詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3、進行動物免疫實驗,。
4,、試取血樣進行測試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實驗活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應,、分析化驗,、研究實驗、教學實驗,、化學配方使用的純凈化學品,,產品品質,價格實惠,,多種規(guī)格供應,,售后完善。
產品名稱 | 腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體 |
英文名稱 | ADRB2 |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經除菌并添加防腐劑。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應,。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應,。
(二)準備
1.試劑
經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見,。
白堊色鐮孢大鼠腎小管上皮細胞*培養(yǎng)基
BEL-7402(人肝細胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
根瘤菌 Rhizobium sp.NCTC 1469(小鼠正常肝細胞)
哈茨木霉熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens
人單核細胞白血病細胞釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
麥芽糖假絲酵母 Candida maltosa釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
雜色曲霉 Aspergillus versicolor大鼠肝細胞瘤細胞
小鼠淋巴瘤細胞香菇 Lentinula edodes
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(未分化)
小鼠氣管平滑肌細胞*培養(yǎng)基康寧木霉 Trichoderma koningii
膠原酶(含100mL酶解緩沖液)大鼠肝動脈平滑肌細胞*培養(yǎng)基
嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens
A-431(人表皮細胞)V5 Tag IP/Co-IP Kit/V5標簽免疫沉淀試劑盒
糖原合酶激酶3α(GSK3α)ELISA Kit for Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a)規(guī)格:48T/96T
白蛋白(ALB)ELISA Kit for Albumin (ALB)規(guī)格:48T/96T
緩激肽(BK)ELISA Kit for Bradykinin (BK)規(guī)格:48T/96T
Smad同源物7(Smad7)ELISA Kit for Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7 (Smad7)規(guī)格:48T/96T
對氧磷酶1(PON1)ELISA Kit for Paraoxonase 1 (PON1)規(guī)格:48T/96T
210kDa核孔蛋白(NUP210)ELISA Kit for Nucleoporin 210kDa (NUP210)規(guī)格:48T/96T
107kDa核孔蛋白(NUP107)ELISA Kit for Nucleoporin 107kDa (NUP107)規(guī)格:48T/96T
小核糖核蛋白多肽D1(SNRPD1)ELISA Kit for Small Nuclear Ribonucleoprotein Polypeptide D1 (SNRPD1)規(guī)格:48T/96T
不對稱二基精(ADMA)ELISA Kit for Asymmetrical Dimethylarginine (ADMA)規(guī)格:48T/96T
血管內皮鈣黏蛋白(CDH5)ELISA Kit for Cadherin 5 (CDH5)規(guī)格:48T/96T
肌動蛋白γ1(ACTγ1)ELISA Kit for Actin Gamma 1 (ACTg1)規(guī)格:48T/96T
胱天蛋白酶12(CASP12)ELISA Kit for Caspase 12 (CASP12)規(guī)格:48T/96T
腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體Human Beta-lactamase 檢測試劑盒 β內酰胺酶* 規(guī)格: 48T/96T
Human Beta-glucosidase 檢測試劑盒 β葡糖苷酶* 規(guī)格: 48T/96T
Human beta2 glycoprotein, Beta2-GP 檢測試劑盒 β2糖蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
Human Beta Lactoglobulin, Beta-Lg 檢測試劑盒 β乳球蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
Human Beta catenin, Beta-Cat 檢測試劑盒 β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
Human Beta anti-galactan proteins IgG 檢測試劑盒 β乳糖蛋白抗體IgG* 規(guī)格: 48T/96T
Human Beta amyloid precursor protein, BetaAPP 檢測試劑盒 淀粉樣前體蛋白* 規(guī)格: 48T/96T