詳細(xì)介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強(qiáng),純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
產(chǎn)品名稱 | 氨基酰化酶1抗體 |
英文名稱 | Aminoacylase 1 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗、研究實驗,、教學(xué)實驗,、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善??贵w的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體,。
3,、進(jìn)行動物免疫實驗,。
4、試取血樣進(jìn)行測試,,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實驗活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
骨保護(hù)素配體OPGL英文名稱:Rat Osteoprotegerin Ligand, OPGL
乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白LF/LTF英文名稱:Rat Lactoferrin, LTF/LF
抗肌內(nèi)膜抗體IgAEMA IgA英文名稱:Rat anti-Endomysial Antibody IgA, EMA IgA
鐵蛋白FE英文名稱:Rat ferritin, FE
碳酸酐酶2CA-2英文名稱:Rat carbonic anhydrase 2, CA-2
色素上皮衍生因子PEDF英文名稱:Rat pigment epithelium-derived factor, PEDF
解整合素樣金屬蛋白酶8ADAM8英文名稱:Rat A Disintegrin And Metalloprotease 8, ADAM8
抗胰蛋白酶AT英文名稱:Rat Anti-trypsin, AT
胰島細(xì)胞抗體ICA英文名稱:Rat islet cell antibody, ICA
腎損傷分子1Kim-1英文名稱:Rat Kidney injury molecule 1, Kim-1
抗單核細(xì)胞抗體AMA英文名稱:Rat anti-Monocyte antibody, AMA
氧化低密度脂蛋白抗體OLAb英文名稱:Rat oxidized lowdensity lipoprotein antibody, OLAb
抗平滑肌抗體ASMA英文名稱:Rat Anti-Smooth Muscle Antibody, ASMA
游離脂肪酸FFA英文名稱:Rat free fatty acids, FFA
骨粘連蛋白ON英文名稱:Rat osteonectin, ON
氨基酰化酶1抗體Pseudomonas putida分離基物: 土樣提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 33生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他
Penicillium sp.分離基物: 枯枝枯葉提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)生真菌毒素培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 26C存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié),;真空冷凍干燥
Streptosporangium sp.分離基物: 龍膽草組織提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 藥用植物內(nèi)生菌培養(yǎng)基: CM0027生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥
黃色短桿菌種屬: Brevibacterium flavum提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)L-脯氨酸。培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Saccharomyces cerevisiae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 安順酵母培養(yǎng)基: 0013生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
短小芽孢桿菌種屬: Bacillus pumilus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Penicillium sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 活性物質(zhì),,卡斯帕酶7抑制活性培養(yǎng)基: CM0018生長條件: 26C存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié),;礦物油法,;定期移植法
歸仁沙門氏菌種屬: Salmonla quinhon提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 47 z44 -培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Hericium erinaceus分離基物: 子實體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分類學(xué)及食用培養(yǎng)基: 17生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;礦物油法,;定期移植法