EDANS酸實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點(diǎn)檢測(cè)的局限,，實(shí)現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測(cè)一次熒光信號(hào)的強(qiáng)度，并記錄在電腦軟件之中,，通過對(duì)每個(gè)樣品Ct值的計(jì)算,，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。

參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：EDANS酸
貨號(hào)：FSP148
產(chǎn)品規(guī)格：1 g/10 g
分類：熒光核酸試劑
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存,，避免反復(fù)凍融,。
運(yùn)輸：低溫、避光,，快遞免費(fèi)送貨上門,。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
產(chǎn)品僅用于科研本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測(cè)試劑盒 。
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儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃樣品收集,、處理及保存方法
1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2. 血漿：EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清,。
3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物,。
4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清,。
5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃,，避免反復(fù)凍融,，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針法：
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān),。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,，而淬滅劑則在3’ 末端,。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅,。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí),，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離,。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,，釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系,。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性,。
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀有無熱蓋,，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次,，在72℃ 保7min,。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,，以除去石蠟油；否則,，直接取5-10μl電泳檢測(cè),。
小鼠CC趨化因子受體6（CCR-6）分析檢測(cè)試劑盒Acetyl-p53 (Lys382) Antibody100 ul

小鼠B因子（BF）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-p53 (Ser33) Antibody100 ul

兔補(bǔ)體蛋白3（C3）分析檢測(cè)試劑盒p53 (7F5) Rabbit mAb20 ul

豚鼠血管緊張素Ⅱ（ANG-Ⅱ）分析檢測(cè)試劑盒p53 (7F5) Rabbit mAb100 ul

山羊補(bǔ)體蛋白3（C3）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-p53 (Ser315) Antibody20 ul

人肝臟甘油三脂脂肪酶（HTGL）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-p53 (Ser315) Antibody100 ul

人干擾素誘導(dǎo)蛋白10（IP-10/CXCL10）分析檢測(cè)試劑盒Wnt5a/b (C27E8) Rabbit mAb20 ul

人補(bǔ)體因子H（CFH）分析檢測(cè)試劑盒Wnt5a/b (C27E8) Rabbit mAb300 ul

人丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT/GPT）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-AMPKα (Thr172) Antibody100 ul

人八聚體轉(zhuǎn)錄因子（OTF2B）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-AMPKα (Thr172) Antibody300 ul

人β抑制蛋白2（ARRB2）分析檢測(cè)試劑盒AMPK-alpha Antibody100 ul

人α半乳糖苷酶（αGAL）分析檢測(cè)試劑盒AMPK-alpha Antibody100 ul

人KI-67抗原（Ki-67）分析檢測(cè)試劑盒p53 (1C12) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100 ul

人Egl九同源物1（EGLN1/C1orf12/PNAS-118/PNAS-137）分析檢GLI1 (V812) Antibody20 ul

人c-fos 分析檢測(cè)試劑盒GLI1 (V812) Antibody100 ul

人Ⅱ型前膠原N端前肽（PⅡNP）分析檢測(cè)試劑盒EGR1 (44D5) Rabbit mAb (PE Conjugate)300 ul

牛血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1（TSP-1）分析檢測(cè)試劑盒Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) Rabbit mAb100 ul
EDANS酸Monacrosporium│sinense分離基物: 吉林大豆土壤凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 菌核誘集；捕食線蟲培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Escherichia│coli凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 基因工程常用菌培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Escherichia│coli斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 纖維素酶定向進(jìn)化培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法

Aspergillus│sp.分離基物: 沉積物/表層沉積物斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自二甲酸酯類（PAEs）富集菌群培養(yǎng)基: 475生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,；-80℃冰箱凍結(jié)法,；真空冷凍干燥法

普通鏈霉菌種屬: Streptomyces│vulgaris凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0091生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Bacillus│thuringiensis subsp. galleriae分離基物: 經(jīng)紫外光照射誘變而得凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 毒殺玉米螟培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 30-32℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法；礦物油法,；定期移植法

Marisediminibacter│pacifica分離基物: 沉積物/TVG淺黃色鈣質(zhì)軟泥凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株,；產(chǎn)酶微生物/酯酶（Tween 20, Tween 60, Tween80法）、淀粉酶培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,；-80℃冰箱凍結(jié)法,；真空冷凍干燥法

Aspergillus│niger凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Halomonas│titanicae分離基物: 沉積物/TVG淺黃色有孔蟲沙凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 潛在的潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自多環(huán)芳烴降解菌群培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法,；真空冷凍干燥法
操作程序：
產(chǎn)品僅用于科研由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱,、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線,；
商定服務(wù)收費(fèi),、付款方式、服務(wù)期限等,，并簽定技術(shù)服務(wù)合同,。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本PCR所需引物/探針（如果用探針法）,，可以由您自己提供,，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）,。如果由您自己提供,，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針,。
我們進(jìn)行RNA抽提,、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄,、Real-time PCR擴(kuò)增,、數(shù)據(jù)分析。
提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,，包括實(shí)驗(yàn)過程,、所用儀器試劑,、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等,。