詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實驗活體,。
3、進(jìn)行動物免疫實驗,。
4,、試取血樣進(jìn)行測試,查看免疫效果,。
5、如果免疫成功,,殺死實驗活體,,采集全部血清。
6,、純化出抗體,。
7、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗、研究實驗,、教學(xué)實驗,、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39)抗體 |
英文名稱 | ACTH (1-39) |
規(guī)格 | 0.1ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存,??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時需要用到狗,、綿羊,、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,家兔,、豚鼠,、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
出芽短梗霉屎腸球菌 Enterococcus faecium
Bacterial Protein Extraction Reagent/細(xì)菌蛋白抽提試劑 細(xì)胞名稱
黑色淺灰鏈霉菌 Streptomyces nigrogriseolus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
CCRF-CEM(人急性淋巴白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人外周血白細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
Endogeus Enzymes Blocking Buffer/內(nèi)源性過氧化物酶封閉液10ml
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
斯氏普羅菲登斯菌 Providencia stuartii
結(jié)蛋白(Des)重組蛋白英文名稱:Recombinant Desmin (Des)
窖蛋白(CAV1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Caveolin 1 (CAV1)
角蛋白20(KRT20)重組蛋白英文名稱:Recombinant Keratin 20 (KRT20)
骨涎蛋白(BSP)重組蛋白英文名稱:Recombinant Bone Sialoprotein (BSP)
溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 用途: 用于壓力蒸汽滅菌效果評價(GB15981-1995和GB15979-2002)。
內(nèi)臟肪特異性絲蛋白酶抑制因子(Vaspin)ELISA Kit for Visceral Adipose Tissue Derived Serine Protease Inhibitor (Vaspin)規(guī)格:48T/96T
毒蕈堿型膽堿受體M1(CHRM1)ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Muscarinic 1 (CHRM1)規(guī)格:48T/96T
基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 11 (MMP11)規(guī)格:48T/96T
結(jié)蛋白(Des)ELISA Kit for Desmin (Des)規(guī)格:48T/96T
微小染色體維持缺陷蛋白2(MCM2)ELISA Kit for Minichromosome Maintenance Deficient 2 (MCM2)規(guī)格:48T/96T
軸突生長誘向因子1(Ntn1)ELISA Kit for Netrin 1 (Ntn1)規(guī)格:48T/96T
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接分子1(STAM1)ELISA Kit for Signal Transducing Adaptor Molecule 1 (STAM1)規(guī)格:48T/96T
磷酯酶Cγ1(PLCγ1)ELISA Kit for Phospholipase C Gamma 1 (PLCg1)規(guī)格:48T/96T
甘油三酯(TG)ELISA Kit for Triglyceride (TG)規(guī)格:48T/96T
Ⅰ類主要組織相容性復(fù)合體E(MHCE)ELISA Kit for Major Histocompatibility Complex Class I E (MHCE)規(guī)格:48T/96T
環(huán)加氧酶2(PTGS2)ELISA Kit for Prostaglandin Endoperoxide Synthase 2 (PTGS2)規(guī)格:48T/96T
甘露糖結(jié)合蛋白(MBL)ELISA Kit for Manse Binding Lectin (MBL)規(guī)格:48T/96T
促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39)抗體前列環(huán)素合成酶抗體Yatein中文名:別名:分子式:C22H24O7
軟骨寡聚基質(zhì)蛋白抗體Fragransin A2中文名:別名:分子式:C20H24O5
T淋巴細(xì)胞CD1A抗體Lancifolin C中文名:別名:分子式:C22H28O5
磷酸化周期素B1抗體Lyoniside中文名:別名:分子式:C27H36O12
胞漿型磷脂酶A2抗體Boehmenan中文名:別名:分子式:C40H40O12