詳細(xì)介紹
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體,。
3,、進(jìn)行動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)。
4,、試取血樣進(jìn)行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng),、分析化驗(yàn),、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn),、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,,產(chǎn)品品質(zhì),價(jià)格實(shí)惠,,多種規(guī)格供應(yīng),,售后完善。
產(chǎn)品名稱 | 胞質(zhì)乙醛脫氫酶1抗體 |
英文名稱 | ALDH1A1 |
規(guī)格 | 0.2ml |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動(dòng)物:常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時(shí)需要用到狗,、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動(dòng)脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,,具有高效,特異性強(qiáng),,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價(jià),,而真空干燥保存時(shí)間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
抗體分子標(biāo)記技術(shù):
(一)原理
當(dāng)應(yīng)用化學(xué)氧化法時(shí)(NaI)遇強(qiáng)氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團(tuán)進(jìn)行鹵化反應(yīng),。蛋白質(zhì)分子可進(jìn)行鹵化反應(yīng)的基團(tuán)主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進(jìn)行化,。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實(shí)驗(yàn)中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強(qiáng)揮發(fā)性的有機(jī)溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng),。
(二)準(zhǔn)備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體,;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸,;70%乙醇;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應(yīng)終止緩沖液,;
2.儀器
凝膠過濾柱;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾,。
(三)操作要點(diǎn)
1.用胺T法進(jìn)行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進(jìn)行;
2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì),可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年;
4.1251標(biāo)記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天),;
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點(diǎn)有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。
甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白AFP英文名稱:Rat Alpha-fetoprotein, AFP
前列腺酸性磷酸酶PAP英文名稱:Rat Prostatic Acid Phosphatase, PAP
游離前列腺特異性抗原fPSA英文名稱:Rat Free Prostate Specific Antigen, fPSA
前列腺特異性抗原PSA英文名稱:Rat prostate specific antigen, PSA
血紅素氧合酶1HO-1英文名稱:Rat heme oxygenase 1, HO-1
磷脂酶A2PL-A2英文名稱:Rat Phospholipidase A2, PL-A2
組織因子途徑抑制物TFPI英文名稱:Rat Tissue factor pathway inhibitor, TFPI
水通道蛋白5AQP-5英文名稱:Rat Aquaporin 5, AQP-5
水通道蛋白4AQP-4英文名稱:Rat Aquaporin 4, AQP-4
水通道蛋白3AQP-3英文名稱:Rat Aquaporin 3, AQP-3
水通道蛋白1AQP-1英文名稱:Rat Aquaporin 1, AQP-1
水通道蛋白0AQP-0英文名稱:Rat Aquaporin 0, AQP-0
水通道蛋白2AQP-2英文名稱:Rat Aquaporin 2, AQP-2
甲狀腺球蛋白TG英文名稱:Rat Thyroglobulin, TG
抑制素AINH-A英文名稱:Rat Inhibin, INH-A
胞質(zhì)乙醛脫氫酶1抗體Monilinia fructicola (G. Winter) Honey分離基物: 自然發(fā)病果提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 22-25存儲條件: 定期移植法
Streptococcus suis分離基物: 豬脾臟病料提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于科研培養(yǎng)基: 396生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;
Streptomyces sp.分離基物: 植物提供形式: 凍干物模式菌株: no培養(yǎng)基: 38生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
赫山單胞菌屬種屬: Herminiimonas sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: AOC分析。培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,,蛋白胨 10.0g,,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,,蒸餾水 1.0L,,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,,則有利于產(chǎn)生芽孢,。pH7.0。121℃,,15min,。生長條件: 20-25℃,好氧,,2-3天,,斜面或平板培養(yǎng)。存儲條件: 真空冷凍干燥法
Halobacillus sp.分離基物: 生物樣/紅樹林腐爛樹根提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 近海細(xì)菌培養(yǎng)基: 471生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法,;-80℃冰箱凍結(jié)法,;真空冷凍干燥法
Rhizobium gallicum分離基物: 根瘤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0063生長條件: 28-30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法,;礦物油法,;定期移植法
Bacillus subtilis分離基物: 海金砂提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抑制棉花枯萎病原菌培養(yǎng)基: CM0003生長條件: 35-37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Aspergillus oryzae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 28℃存儲條件: 定期移植法
Lagovirus Rabbit hemorrhagic disease virus分離基物: 病兔提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: 0生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法;