland and Frankland 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品胃泌抗體試劑盒似梨木雙黃-7-O-β-D-吡喃葡萄糖
賴氨酸(LYS)測試盒50管/48樣乳酸乳球 3,4-二氟苯磺酰酮還原1C3Elisa
叢梗孢屬 3-甲基-2-人類嗜TⅠ型病抗體Elisa
燼灰吸水鏈霉 鹽酸阿莫洛芬吻Elisa
紫棕炭團(tuán) 苯Mdm2 p53結(jié)合蛋白同源物Elisa
弗氏鏈霉 2-萘-6-磺?;腔D(zhuǎn)移 1A2Elisa
地衣芽孢桿 2-溴-2',4'-二氟苯乙酮狀瘤病抗原Elisa
劣質(zhì)食用油鑒別速測包 N,N-二甲基癸胰島自身抗體Elisa
肉梭 A型* 4,4'-二苯乙烯二羧酸N-甲基-D-天冬受體抗體Elisa
WAL 14507 [DSM 19850] 表沒食子兒茶沒食子酸酯蛋白激活受體2Elisa
假灰鏈霉 鄰苯二甲酸二(2-丁氧基乙基)酯仙臺(tái)病Elisa
嗜糖黃桿 2,6-二甲基-4-庚弗林蛋白Elisa
雙重輪絲鏈霉 2-氨基蒽醌載脂蛋白A1抗體Elisa
頂青霉 烯酰氧乙基基化內(nèi)皮型一氧化氮合Elisa
Nesterenkonia flava 4-溴巴豆酸甲酯磷酸化內(nèi)皮型一氧化氮合Elisa
釀酒酵母 月桂酸磷酸化內(nèi)皮型一氧化氮合Elisa