詳細介紹
產(chǎn)品分類:培養(yǎng)基
儲存條件 —20℃,12個月
用途 增加含病毒啟動子的轉(zhuǎn)染基因的表達(抑制組氨酸脫乙酰),阻斷DNA合成,。
注意事項 主要由丁酸鈉,、去離子水組成,工作濃度常為2-5mmol/L
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定,、靈敏度高,、操作簡單、易保存等特點,,咨詢并訂購,!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
丁酸鈉溶液 | 100ml | FS-R6452 |
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因,;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,,常用H4Y表示,,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O,。
2,、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,,然后用水洗凈,,烘干。
配制步驟:
1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水,、純水洗凈,,烘干、冷卻,。
2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿,。
3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,,搖勻,。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,,作為對照品溶液,。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱,;柱溫120℃;進樣口溫度250℃,;檢測器溫度250℃,;分流進樣,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計算應(yīng)不低于10000,。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,,一份置室溫中保存,,在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對照品溶液,,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量,。記錄下來,,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,,推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,,來確定最佳篩選濃度,。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL,;細菌/植物細胞20-200μg/mL,;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細胞的抗生素濃度,,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度,。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,,37℃,CO2培養(yǎng)過夜,;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,,可增加接種量,。
2) 根據(jù)細胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動物細胞為例,,可設(shè)定50,100,,250,,500,750,,1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔,。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞篩選用的工作濃度,。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代),。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷,。則當(dāng)細胞過于稠密,其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果,,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,,轉(zhuǎn)染,,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
甘露聚糖結(jié)合凝集關(guān)聯(lián)絲蛋白1(MASP1)MASP1 ELISA Kit磷化抑癌基因p16抗體包裝1g
甘脫氫(GLDC)GLDC ELISA Kit磷化抑癌基因p16抗體包裝25g
鈣網(wǎng)蛋白(CRT)CRT ELISA Kit磷化CREB-1抗體包裝5g
鈣離子轉(zhuǎn)運ATPB2(ATP2B2)ATP2B2 ELISA Kit磷化粒-巨噬集落激因子受體β抗體包裝1g
鈣離子轉(zhuǎn)運ATPA2(ATP2A2)ATP2A2 ELISA Kit磷化N-鈣粘附分子抗體包裝25g
鈣依賴性磷脂A2(iPLA2)iPLA2 ELISA Kit磷化后期促進復(fù)合蛋白3抗體包裝5g
鈣蛋白抑制蛋白(CAST)CAST ELISA Kit磷化受體酪激c-Abl抗體包裝100g
鈣蛋白10(CAPN10)CAPN10 ELISA Kit磷化受體酪激c-Abl抗體包裝25g
鈣蛋白1(CAPN1)CAPN1 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框75抗體包裝25ml
復(fù)制啟動因子1(REPIN1)REPIN1 ELISA KitCD4抗體包裝5ml
輔肌動蛋白α2(ACTN2)ACTN2 ELISA Kit血小板糖蛋白GPIb抗體包裝1g
封閉蛋白3(CLDN3)CLDN3 ELISA Kit蛋白精N基4抗體包裝1g
封閉蛋白2(CLDN2)CLDN2 ELISA Kit磷化蛋白精N基4抗體包裝25g
分泌性白細胞蛋白抑制因子(SLPI)SLPI ELISA Kit磷化周期依賴性激6抗體包裝5g
分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5)SFRP5 ELISA Kit磷化原癌基因CBL2抗體包裝100mg
細鏈格孢Alternaria│tenuis Nees 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標準品載脂蛋白A4試劑盒遠華蟾蜍精;ocinobufagi
小孢根霉華變種Rhizopus│microsporus var. chinensis 質(zhì)量規(guī)格:含量>99.0%,,無載脂蛋白A2試劑盒氧化;Oxysophoridine
香菇Lentinula│edodes 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標準品載脂蛋白A1試劑盒薏苡;Coixol
丁酸鈉溶液 IFITM1/FITC 熒光標記干擾誘導(dǎo)跨膜蛋白1IgG吡啶-4- 99%
human IFN- Alpha /FITC 熒光標記干擾-α(抗人)IgG2-吡啶 98%
IFN- Beta/FITC 熒光標記干擾-βIgG3-吡啶 98%
IFN- Beta/FITC 熒光標記抗人干擾-β抗IgG吡啶-3- 98%
IFN- Gamma/FITC 熒光標記干擾-γIgG4-吡啶 97%
IFN- Gamma/FITC(Interferon Gamma) 熒光標記抗大,、小鼠IFN-γ抗IgG2-氧-5- 98%
IFNGR2/FITC 熒光標記干擾-gamma受體2IgG氨縮二 97%
IFN- Gamma/HRP 辣根過氧化物標記鼠抗人干擾-γ/IFN-gamma單克隆IgG硫代嗎啉 98%