電泳級(jí)橙黃G溶液公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品：Anti-OR9Q2 Antibody小鼠腫瘤壞死因子α
Anti-OXR1 Antibody大鼠B瘤因子2
Anti-ORC1 Antibody大鼠CXC趨化因子受體3
Anti-OSR2 Antibody小鼠腫瘤壞死因子β
Anti-OVOL1 Antibody人食欲素/阿立新B
Anti-P2RY11 Antibody小鼠Ⅳ型膠原
Anti-P2RY13

產(chǎn)品分類(lèi)：核酸電泳

儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月

用途：電泳上樣液和生物染色

注意事項(xiàng)：主要由1%甲基橙,、去離子水組成。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠,、效果穩(wěn)定,、靈敏度高,、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),，咨詢并訂購(gòu),！

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因,；

EDTA是四元酸,，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示,，溶解度很小,，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2,、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱(chēng)量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈,，烘干,。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min,，再用自來(lái)水、純水洗凈,，烘干,、冷卻。

2,、用直接稱(chēng)量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱(chēng)取0.15～0.2g Zn,，蓋好小表面皿。

3,、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻,。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量,，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液,。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱,；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃,；分流進(jìn)樣,，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000,。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液,，一份置冷處保存，一份置室溫中保存,，在第1,、3、7,、10,、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液,。照氣相色譜法,，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái),，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,，培養(yǎng)基,，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL,。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve）,，即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度,。

一般而言,，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL,；真菌300-1000μg/mL,。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn),，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,，37℃,，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,，可增加接種量,。

2）  根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型,，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,，可設(shè)定50，100,，250,，500，750,，1000μg/mL,。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液,。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基,，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔,。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基,。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度,。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后,，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷,。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液,。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克隆（集落）的形成情況,。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,，這取決于宿主細(xì)胞類(lèi)型，轉(zhuǎn)染,，以及篩選效果,。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天,。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可,。

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肺炎鏈球菌Streptococcus│pneumoniae 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品石杉?jí)A

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品豆腐果苷
電泳級(jí)橙黃G溶液SCFR ELISA Kit  大鼠干細(xì)胞因子受體規(guī)格： 48T

SDF-1 Beta/CXCL12 ELISA Kit  大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β規(guī)格： 48T

ANG-R-Tie1 ELISA Kit  大鼠血管生成su受體Tie1規(guī)格： 48T

Tie-2 ELISA Kit  大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪氨suan激mei2規(guī)格： 48T

TIMP-2 ELISA Kit  大鼠基質(zhì)金屬蛋白mei抑制因子2規(guī)格： 48T