詳細介紹
抗體的制備過程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA,、HAS等,。
2. 免疫動物:常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔,、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定:得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存:抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
產(chǎn)品名稱 | 膜粘連蛋白2受體抗體 |
英文名稱 | AX2R |
規(guī)格 | 0.2ml |
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公司專業(yè)供應的抗體,,抗體是用于化學反應,、分析化驗、研究實驗,、教學實驗,、化學配方使用的純凈化學品,,產(chǎn)品品質(zhì),,價格實惠,多種規(guī)格供應,,售后完善,。抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,,純化鑒定后可直接作為免疫原,。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,,常見偶聯(lián)載體如BSA,、OVA、HAS等,。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠,、家兔、雞,、大小鼠等,,大量時需要用到狗、綿羊,、山羊等,。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊,、山羊可采用靜動脈采血,,家兔、豚鼠,、大鼠,、雞可采用心臟采血,家兔,、山羊,、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定
得到的抗血清需要進一步的純化,,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,,具有高效,特異性強,,純度高的特定,。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量,、純度以及特異性,。
5. 免疫血清的保存
建議將抗體分裝后進行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久,。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑,。
抗體分子標記技術(shù):
(一)原理
當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化,。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中,。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應,。
(二)準備
1.試劑
經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體;0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5,;無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液,;100g/L三醋酸;70%乙醇,;新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5),;胺T反應終止緩沖液;
2.儀器
凝膠過濾柱,;¥-記數(shù)器,;玻璃纖維濾。
(三)操作要點
1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行,;
2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì),,可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m,并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml,;
3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年,;
4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天);
5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低,;
6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見,。
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體,。
3,、進行動物免疫實驗。
4,、試取血樣進行測試,,查看免疫效果。
5,、如果免疫成功,,殺死實驗活體,采集全部血清,。
6,、純化出抗體。
7,、鑒定抗體,。胎牛血清(無菌采制)
纖維蛋白Fibrin英文名稱:Human Fibrin
血纖肽/纖維蛋白肽BFPB英文名稱:Human fibrinopeptide B, FPB
纖溶酶原激活劑PLGA英文名稱:Human plasminogen activator, PLGA
細胞膜表面免疫球蛋白SmIg英文名稱:Human Surface Membrane Immunoglobulin, SmIg
前白蛋白PA英文名稱:Human prealbumin, PA
硫酸肝素糖蛋白HSPG英文名稱:Human heparin sulphate protoglycans, HSPG
冷球蛋白CG英文名稱:Human Cryoglobulin, CG
紅細胞膜蛋白EMP英文名稱:Human erythrocyte membrane protein, EMP
高鐵血紅蛋白MHB英文名稱:Human Methemoglobin, MHB
低分子肝素LMWH英文名稱:Human low molecular weight heparin, LMWH
補體3裂解產(chǎn)物C3SP英文名稱:Human Complement 3 split product, C3SP
補體片段3b受體C3bR英文名稱:Human Complement fragment 3b rccptor, C3bR
補體1抑制物抗體C1INH英文名稱:Human Complement 1 inhibitor autoantibody, C1INH
B因子BF英文名稱:Human factor B, BF
類白細胞抗原GHLA-G英文名稱:Human leukocyte antigen G, HLA-G
膜粘連蛋白2受體抗體福氏志賀氏菌種屬: Shigla flexneri提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應用領(lǐng)域: B 5 V 7...培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Campylobacter fetus subsp.jejuni提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應用領(lǐng)域: 制備血清 18培養(yǎng)基: CM0112生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
Cupriavidus necator Makkar and Casida 1987模式菌株: 未知
Streptomyces sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 產(chǎn)生堿性水溶性抗生素培養(yǎng)基: CM0038生長條件: 28C存儲條件: 真空冷凍干燥
Monilinia laxa (Aderh. & Ruhland) Honey分離基物: 植物/李/果實提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Aspergillus oryzae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 制白酒用糖化菌。培養(yǎng)基: CM0085生長條件: 28-30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法,;定期移植法
Fusarium oxysporum Schltdl.分離基物: 山藥塊莖提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲條件: 定期移植法
Aspergillus niger提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 產(chǎn)檸檬酸,。培養(yǎng)基: CM0013生長條件: 35℃存儲條件: 礦物油法
肺炎潘多拉菌種屬: Pandoraea pnomenusa分離基物: 活性污泥提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 環(huán)境治理培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法,;礦物油法