化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶,，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶,，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶,，4℃保存,；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存,；試劑三：粉劑×1瓶,，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水,，混勻,，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶,，4 ℃保存,，用時加入3mL蒸餾水，混勻,，用不完的試劑4℃保存一周,；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存,；試劑六：液體30mL×1瓶,，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶,，4 ℃保存,。
自備儀器和用品：
可見分光光度計,、臺式離心機(jī)、移液器,、1 ml玻璃比色皿、研缽,、冰和蒸餾水。
商品介紹：
測定意義：TH位于線粒體的內(nèi)膜上,，又稱為線粒體復(fù)合體六,，催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互轉(zhuǎn)化,，調(diào)節(jié)線粒體NAD(H)和NADP(H)平衡,。把逆向反應(yīng)稱為TH-2,，催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。測定原理：NADH和NADPH均在340nm有特征吸收，因此TH催化的轉(zhuǎn)氫反應(yīng)不能導(dǎo)致340nm吸光度發(fā)生變化,。用人工合成底物3-乙酰吡啶腺嘌呤二核苷酸（APAD+）替代NAD+,，TH-2催化APAD+還原生成APADH,，APADH在375nm有特征光吸收,，測定375nm光吸收的增加速率，來計算TH-2活性。需自備的儀器和用品：可見分光光度計,、臺式離心機(jī),、水浴鍋、可調(diào)式移液器,、1mL玻璃比色皿、研缽,、冰和蒸餾水,。 |
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 紫外分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/48樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS6321137 |
NAD+和NADH的提?。?/span>
1,、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提取：按照血清（漿）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿）,，加入1ml酸性提取液）,，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）,； 冰浴中冷卻后,，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液,，加入500μl堿性提取液使之中 和,，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清,，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿）,，加入1ml堿性提取液）,，95℃水浴5min（蓋緊,，以防止水分散失）,； 冰浴中冷卻后,，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液,，加入500μl酸性提取液使之中 和,，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測,。 | 2、組織中NAD+和NADH的提取： NAD+的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液）,，冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊,，以防止水分散失）,；冰浴 中冷卻后,，10000g 4 ℃離心10min,；取500μl上清液,，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min,，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：按照組織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液）,，冰浴研磨,，95℃水浴5min（蓋緊,，以防止水分散失）,；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min,；取500μl上清液,，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min,，取上清,，置冰上待測。 | 3,、細(xì)胞或細(xì)菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取：先收集細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),，棄上清,，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴,，功率20％或200W,，超聲3s，間隔10s,，重復(fù)30次）,，95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）,；冰浴中冷卻后,，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液,，加 入500μl堿性提取液使之中和,，混勻，10000g 4 ℃離心10min,，取上清,，置冰上待測。 NADH的提?。合仁占?xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),，棄上清，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1ml堿性提取液）,， 超聲波破碎（冰浴,，功率20％或200W，超聲3s,，間隔10s,，重復(fù)30次），95℃水浴5min （蓋緊,，以防止水分散失）,；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min,；取500μl上清液,，加 入500μl酸性提取液使之中和,，混勻，10000g 4 ℃離心10min,，取上清,，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預(yù)熱30 min,，調(diào)節(jié)波長到340 nm,，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min,。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水,、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化,，分別記錄15s和75s時吸光值,，分別記為A1和A2?！鰽空白管=A1-A2,。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液,、800μL試劑二和100μL試劑四,，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值,，分別記為A3和A4,。△A測定管=A3-A4,。
注意：空白管只需測定一次,。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣,。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液,。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作,。
④底物A應(yīng)揮發(fā),，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,，避免長時間暴露于光下,。避免用手接觸，有毒,。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值,。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水,。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,，吸取終止液和底物A、B液時,，避免使用帶金屬部分的加樣器 ,。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存,，以免變質(zhì),。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫,。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好,。不同批號的試劑不要混用,。
右佐匹克（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： (R)-(?)-Mandelic acid雌激受體α抗體包裝250mg
魚腥草鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： 1-Aminohydantoin Hydrochloride內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體包裝1g
愈創(chuàng)甘油（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： 1-Aminohydantoin HydrochlorideEphrin A2抗體包裝5g
愈創(chuàng)木磺（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： ACTH (1-24), human大腸埃希菌菌體蛋白抗體包裝1g
遠(yuǎn)華蟾蜍精(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： Bradykinin雌激硫轉(zhuǎn)移抗體包裝25g
月桂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Bradykinin acetateE Tag標(biāo)簽抗體包裝5g
孕三烯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： α-MSH登革熱病包膜糖蛋白E抗體包裝25g
扎來普（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Endothelin-1, human,porcine食道癌相關(guān)基因抗體包裝5g
扎那米韋(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： BombesinEB病核抗原-3A抗體包裝500g
扎托(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： VIP, human, porcine, rat; VIP (28 amino acids)膠質(zhì)谷運載蛋白1抗體包裝1g
正己（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Agarose轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體包裝5g
正十九烷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： PEG 400內(nèi)皮轉(zhuǎn)化1抗體包裝1mg
正十五烷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名： Cholestyramine resin外基質(zhì)蛋白1抗體包裝5mg
芝麻(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： Sucrose外胚層發(fā)育不良抗體包裝25g
酯蟾配基；蟾力蘇(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名： D-(+)-Trehalose, dihydrate E2 tag標(biāo)簽抗體包裝5g
伊尼奧小單孢菌澄江變種Micromonospora│inyoensis var. dengjiangensis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品糖化血紅蛋白A1c試劑盒3,4,5-三氧基酯;Meth
卷曲乳桿菌Lactobacillus│crispatus 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR糖化低密度脂蛋白試劑盒石杉堿;(-)-Huperzine A
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品糖化白蛋白試劑盒楊酯;Birch-Me
轉(zhuǎn)氫酶2測試盒50管/48樣朱黃籃狀 FMOC-D-1,2,3,4-四氫-Β-咔啉-3-羧酸β2巨球蛋白Elisa
Paenibacillus durus 2,3,7,8,12,13,17,18-八乙基-21H,23H-卟吩α-烯化Elisa
解脂假絲酵母 3-氨基-2,2-二甲基-1-(草酸鹽形式）α-烯化Elisa
加德納 8-苯基辛酸胸腺表達(dá)趨化因子Elisa
長蠕孢 N-(4-溴苯基)硫脲再生胰島衍生蛋白4Elisa
褐囊蜜環(huán) N-3-異惡唑叔丁酯p物質(zhì)前提Elisa
野土地桿 5-溴-2-甲酰肼EB病包膜糖蛋白gp350抗體Elisa
釀酒酵母 4-硝基馬尿酸MG29抗體Elisa
不產(chǎn)色鏈霉不產(chǎn)色亞種 4-氨基鄰甲組釋放因子Elisa
釀酒酵母 2-溴-1,3-二-5-氟苯磷酸化肝生長因子受體Elisa
噬果膠黃桿 3--1,2,3-三羧酸map2k5Elisa
地衣芽孢桿 3-氧雜環(huán)丁烷支原體IgG抗體Elisa
康寧木霉 3-二氟甲氧基衣原體抗體IgGElisa
相思根瘤 4-甲氧基-2-乙肺炎支原體IgM抗體Elisa
膨端青霉 2,4-二羥基-3-硝基吡啶肌抗體Elisa
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