詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體,。
3,、進(jìn)行動物免疫實(shí)驗(yàn)。
4,、試取血樣進(jìn)行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗(yàn),、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn),、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 溴脫氧尿苷單克隆抗體(增殖標(biāo)志物) |
英文名稱 | BrdU (A7) |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞,、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,,特異性強(qiáng),,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
N端中段骨鈣素檢測試劑盒N-MID Osteocalcin 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周
N-甲基-D-天門冬氨酸(NMDA)受體亞單位NR1檢測試劑盒N-Methyl-D-Aspartate (NMDA) Receptor 1 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周
N-甲基-D-天門冬氨酸(NMDA)受體亞單位NR2檢測試劑盒N-Methyl-D-Aspartate (NMDA) Receptor 2 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周
p53誘導(dǎo)基因3檢測試劑盒p53-Inducible gene 3 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周
R-脊椎蛋白1檢測試劑盒R-spondin-1 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周
S100蛋白檢測試劑盒Soluble protein-100 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周
SKA2檢測試劑盒Spindle and kinetochore-associated protein 2 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周
Syndecan-1;CD138檢測試劑盒Syndecan-1;Cd138 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周
Tamm-Horsfall蛋白檢測試劑盒Tamm-Horsfall 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周
WNT抑制因子1檢測試劑盒Wnt inhibitory factor 1 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周
αL巖藻糖苷酶檢測試劑盒alpha-L-fucosidase 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周
α-氨基羥甲基惡唑丙酸檢測試劑盒AMPA 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周
α-防御素檢測試劑盒α-Defensins 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周
α黑色素細(xì)胞刺激素檢測試劑盒melanocyte stimulating hormone 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周
β3腎上腺素受體檢測試劑盒beta-3 adrenergic receptor 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周
β氨基己糖苷酶檢測試劑盒β-hexosaminidase 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周
β淀粉樣蛋白25-35檢測試劑盒amyloid beta peptide 25-35 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周
β-分泌酶檢測試劑盒β-Secretase 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周
β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1檢測試劑盒β-site APP-Cleaving Enzyme 1 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周
γ-氨基丁酸受體檢測試劑盒GABABR 定做種屬檢測試劑盒/中藥材鑒定試劑盒 50次 低溫 負(fù)20度 一年 2-4周
溴脫氧尿苷單克隆抗體(增殖標(biāo)志物)單甲基組蛋白H3K9抗體Deacetylpseudolaric acid A中文名:別名:分子式:C20H26O5
類免疫缺陷病毒2型抗體(艾滋病病毒)Pinusolidic acid中文名:別名:分子式:C20H28O4
14號染色體開放閱讀框94抗體Deacetylpseudolaric acid C2中文名:別名:分子式:C20H24O7
四磷酸鳥苷水解酶抗體Phytol中文名:植醇別名:2-Phyten-1-ol;植物醇;葉綠醇分子式:C20H40O
熱休克蛋白B2抗體Isocupressic acid中文名:異柏油酸別名:15-Hydroxy-8(17),13E-labdadien-19-oic acid分子式:C20H32O3