詳細介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體,。
3,、進行動物免疫實驗。
4,、試取血樣進行測試,,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實驗活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應的抗體,,抗體是用于化學反應,、分析化驗、研究實驗,、教學實驗,、化學配方使用的純凈化學品,產(chǎn)品品質,,價格實惠,,多種規(guī)格供應,售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | BCL2相關蛋白A1抗體 |
英文名稱 | Bcl2A1 |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,,特異性強,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術:
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應,。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應,。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質,,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見,。
脂蛋白α(Lp-α)稀奇鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces paradoxus
骨膠原交聯(lián)(Cr)白色假絲酵母*拉丁屬名: Candida albicans (Robin) Berkhout
Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)小刺青霉拉丁屬名: Penicillium spinulosum
脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)薄層菌拉丁屬名: Hymenobacter sp.
環(huán)酸鳥苷(cGMP)細疣籃狀菌拉丁屬名: Talaromyces verruculosus
白三烯B4(LTB4) 亮白曲霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,非食用
腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)金龜子綠僵菌拉丁屬名: Metarhizium anisopliae
氧化低密度脂蛋白(OxLDL) 蠟狀芽孢桿菌用途: 害蟲生物防治
骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)折疊馬賽菌拉丁屬名: Massilia plicata
脂聯(lián)素(ADP) 棘孢木霉拉丁屬名: Trichoderma asperellum
組胺(HIS)葡萄園有孢漢遜酵母拉丁屬名: Hanseniaspora vineae
抵抗素(Resistin) 堅強芽孢桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,,非藥用,非食用
骨保護素(OPG) 柵欄擬諾卡氏菌拉丁屬名: Nocardiopsis valliformis
骨成型蛋白2(BMP-2)食堿戈登氏菌拉丁屬名: Gordonia alkanivorans
環(huán)酸腺苷(cAMP)串泡雙型毛霉細小變種拉丁屬名: Ambomucor seriatoinflatus var. minior
乳酸脫氫酶(LDH) 谷氨酸棒桿菌拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum
BCL2相關蛋白A1抗體?;o酶A結合結構域蛋白6抗體Isopeine中文名:別名:6-Methoxyisodictamnine分子式:C13H113
氨基?;?/font>1抗體Vomicine中文名:番木鱉次堿別名:分子式:C22H24N2O4
激活素受體樣激酶1抗體Strychnine中文名:別名:分子式:C21H23N2O2
酰基鞘氨醇脫酰酶2抗體Isomaculosidine中文名:別名:6,8-Dimethoxyisodictamnine分子式:C14H134
脂肪細胞特異性粘附分子抗體Demethylcephalotaxine中文名:去甲基三尖杉酮堿別名:Desmethylcephalotaxine分子式:C17H174