公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: AAT是一個(gè)多功能蛋白大家族,,主要負(fù)責(zé)催化生物體內(nèi)各種?;腿ヵ,;磻?yīng),在基因表達(dá),、代謝和信號(hào)傳導(dǎo)中具有重要作用,。 測(cè)定原理: AAT催化乙酰CoA轉(zhuǎn)移乙?;蕉〈?,釋放的CoA還原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,測(cè)定412 nm吸光度增加速率可計(jì)算AAT活性,。 自備儀器和用品: 研缽、冰,、臺(tái)式離心機(jī),、可見分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿,、恒溫水浴鍋,。 |
常見樣本處理方法:
1,、血清(漿)樣品:直接檢測(cè),。
2,、細(xì)菌,、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),,離心后棄上清,;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,,功率20%或200W,,超聲3s,,間隔10s,,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,,取上清,,置冰上待測(cè),。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,,加入1mL提取液),,進(jìn)行冰浴勻漿,。8000g 4℃離心10min,,取上清,置冰上待測(cè),。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1,、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,,快速、簡(jiǎn)便,。
2、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10,。
3,、靈敏度高:檢測(cè)線0.5U/ml,是羥胺法5倍,,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5,、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%,。6、回收試驗(yàn): X =102.3%,。7,、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,,重復(fù)性強(qiáng)。且特異性強(qiáng),,不受類SOD物質(zhì)的干擾8,、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織,、各種體液、灌流液等,、各種培養(yǎng)細(xì)胞,、細(xì)菌、植物組織,、各種水產(chǎn)以及化妝品,、保健品等,,效果均佳,。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱,。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起,。
3.為避免蒸發(fā),,板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中,。
4.加入底物后,,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),,即可終止酶反應(yīng),。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵,。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì),。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色,。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度,、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法,。
桑辛;桑根皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Glycine-N,N-bis(methylenephosphonic Acid)胰高血糖樣肽2受體抗體包裝1g
桑葉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: N-Methyliminodiacetic Acid生長(zhǎng)休止特定蛋白1抗體包裝5g
桑枝(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Nitrilotriacetic Acid Disodium Saltγ-谷酰轉(zhuǎn)移輕鏈1抗體包裝25g
沙蟾精-3-辛二半酯英文名: N-(2-Carboxyethyl)iminodiacetic Acidγ1基丁受體α5/GABRα5抗體包裝5g
沙棘(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Triethylenetetramine-N,N,N',N'',N''',N'''-hexaacetic AcidG蛋白激活內(nèi)向通道1抗體包裝200mg
沙棘膏(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: TAN [=1-(2-Thiazolylazo)-2-naphthol]G蛋白激活內(nèi)向通道3抗體包裝100g
沙苑子(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Dimethylsulfonazo IIIG蛋白偶聯(lián)受體48抗體包裝25g
沙苑子苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Sulfonazo III 糖基轉(zhuǎn)移GLT8D2抗體包裝500g
沙苑子苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 3sodium 2-(4-Sulfophenylazo)-1,8-dihydroxynaphthalene-3,6-disulfonate Hydrate高爾基體外周膜蛋白p65抗體包裝100g
砂仁(陽(yáng)春砂)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: 2,2'-Dihydroxyazobenzene核因子GCNF/維受體相關(guān)受體抗體包裝500g
山茶甙A英文名: StilbazoG蛋白轉(zhuǎn)錄因子α2/Gα t2抗體包裝5g
山茶甙B英文名: Lumogallion 脊髓性肌癥蛋白SMA抗體包裝100mg
山茶苷A英文名: Disodium Bathocuproinedisulfonate脊髓性肌癥蛋白SMA抗體包裝500mg
山豆根(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Bathophenanthrolinedisulfonic Acid Disodium Salt Hydrate脊髓性肌癥蛋白SMA抗體包裝1g
山風(fēng)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名: Bathocuproine (purified by sublimation)轉(zhuǎn)錄因子Gli2抗體包裝1g
鐮孢Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%腦腸肽試劑盒3-O-咖啡酰奎寧;3-O-caffe
黃曲霉Aspergillus│flavus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品囊蟲病抗體試劑盒輪環(huán)藤寧;Cyclen
靈芝(赤芝,,紅靈芝)Ganoderma│lucidium 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP31難辨梭狀芽孢桿菌B試劑盒龍膽山;Bellidifolin
?;D(zhuǎn)移酶(AAT)測(cè)試盒50管/48樣天格爾黃桿 噻-2-酸納豆激Elisa
大腸埃希氏 Brij® S2 聚氧乙烯硬脂酸酯(Brij 72)環(huán)氧合11Elisa
向煙氏鹽微 聚(甲基氫硅氧烷)NK3同源框蛋白1Elisa
磚紅鏈霉 1-戊烯-3-磷酸化酮酸脫氫Elisa
纖維鏈霉 2-苯并噻唑墨蝶呤還原Elisa
太平洋萊茵海默氏 2-羥基苯并咪唑墨蝶呤還原Elisa
貝葉多孔 聚烯趨化因子C-C-基元受體5Elisa
立枯絲核 均苯磺酸鈉抗血小板生成受體抗體Elisa
球孢白僵 Amberlite® IRA-410(Cl) 離子交換樹脂伯氏疏螺旋體IgG抗體Elisa
散生桿 1,3,5-三苯基苯伸展蛋白Elisa
紫色鏈霉 2-乙基N,N-二異基亞磷?;ド鞍爪?Elisa
熱帶頭梗霉 鄰二苯甲互生蛋白γ2Elisa
腐皮鐮孢 順-2--1,4-二蓋膜蛋白βElisa
大隱球酵母 4-羥基喹啉蓋膜蛋白αElisa
枯草芽孢桿 二乙基(3-吡啶基)烷色P450家族成員46A1Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,,1克瓶裝,,每瓶140,000單位,,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,,配成2800單位/ml,。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,,加3ml生理鹽水溶解后,,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,,濕潤(rùn)管壁,,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),,橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,,直至干燥后放入4℃保存,,可使2~5ml血液不凝固。
二,、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種,。同時(shí),,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿,。
1,、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存,。
2,、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存,。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽,、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③,、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④,、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定,。