公司產(chǎn)品僅供科研使用:
商品介紹:
商品介紹 測(cè)定意義: S-AI在pH 為4.5~5.0(酸性)條件下催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖,,是土壤微生物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一,。 測(cè)定原理: S-AI催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖,進(jìn)一步與3,5-二硝基水楊酸反應(yīng),,生成棕紅色氨基化合物,,在510nm有特征光吸收,在一定范圍內(nèi)510nm光吸收增加速率與AI活性成正比,。 自備用品: 可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀,、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋,、移液器,、微量石英比色皿/96孔板、研缽,、冰和蒸餾水。 |
常見(jiàn)樣本處理方法:
1,、血清(漿)樣品:直接檢測(cè),。
2、細(xì)菌,、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),,離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液) ,,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,,功率20%或200W,超聲3s,,間隔10s,,重復(fù)30次)8000g 4℃離心10min,取上清,,置冰上待測(cè),。組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL提取液),,進(jìn)行冰浴勻漿,。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè),。
產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下:
1,、快速簡(jiǎn)便:雙試劑,直接操作,,快速,、簡(jiǎn)便。
2,、取樣量微:需要的樣本量是羥胺法的1/10,。
3、靈敏度高:檢測(cè)線(xiàn)0.5U/ml,,是羥胺法5倍,,鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好:批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%,,試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效。
5,、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.2%,。6、回收試驗(yàn): X =102.3%,。7,、受外界影響因素小:干擾因素少,,重復(fù)性強(qiáng),。且特異性強(qiáng),不受類(lèi)SOD物質(zhì)的干擾8,、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液,、組織、各種體液,、灌流液等,、各種培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌,、植物組織,、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,,效果均佳,。
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱,。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起,。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中,。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求,。 如室溫高于20℃,,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵,。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色,。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度,、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法,。
蒂蓋姆頭珠霉肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白2(2號(hào)染色體)抗體Human IFIT2 ELISA Kit小鼠抗甲狀腺過(guò)氧化物抗體(TPO-Ab)免疫試劑盒
相思根瘤菌三磷腺檸檬裂解抗體Human ICA1L ELISA Kit小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)免疫試劑盒
那波鏈霉菌β淀粉樣蛋白前體結(jié)合蛋白B-1抗體Human ICAM2(Intercellular adhesion molecule 2) ELISA Kit小鼠抗環(huán)胍肽抗體(Anti-CCP-antibody)免疫試劑盒
谷棒桿菌內(nèi)收蛋白a1抗體Human ICT1 ELISA Kit小鼠抗核小體抗體(IgG)免疫試劑盒
平菇α2纖溶色上皮衍生因子抗體Human IFT81 ELISA Kit小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)免疫試劑盒
羅爾細(xì)薄菌膜粘連蛋白7抗體Human ICK ELISA Kit小鼠抗核抗體IgG 免疫試劑盒
根腐平臍蠕孢早老γ分泌抗體Human IFT80 ELISA Kit小鼠抗弓形蟲(chóng)抗體(IgG)免疫試劑盒
布氏乳桿菌鈉ATP蛋白a1抗體Human IFIT3 ELISA Kit小鼠抗弓形蟲(chóng)IgM抗體免疫試劑盒
psilent-dual1(pSD1)Rho鳥(niǎo)苷交換因子2抗體Human IFT88 ELISA Kit小鼠抗單核抗體(AMA)免疫試劑盒
哈氏弧菌磷化Rho鳥(niǎo)苷交換因子2抗體Human IFITM2(Interferon-induced transmembrane protein 2) ELISA Kit小鼠抗促甲狀腺受體抗體(TRAb)免疫試劑盒
銅綠假單胞菌(綠膿桿菌)*去整合樣金屬蛋白9抗體Human IFIT5 ELISA Kit小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)免疫試劑盒
產(chǎn)色葡萄球菌艾滋病病制約錨定蛋白抗體Human IFITM1(Interferon-induced transmembrane protein 1) ELISA Kit小鼠抗Smith抗體(Sm)免疫試劑盒
變異鹽單胞菌腺苷環(huán)化1抗體Human IFNA6 ELISA Kit小鼠抗IVIgG抗體免疫試劑盒
裂褶菌核糖核L抑制蛋白抗體Human IFRD1 ELISA Kit小鼠抗IgE受體抗體免疫試劑盒
沙壤土桿菌Rho GTP激活蛋白24抗體Human IFRD2 ELISA Kit小鼠卷曲螺旋域結(jié)合蛋白80(CCDC80)免疫試劑盒
東方伊薩酵母GTP激活蛋白ASAP3抗體Human IFI30 ELISA Kit小鼠巨噬移動(dòng)抑制因子(MIF)免疫試劑盒
泊庫(kù)島食烷菌Alcanivorax│borkumensis 質(zhì)量規(guī)格:BR白介18結(jié)合蛋白試劑盒商陸皂苷乙
鐮孢屬Fusarium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR白介18試劑盒絲石竹皂苷元3-O-B-D葡萄糖酯
廈門(mén)海旋菌Thalassospira│xiamenensis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR白介17F試劑盒松香
土壤酸性轉(zhuǎn)化酶(SAI)測(cè)試盒100管/48樣老人頭(梭柄蘑) RS 102895 鹽酸鹽神經(jīng)調(diào)節(jié)1Elisa
漢遜德巴酵母漢遜變種 2-氟苯磺酰巨病抗體Elisa
茄腐鐮刀 2-甲基烯酰氧乙基磷酸Ⅳ型肽精脫亞氨基抗體Elisa
飲料 甲基乙烯基苯(~70% 間位 + ~30% 對(duì)位)乙酰羧化Elisa
白乳菇 2,4-己二酮胰島生長(zhǎng)因子Elisa
Orbilia 消旋硫酸異腎上腺腫瘤易感基因101Elisa
谷棒桿 二苯甲酰硫CD81分子Elisa
土曲霉 2-溴-4,5-二甲基-1,3-噻唑可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1Elisa
居真細(xì) 五氟化(4-氨苯基)硫N-myc交互子Elisa
腐皮鐮刀 2,5-二氟干擾誘導(dǎo)蛋白35Elisa
pRK415 5-溴-2-甲視黃酸誘導(dǎo)基因蛋白IElisa
金黃色葡萄球金黃亞種 3,5-二叔丁基-4-羥基正十六酯含干擾誘導(dǎo)解旋C域蛋白1Elisa
植物乳桿 2-氨基硫酸鹽脂酰合成Elisa
高盧蜜環(huán) 2,3,6-三氟苯肉堿脂酰轉(zhuǎn)移Elisa
小腸結(jié)腸炎耶爾森氏 5-基噻吩-2-甲酸甲酯促胰液Elisa
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,,1克瓶裝,,每瓶140,000單位,,稱(chēng)取0.1克肝素凍干粉,,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml,。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,,血液不會(huì)凝固,。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些,??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml,。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水,。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固,。
二,、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種,。同時(shí),,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱(chēng)之為血漿,。
1,、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存,。
2,、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存,。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑,。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽,、EDTA
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②,、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③,、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。