產(chǎn)品分類:染色其他
儲存條件:室溫,避光,12個月
用途:膠原纖維染色
注意事項(xiàng):又稱亮綠SF(淡黃)亮綠2G、亮綠S,、酸性綠等分子量792.84,。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定,、靈敏度高,、操作簡單、易保存等特點(diǎn),,咨詢并訂購,!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
亮綠SF染色液 | 100ml | FS-R7134 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,;
EDTA是四元酸,,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,,溶解度很小,,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,,然后用水洗凈,烘干,。
配制步驟:
1,、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,,再用自來水,、純水洗凈,烘干,、冷卻,。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,,蓋好小表面皿,。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,,待Zn溶解后吹洗表面皿,、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,,用純水稀釋至標(biāo)線,,搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,;柱溫120℃,;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃,;分流進(jìn)樣,,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000,。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對照品溶液,,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,,在第1,、3、7,、10,、15天重新配制一份對照品溶液,,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,,并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量,。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,,驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠,。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),,即劑量反應(yīng)性曲線,,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL,;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL,。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),,至少選擇5個濃度,。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,,CO2培養(yǎng)過夜,;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,可增加接種量,。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例,,可設(shè)定50,100,,250,,500,750,,1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度,。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代),。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,,其效率會降低,。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。
3) 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,,這取決于宿主細(xì)胞類型,,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果,。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。
大腸埃希菌DDX58抗體Human TCF4(Transcription factor 4) ELISA Kit人補(bǔ)體因子H(CFH)免疫試劑盒
(鐮刀菌)DG4DDX4抗體Human PLD1(Phospholipase D1) ELISA Kit人補(bǔ)體因子B前體(pre-CFB)免疫試劑盒
蟲草屬鴨瘟病DPV抗體Human YRDC (YrdC domain-containing protein, mitochondrial) ELISA KIT人補(bǔ)體片斷5b(C5b)免疫試劑盒
長雙歧桿菌交聯(lián)纖維蛋白二聚體抗體Human ITIH5L(Inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H5-like protein) ELISA Kit人補(bǔ)體片斷5a(C5a)免疫試劑盒
干草鞘單胞菌腦發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白抗體Human S100A4(Protein S100-A4) ELISA Kit人補(bǔ)體片斷4b(C4b)免疫試劑盒
豬丹絲菌DNA斷裂因子抗體(蛋白激活脫氧核糖核)Human GCLC(Glutamate-cysteine ligase catalytic subunit) ELISA Kit人補(bǔ)體片斷3b(C3b)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌脫氧核糖核γ抗體Human MSRA(Mitochondrial peptide methionine sulfoxide reductase) ELISA Kit人補(bǔ)體片斷3a(C3a)免疫試劑盒
香菇死亡相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子1抗體Human COL4A3BP(Collagen type IV alpha-3-binding protein) ELISA Kit人補(bǔ)體片段4d(C4d)免疫試劑盒
紅栓菌脫氧核糖核1抗體Human TYRO3 (Tyrosine-protein kinase receptor TYRO3) ELISA KIT人補(bǔ)體片段3d(C3d)免疫試劑盒
假黃色桿菌屬脫氧核糖核2抗體Human VMAC (Vimentin-type intermediate filament-associated coiled-coil protein) ELISA KIT人補(bǔ)體片段3c(C3c)免疫試劑盒
雜色曲霉死亡防衛(wèi)蛋白1抗體Human TYRP1 (5,6-dihydroxyindole-2-carboxylic acid oxidase) ELISA KIT人補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)免疫試劑盒
盧森坦類諾氏菌Duffy血型趨化因子受體抗體Human FAM20B(Glycosaminoglycan xylosylkinase) ELISA Kit人補(bǔ)體蛋白9(C9)免疫試劑盒
解淀粉芽孢桿菌DEK癌基因結(jié)合蛋白Human BTN2A1(Butyrophilin subfamily 2 member A1) ELISA Kit人補(bǔ)體蛋白5(C5)免疫試劑盒
釀酒酵母PSD95結(jié)合蛋白1抗體Human HMGB2(High mobility group protein B2) ELISA Kit人補(bǔ)體蛋白4(C4)免疫試劑盒
熱帶假絲酵母PSD95結(jié)合蛋白2抗體Human HMGA1(High mobility group protein HMG-I/HMG-Y) ELISA Kit人補(bǔ)體蛋白3(C3)免疫試劑盒
ChryseobacteriumPSD95結(jié)合蛋白4抗體Human MGP(Matrix Gla protein) ELISA Kit人補(bǔ)體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白1(C1QTNF1/CTRP1)免疫試劑盒
: HBUM81033資源名稱: 鏈霉菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.8%桔皮
: IFO12550ATCC12980BGSC9A20CCM2062BCRC(formerlyCCRC)11092CCUG26241CIP66.23DSM22IAM11062JCM2501KCTC1665KCTC1752LMG6939NCCB75019NCIMB8923(formerlyNCDO1768)NCTC10339NRRLB-1172VKMB-510資源名稱: 嗜熱脂肪地芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品塔薩敏
金針菇Flammulina│velutipes var. velutipes (Curtis) Singer 質(zhì)量規(guī)格:大豆皂苷Bb
亮綠SF染色液APCR(Human activated protein C resistance) ELISA Kit 人活化蛋白C抵抗su規(guī)格: 48T
Ext-N(Human N-terminal extein) ELISA Kit 人N端外顯肽規(guī)格: 48T
SC(Human secretory component) ELISA Kit 人分泌成分規(guī)格: 48T
ADP(Human Adenosine diphosphate) ELISA Kit 人二磷suan腺規(guī)格: 48T
PG(Human Proteoglycan) ELISA Kit 人蛋白聚糖規(guī)格: 48T