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公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定,、靈敏度高、操作簡單,、易保存等特點(diǎn),，咨詢并訂購！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
軟骨染色液 | 100ml | FS-R6697 |
產(chǎn)品分類：骨組織染色
儲存條件：室溫,避光,12個(gè)月
用途：軟骨染色
注意事項(xiàng)：硼酸鹽溶液配制,甲苯胺藍(lán)中的陽離子與組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)結(jié)合而被染色,。染色結(jié)果為：細(xì)胞核呈藍(lán)色,而肥大細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含有肝素等異色性物質(zhì)呈異染性紫紅色,。
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,；
EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末,，常用H4Y表示,，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈,，烘干,。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來水、純水洗凈,，烘干,、冷卻。
2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿。
3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻,。
實(shí)驗(yàn)方法與判定：
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量,，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液,。
3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃,；檢測器溫度250℃,；分流進(jìn)樣，分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000,。
4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存,，一份置室溫中保存,，在第1,、3、7,、10,、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,，并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來,，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,，驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
三白草（標(biāo)準(zhǔn)品） Fluorescein Chloride 磷化G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1抗體包裝5g
三白草（標(biāo)準(zhǔn)品） 2',7'-Dichlorofluorescein磷化G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1包裝1g
三叉苦（標(biāo)準(zhǔn)品） 2,3-Diaminonaphthalene葡萄糖激調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝5g
三尖杉堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Dimidium BromideGTP結(jié)合蛋白10抗體包裝1g
三尖杉寧堿(標(biāo)準(zhǔn)品） 7-(Dimethylamino)-4-methylcoumarin磷化Ras GTP活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
三角葉 7-(Dimethylamino)-4-(trifluoromethyl)coumarinRas GTP活化蛋白結(jié)合蛋白1抗體包裝25g
三棱（標(biāo)準(zhǔn)品） 7-(Diethylamino)coumarin-3-carboxylic Acidγ基丁γ2受體/GABAA Rγ2抗體包裝5g
三七（標(biāo)準(zhǔn)品） Ethyl 6-[4-(Diphenylamino)phenyl]coumarin-3-carboxylate磷化糖原合激3β抗體包裝1g
三七皂甙R1（標(biāo)準(zhǔn)品） Uranine K磷化G蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1抗體包裝100g
三七皂苷Fa Fluorescein Diacetate磷化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝25g
三七皂苷Fe(標(biāo)準(zhǔn)品) 7-Hydroxycoumarin-3-carboxylic Acid磷化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體包裝5g
三七皂苷Ft1（標(biāo)準(zhǔn)品） 7-Diethylamino-4-methylcoumarinG蛋白偶聯(lián)受體激相互作用蛋白1抗體包裝100g
三七皂苷R2(R型)(標(biāo)準(zhǔn)品) Methyl Calcein Blue Hydrate磷化GATA結(jié)合蛋白6抗體包裝25g
三七皂苷R2(S型)(標(biāo)準(zhǔn)品) 6,7-Methylenedioxy-4-methyl-3-maleimidocoumarin磷化γ基丁γ2受體/GABAA Rγ2抗體包裝5g
（標(biāo)準(zhǔn)品） 4-Methyl-6,7-methylenedioxycoumarin胰高血糖受體抗體包裝100g
嗜松青霉Penicillium│pinophilum 質(zhì)量規(guī)格：≥99%鳥脫羧試劑盒乙;Tripdiolide
: B90資源名稱: 產(chǎn)氣腸桿菌 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品黏著斑激試劑盒硫秋仙苷;Thiocolchicosi
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR黏膜地址黏附分子試劑盒硫長春堿;Vinblastine su
軟骨染色液Rad51 Rad51抗原規(guī)格： 0.5mg
RAP1A (RAS-related protein-1a precursor) Rap1A抗原規(guī)格： 0.2ml
RAR- Beta(Retinoic acid -R- Beta) 維jiasuan受體-β抗原規(guī)格： 0.5mg
RASSF1A(Ras association domain family 1A) Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗原規(guī)格： 0.5mg
Resistin 抵抗su抗原規(guī)格： 0.5mg
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,，培養(yǎng)基,，生長條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應(yīng)性曲線，來確定最佳篩選濃度,。
一般而言,，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,；真菌300-1000μg/mL,。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,，可通過建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來實(shí)現(xiàn),，至少選擇5個(gè)濃度。
1） 第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,，37℃,，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,，可增加接種量,。
2） 根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,，可設(shè)定50，100,，250,，500，750，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基,。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。
5） 按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1） 轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。
3） 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染,，以及篩選效果,。
4） 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。
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