EGTA 四鈉鹽實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,，后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

服務(wù)流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù),。

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	貨號(hào)
EGTA 四鈉鹽	1 g	FSP073

產(chǎn)品特點(diǎn):
靈敏度高：產(chǎn)品僅用于科研可檢測個(gè)位拷貝數(shù)的基因
特異性高：有效避免非特異性擴(kuò)增的出現(xiàn)
穩(wěn)定性高：復(fù)孔間差異小,，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性強(qiáng)
擴(kuò)增性能優(yōu)：擴(kuò)增效率高，熒光信號(hào)強(qiáng)
?
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué)：基因芯片,、SNP檢測,、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片,、LncRNA芯片,、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE,、SILAC,、iTRAQ、TMT,、Label-free,、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR,、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot,、Co-ip  EMSA,、CHIP、免疫熒光,、ELISA
6.病理檢測：HE染色,、特殊染色、組織切片,、免疫組化,、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS,、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型：原代細(xì)胞,、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
?
使用方法：
注：所有試劑使用前需*解凍,，混合均勻,，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1.樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,，具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書,；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用,。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個(gè)（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管,，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液,、RT-PCR酶所需總量,，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶,。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物,、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s,，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū),。
人1,4,5-三磷酸肌醇（IP3）分析檢測試劑盒Tri-Methyl-Histone H3 (Lys27) (C36B11) Rabbit mAb (HRP Conjugate)100 ul

牛褪黑素（MT）分析檢測試劑盒Secretagogin (D4V1Y) XP® Rabbit mAb20 ul

雞分泌型免疫球蛋白A（SIgA）分析檢測試劑盒Secretagogin (D4V1Y) XP® Rabbit mAb100 ul

大鼠可溶性白介素-2 受體（sIL-2R）分析檢測試劑盒Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb (HRP Conjugate)100 ul

大鼠可溶性CD23（sCD23）分析檢測試劑盒Di-Methyl-Histone H3 (Lys27) (D18C8) XP® Rabbit mAb (HRP Conjugate)100 ul

大鼠顆粒酶B（Gzms-B）分析檢測試劑盒Phospho-Prdx1 (Tyr194) (D1T9C) Rabbit mAb100 ul

大鼠顆粒酶A（Gzms-A）分析檢測試劑盒T7-Tag (D9E1X) XP® Rabbit mAb (HRP Conjugate)100 ul

大鼠抗人生長激素抗體（IgG）分析檢測試劑盒Stat3 (D3Z2G) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)100 ul

大鼠抗弓形蟲IgG抗體分析檢測試劑盒Ubiquitin (P4D1) Mouse mAb (HRP Conjugate)100 ul

大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2（MIP-2）分析檢測試劑盒Acetyl-Histone H3 (Lys9) (C5B11) Rabbit mAb (HRP Conjugate)100 ul

大鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子（CNTF）分析檢測試劑盒Phospho-Doublecortin (Ser334) (D11B10) Rabbit mAb100 ul

大鼠結(jié)締組織生長因子（CTGF）分析檢測試劑盒Acetyl-Histone H3 (Lys27) (D5E4) XP® Rabbit mAb (HRP Conjugate)100 ul

大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1（TIMP-1）分析檢測試劑盒B7-H3 (D9M2L) XP® Rabbit mAb20 ul

大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ（ PPAR-γ）分析檢測試劑盒B7-H3 (D9M2L) XP® Rabbit mAb100 ul

大鼠谷氨酸脫氫酶（GDH/GLDH）分析檢測試劑盒Stat3 (D3Z2G) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100 ul

大鼠睪酮（T）分析檢測試劑盒Lyric/Metadherin (D5Y8R) XP® Rabbit mAb20 ul

大鼠甘丙肽/甘丙素（GAL）分析檢測試劑盒Lyric/Metadherin (D5Y8R) XP® Rabbit mAb100 ul
EGTA 四鈉鹽Saccharomyces│cerevisiae凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Streptomyces│sp.分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌11,、腸球菌培養(yǎng)基: CM0027生長條件: 28C存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié),；真空冷凍干燥

Salmonella│choleraesuis分離基物: 病豬凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: 335生長條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;

Pichia│guilliermondii分離基物: 黑堿土凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 436生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Nesterenkonia│sp.分離基物: 鹽堿土凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 331生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,；-80℃冰箱凍結(jié)法,；真空冷凍干燥法

Pachysolen│tannophilus凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長條件: 20℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0305生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Saccharomyces│cerevisiae分離基物: 老面酵頭斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 發(fā)酵制面包。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法,；定期移植法

Bacillus│vallismortis分離基物: 生物樣/軟珊瑚凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在的生物活性微生物/軟珊瑚共附生菌,，用于篩選活性物質(zhì)產(chǎn)生菌 ,；產(chǎn)酶微生物/淀粉酶，蛋白酶,，脂酶（三丁酸甘油酯）培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
熒光定量PCR原理：
產(chǎn)品僅用于科研熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,，后來也叫Real-Time PCR,，是美國PE（Perkin Elmer）公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的,。其原理：隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,，PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì)，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加,。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán),，收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,，從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖,。
一般而言，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段：熒光背景信號(hào)階段,，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。在熒光背景信號(hào)階段,，擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,，無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺(tái)期,，擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,，PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系，根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù),。只有在熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段,， PCR產(chǎn)物量的對(duì)數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系，我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析,。為了定量和比較的方便,，在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念：熒光閾值和 CT值。