詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2,、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3,、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn),。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看免疫效果,。
5,、如果免疫成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,,采集全部血清,。
6、純化出抗體,。
7,、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn),、教學(xué)實(shí)驗(yàn),、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,產(chǎn)品品質(zhì),,價(jià)格實(shí)惠,,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善,。
產(chǎn)品名稱 | 細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白3抗體 |
英文名稱 | CDCA3 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,,家兔、山羊,、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,,特異性強(qiáng),純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存,。抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA,、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔,、雞、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔,、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔,、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,,家兔,、山羊、綿羊可采用靜脈采血,。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,,特異性強(qiáng),,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量,、相對(duì)分子的質(zhì)量,、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行,;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會(huì)對(duì)抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
比沙可標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Bisacodyl
基己標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Amicaproic Acid
膽標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Acetylcholine Chloride
肌標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:100mg 英文名稱:Creatinine
舒隆標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Clorsulon
L酪標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:LTyrosine
帕相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
帕標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Iopamidol
加噴標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:250mg 英文名稱:Gabapentin
一水合標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:Morphine Mohydrate CII (AS)
L抗壞血 進(jìn)口,、國產(chǎn) Sodiumascorbate 含量:IND,98%
L抗壞血棕櫚酯 進(jìn)口,、國產(chǎn) Ascorbylpalmitate 含量:高純,,99%
L賴L谷 進(jìn)口,、國產(chǎn) LLysineLglutamatesalt 含量:BR,,98%
L賴酯 進(jìn)口、國產(chǎn) HLysOMe.2HCl 含量:特純,,98.0%
L賴酯 進(jìn)口,、國產(chǎn) HLysOEt•2HCl 含量:特純,98.0%
L酪二鹽 進(jìn)口,、國產(chǎn) LTyrosinedisodiumsalt 含量:昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)級(jí),,98%
L酪酯 進(jìn)口、國產(chǎn) HTyrOme 含量:特純,,98.5%
L酪叔酯 進(jìn)口,、國產(chǎn) LTyrosinetertbutylester 含量:特純,98%
L酪酯 進(jìn)口,、國產(chǎn) LTyrosineethylester 含量:BR,,98%
L酪酯鹽鹽 進(jìn)口、國產(chǎn) LTyrosineethylesterhydrochloride 含量:BR,,98%
細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白3抗體1gXAD-2大孔吸附樹脂98079-52-832981-86-596T接觸蛋白4(CNTN4)HPLC≥98%凋亡相關(guān)半胱肽酶4檢測(cè)試劑盒20mgFABP72218-68-9化學(xué)試劑Exophilin 5蛋白(EXPH5)500mgXAD7HP吸附樹脂98079-52-8126105-11-196T顆粒酶K(GZMK)HPLC≥98%凋亡蛋白酶激活子1檢測(cè)試劑盒20mgA-FABP5536-17-4化學(xué)試劑外切酶體成分1(EXOSC1)
500mgXAD7HP吸附樹脂98079-52-8126105-11-196T顆粒酶K(GZMK)HPLC≥98%凋亡蛋白酶激活子1檢測(cè)試劑盒20mgA-FABP5536-17-4化學(xué)試劑外切酶體成分1(EXOSC1)400mgpET-32a(+) 質(zhì)粒 載體21462-39-588664-08-896T視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白1(RB1)HPLC≥98%淀狀蛋白β檢測(cè)試劑盒5mgFABP45536-17-4化學(xué)試劑Ets變異體3(ETV3)
400mgpET-32a(+) 質(zhì)粒 載體21462-39-588664-08-896T視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤蛋白1(RB1)HPLC≥98%淀狀蛋白β檢測(cè)試劑盒5mgFABP45536-17-4化學(xué)試劑Ets變異體3(ETV3)200mgpET-28a(+) 質(zhì)粒 載體21462-39-567416-61-996T嗜蛋白A(CHGA)HPLC≥98%電子轉(zhuǎn)運(yùn)黃素蛋白-泛醌化還原酶/電子轉(zhuǎn)運(yùn)黃素蛋白脫酶檢測(cè)試劑盒20mgLipo147-94-4化學(xué)試劑Ets變異體2(ETV2)
200mgpET-28a(+) 質(zhì)粒 載體21462-39-567416-61-996T嗜蛋白A(CHGA)HPLC≥98%電子轉(zhuǎn)運(yùn)黃素蛋白-泛醌化還原酶/電子轉(zhuǎn)運(yùn)黃素蛋白脫酶檢測(cè)試劑盒20mgLipo147-94-4化學(xué)試劑Ets變異體2(ETV2)100mgpET-30a(+) 質(zhì)粒 載體21462-39-517019-92-096T毒蕈型膽受體M2(CHRM2)HPLC≥98%電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽檢測(cè)試劑盒5mgLF147-94-4化學(xué)試劑Ets變異體1(ETV1)
100mgpET-30a(+) 質(zhì)粒 載體21462-39-517019-92-096T毒蕈型膽受體M2(CHRM2)HPLC≥98%電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽檢測(cè)試劑盒5mgLF147-94-4化學(xué)試劑Ets變異體1(ETV1)100mgpUC18 質(zhì)粒 載體26016-99-996T緩激肽(BK)HPLC≥98%電壓門控通道抗體檢測(cè)試劑盒20mgLSA147-94-4化學(xué)試劑Espin蛋白(ESPN)