詳細(xì)介紹
產(chǎn)品分類:固定液
儲存條件:室溫,12個月
用途:復(fù)合固定液,含80%乙醇和10%甲醛,既有脫水作用,也有交聯(lián)作用
注意事項(xiàng):屬于脫水-交聯(lián)固定劑,甲醛,、乙酸溶于95%的乙醇即成,。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定,、靈敏度高,、操作簡單、易保存等特點(diǎn),,咨詢并訂購,!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
乙醇-福爾馬林-醋酸固定液 | 500ml | FS-R6816 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,;
EDTA是四元酸,,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,,溶解度很小,,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,,烘干,。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,,再用自來水、純水洗凈,,烘干,、冷卻。
2,、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,,蓋好小表面皿,。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,,待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,,用純水稀釋至標(biāo)線,,搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,;柱溫120℃,;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃,;分流進(jìn)樣,,分流比10:1,。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000,。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,,一份置室溫中保存,,在第1、3,、7,、10、15天重新配制一份對照品溶液,,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量,。記錄下來,,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,,推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,,來確定最佳篩選濃度,。
一般而言,,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,;真菌300-1000μg/mL,。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),,至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,,37℃,,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,,可增加接種量,。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度,。以哺乳動物細(xì)胞為例,,可設(shè)定50,100,,250,,500,750,,1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔,。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。
3) 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克隆(集落)的形成情況。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,,這取決于宿主細(xì)胞類型,,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果,。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。
(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole微小染色體維持缺陷蛋白7抗體包裝25g
龍血A(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazoleE3泛連接MUL1抗體包裝5g
龍芽楤木(標(biāo)準(zhǔn)品) 2-(Chloromethyl)-4-(4-Nitrophenyl)-1,3-thiazole纖微絲相關(guān)糖蛋白2抗體包裝5g
龍眼肉(標(biāo)準(zhǔn)品) 3-Quinuclidinone HCl肥大類糜蛋白1抗體包裝5MG
漏蘆(祁州漏蘆)(標(biāo)準(zhǔn)品) Irsogladine硝唑單克抗體包裝100g
蘆丁/蕓香葉苷(標(biāo)準(zhǔn)品) ADA monosodium salt線粒體核糖體蛋白L12抗體包裝25g
蘆根(標(biāo)準(zhǔn)品) ADA disodium salt線粒體核糖體蛋白L39包裝1g
蘆薈(好望角蘆薈)(標(biāo)準(zhǔn)品) ADA脫氫激1抗體包裝250mg
蘆薈大黃(標(biāo)準(zhǔn)品) (S)-N-Fmoc-2-(4'-pentenyl)alanine絲裂原活化的蛋白激p38β抗體包裝5g
蘆薈苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Prednisolone phosphate sodium核基質(zhì)蛋白3抗體包裝1g
蘆薈苷B(標(biāo)準(zhǔn)品) DMT-CL組織相容性復(fù)合體蛋白1抗體包裝5g
蘆薈新甙D(標(biāo)準(zhǔn)品) N-Phenylbenzohydroxamic Acid;Tantalon組織相容性復(fù)合體蛋白2抗體包裝1g
蘆筍(標(biāo)準(zhǔn)品) 6-Chloroguanosine轉(zhuǎn)化因子樣蛋白4抗體包裝250mg
蘆竹根(標(biāo)準(zhǔn)品) ITP•Na3NADH復(fù)合體5抗體包裝5g
蘆竹堿(標(biāo)準(zhǔn)品) GTP.Na2肌微管1抗體包裝1g
: AS3.4357資源名稱: 納地青霉 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR抗磷脂??贵w試劑盒沒食子兒茶;Gallocatechin
阿魏側(cè)耳Pleurotus│fuscus var. ferulae Lanzi 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于培養(yǎng)抗磷脂酰抗體試劑盒二乙烯苷;tetrahydroxyl
柄孢殼菌Podospora│cochleariformis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR抗磷壁抗體試劑盒二氫麻醉椒苫 ;dihydrometh
乙醇-福爾馬林-醋酸固定液IGF-BP3 人胰島su樣生長因子BP3規(guī)格: 48T
Human Urotensin II 人尾加壓suII規(guī)格: 48T
TSLP(human) 人胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成su規(guī)格: 48T
PLGH 人胎盤生長su規(guī)格: 48T
FN 人纖維連結(jié)蛋白規(guī)格: 48T