詳細(xì)介紹
試劑的組成和配制:
酸性提取液:液體50mL×1瓶,,4℃保存,;堿性提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存,;試劑一:液體10 mL×1瓶,,4℃保存;試劑二:液體3 mL×1瓶,,4℃保存;試劑三:粉劑×1瓶,,-20 ℃保存,,用時(shí)加入3mL蒸餾水,混勻,用不完的試劑4℃保存一周,;試劑四:粉劑×1瓶,,4 ℃保存,用時(shí)加入3mL蒸餾水,,混勻,,用不完的試劑4℃保存一周;試劑五:液體3.6mL×1瓶,,4 ℃保存,;試劑六:液體30mL×1瓶,4 ℃保存,;試劑七:液體50mL×1瓶,,4 ℃保存。
自備儀器和用品:
可見分光光度計(jì),、臺(tái)式離心機(jī),、移液器、1 ml玻璃比色皿,、研缽,、冰和蒸餾水。
商品介紹:
測定意義 低密度脂蛋白為血清蛋白之一,,主要由肝臟合成,,與冠心病的發(fā)生和動(dòng)脈粥樣硬化損傷呈正相關(guān),是脂類疾病分類和風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測的一個(gè)重要指標(biāo),。 測定原理 用沉淀劑分離血清中的低密度脂蛋白膽固醇,,利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇和游離脂肪酸,從而把膽固醇酯轉(zhuǎn)化為FC,;進(jìn)一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化,,生成△4-膽甾烯酮和H2O2;再利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替bi林和酚,,生成紅色醌類化合物,;在500nm有特征吸收峰。 需自備的儀器和用品 離心機(jī),,恒溫水浴鍋,、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板,、蒸餾水,。 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 微量法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 100管/96樣 |
產(chǎn)品貨號(hào) | AS6321200 |
NAD+和NADH的提取:
1,、血清(漿)中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),,加入1ml酸性提取液),95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失),; 冰浴中冷卻后,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中 和,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,置冰上待測,。 NADH的提?。喊凑昭澹{)體積(ml):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建 議取約0.1ml血清(漿),加入1ml堿性提取液),,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失); 冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中 和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測,。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):酸性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,加入1ml酸性提取液),,冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,以防止水分散失),;冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min;取500μl上清液,,加入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,10000g 4 ℃離心10min,,取上清,,置冰上待測,。 NADH的提取:按照組織質(zhì)量(g):堿性提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議取約0.1g 組織,,加入1ml堿性提取液),冰浴研磨,,95℃水浴5min(蓋緊,,以防止水分散失);冰浴 中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加入500μl酸性提取液使之中和,, 混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測,。 | 3、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):酸性 提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液),, 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,,超聲3s,,間隔10s,重復(fù)30次),,95℃水浴5min (蓋緊,,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加 入500μl堿性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測,。 NADH的提取:先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),,棄上清,,按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):堿 性提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液),, 超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,,超聲3s,,間隔10s,重復(fù)30次),,95℃水浴5min (蓋緊,,以防止水分散失);冰浴中冷卻后,,10000g 4 ℃離心10min,;取500μl上清液,加 入500μl酸性提取液使之中和,,混勻,,10000g 4 ℃離心10min,取上清,,置冰上待測,。 |
ADH測定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到340 nm,,蒸餾水調(diào)零,。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水,、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,,分別記為A1和A2,。△A空白管=A1-A2,。,。
4. 測定管:在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四,,迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,,分別記錄15s和75s時(shí)吸光值,分別記為A3和A4,?!鰽測定管=A3-A4。
注意:空白管只需測定一次,。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子,。底物B對光敏感,,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,,有毒,。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,,吸取終止液和底物A,、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,,密封保存,以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,,不可保存,。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用,。
鹽藥根堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: L-Lysine methyl ester dihydrochloride同源盒蛋白C6抗體包裝10g
鹽伊立替康(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: L-Methionine Methyl Ester Hydrochloride同源盒蛋白C4抗體包裝10mg
鹽益母草堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Sodium cholesteryl sulfate同源盒蛋白D13抗體包裝50mg
鹽育亨賓(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: O-tert-Butyl-L-serine methyl ester hydrochloride組蛋白H1.4樣蛋白抗體包裝5g
羊膽粉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: L-Valine methyl ester hydrochloride 組蛋白H1FOO抗體包裝1g
羊耳菊(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: L-Valinamide hydrochloride 同源盒蛋白B6抗體包裝1g
羊開口(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Cysteamine Hydrochloride錯(cuò)構(gòu)蛋白抗體包裝25g
羊奶奶葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Glycinamide hydrochloride磷化組蛋白H1FOO抗體包裝5g
楊梅苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: L-4-Hydroxyproline methyl ester hydrochloride單純皰疹病1型轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子ICP22抗體包裝100g
楊梅-3-O-半乳糖苷英文名: D-Leucine methyl ester hydrochlorideH2A組蛋白家族E蛋白抗體包裝25g
楊梅/楊梅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: (s)-2-phenylglycine methyl ester hydrochlorideH2B組蛋白家族M蛋白抗體包裝500g
楊芽黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: H-D-Ala-OEt·HClH2B組蛋白家族成員W蛋白抗體(特異性)包裝1g
洋艾(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: LinagliptinPWWP域包含蛋白1抗體包裝5g
洋川芎內(nèi)酯A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: L-Glutamic Acid 1-Benzyl Ester高密度脂蛋白抗體包裝5g
洋川芎內(nèi)酯H(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: H-Leu-OEt·HClHEAT重復(fù)內(nèi)含蛋白1蛋白抗體包裝100g
熱帶假絲酵母Candida│tropicalis 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于培養(yǎng)卵泡抑試劑盒苦丁冬青甙H;3-O-alpha-L-A
產(chǎn)黃青霉Penicillium│chrysogenum 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品開環(huán)異落葉松樹脂;Secoisolar
CAAS251=CCTCCAB207010=JCM14814資源名稱: 黃色涅斯特連科氏菌 質(zhì)量規(guī)格:≥98.0% 相關(guān)物質(zhì)及對應(yīng)異構(gòu)體均小于1%膽固?;D(zhuǎn)移試劑盒D-(-)-奎寧;Quinic aci
血清低密度脂蛋白(LDLC)測試盒100管/96樣大腸埃希氏 Z-谷安酸叔丁基酯過氧化物Elisa
釀酒酵母 對氟乙酯還原型Elisa
霍氏瓶霉 DL-10-樟腦磺酸海藻糖Elisa
釀酒酵母 3-甲基戊酸乙酯紅色葉綠降解產(chǎn)物還原Elisa
漢遜德巴酵母 2-溴對苯二酸胡蘿卜Elisa
疣孢青霉 5-溴-2-糠酸環(huán)磷酸腺苷Elisa
無花果擬盤多毛孢 2,6-二叔丁基吡啶活性氧Elisa
竹瘤座 2-甲基煙酰肌酸激Elisa
食用香料 折光指數(shù)、相對密度 3-溴-2-氟苯脫落酸Elisa
鹽敏芽孢桿 DL-谷氨酰幾丁質(zhì)Elisa
多帶革孔 酸性棕14己糖激Elisa
少根根霉 N,1-二-Fmoc-L-組交替氧化Elisa
多主葡萄殼 3-硝基三氟甲苯精Elisa
長雙歧桿長亞種 苯并噻吩-2-酸抗壞血酸過氧化物Elisa
滑菇 N-Boc-DL--2-甲酸可溶性蛋白質(zhì)Elisa